马齿苋中一种含氮有机酸及其提取分离方法技术

本发明专利技术涉及中药提取、分离领域，尤其涉及从马齿苋中提取、分离和鉴别出一种含氮有机酸类化合物及其提取分离方法。所述的含氮有机酸类化合物，分子式为C

【技术实现步骤摘要】
马齿苋中一种含氮有机酸及其提取分离方法


[0001]本专利技术涉及中药提取、分离领域，尤其涉及从马齿苋药材中提取、分离和鉴别出的含氮有机酸类化合物及其提取分离方法。

技术介绍

[0002]马齿苋（Portulaca oleracea L.），又名长命菜、马苋菜、五行草，为马齿苋科一年生肉质草本植物。马齿苋耐旱耐涝，且耐光耐阴，分布广泛，资源丰富。大多为野生，很少有人种植，是我国卫生部规定的78种药食同源的野生植物之一。2020版《中华人民共和国药典》中收载马齿苋的干燥地上部分入药，具有清热解毒、凉血止血、止痢等功效，用于热毒血痢、痈肿疔疮、湿疹、丹毒、蛇虫咬伤、便血、痔血、崩漏下血等。
[0003]马齿苋现代药理学研究表明，其具有抗炎止痛、抗菌、抗病毒、降血压、降血脂、抗氧化、抗癌、松弛骨骼肌和平滑肌、调节免疫功能等作用。研究表明马齿苋众多化学成分为其多样的药理作用提供了物质基础，马齿苋主要化学成分包括黄酮类、香豆素类、萜类、甾类、有机酸类、挥发油、生物碱类、氨基酸类、各种色素类和矿物质类等。其中有机酸类是马齿苋中一类主要的化学成分，目前已报道的有机酸类成分有4
‑
羟基
‑5‑
甲基呋喃
‑3‑
羧酸、5
‑
羟甲基糠酸、L
‑
焦谷氨酸、水杨酸、香草酸、对羟基苯甲酸、硬脂酸、棕榈酸、油酸、亚油酸和亚麻酸等。
[0004]目前从马齿苋中分离出的化学成分大多数是已知的，且结构新颖性较低，因此，对马齿苋中新化合物的开发和分离是亟待需要的。

技术实现思路

[0005]针对上述问题，本专利技术提供从马齿苋中提取一种含氮有机酸类化合物，经研究发现本专利技术的含氮有机酸具有抗胆碱酯酶的作用，同时提供一种针对本专利技术新生物碱化合物的简便、快速、环保、纯度高的提取分离方法。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术提供了如下技术方案。
[0007]本专利技术提供一种从马齿苋药材中分离出的含氮有机酸类化合物，其特征在于，分子式为C
16
H
30
N2O5，命名为5
‑
(diethylamino)
‑2‑
(3
‑
(diethylamino)
‑3‑
oxopropyl)
‑2‑
hydroxy
‑5‑
oxopentanoic acid。化学结构式为：。
[0008]本专利技术还提供一种马齿苋中含氮有机酸类化合物的提取分离方法，具体步骤为：步骤1、取马齿苋干燥药材，采用50%乙醇回流提取，减压回收乙醇，放凉至室温，得到药液备用；步骤2、将步骤1中药液经柱层析硅胶柱分离，依次采用不同体积比的乙酸乙酯
‑
乙醇梯度洗脱，共得到4个部位，将3：1洗脱部位蒸干得到2.6kg提取物，，所得的浓缩物经聚酰胺柱分离，采用乙醇
‑
水梯度洗脱，70%乙醇部分蒸干，备用；步骤3、将步骤2中所得部分经预处理的ODS中压柱层析分离，用甲醇
‑
水梯度洗脱，将50：50部分在40℃以下减压浓缩至干，备用；步骤4、将步骤3中所得物经SI中压柱层析分离，以乙酸乙酯等度洗脱，得到6个部位，每瓶200mL，经薄层色谱进行检测，将第一个部位50℃以下减压浓缩至干，备用；步骤5、对步骤4中所得浓缩物进行HPLC分离制备，以乙腈
‑
水
‑
0.1%甲酸作为流动相，检测波长为210nm，280nm，制备得到本专利技术含氮有机酸类化合物。其纯度经高效液相色谱检测高于98%。
[0009]进一步地，所述步骤3中ODS和步骤4中SI的预处理过程为甲醇浸泡过24小时，上柱，用甲醇洗至滴入水中无混浊，再以初始流动相平衡。
[0010]进一步地，所述步骤2中硅胶层析分离依次用体积比为5：1、4：1、3：1和2：1的乙酸乙酯
‑
乙醇梯度洗脱。
[0011]进一步地，所述步骤2中聚酰胺柱分离采用体积比为1：100、50：50、70：30和90：10的乙醇：水梯度洗脱。
[0012]进一步地，所述步骤3中所用甲醇∶水梯度洗脱中甲醇和水的体积比为50∶50、70∶30和90∶10；ODS柱的填料粒度为20～40μm。
[0013]进一步地，所述步骤3中洗脱条件为：室温下加压，使流速1mL/min。
[0014]进一步地，所述步骤4中所用乙酸乙酯洗脱程序为等度洗脱。
[0015]进一步地，所述步骤5中所用乙腈∶0.1%甲酸等度洗脱中乙腈和水的体积比为10∶90。
[0016]本专利技术还提供一种从马齿苋药材中分离出的含氮有机酸类化合物在制备抗胆碱酯酶药物或保健品中的应用。
[0017]与现有技术相比本专利技术的有益效果。
[0018]本专利技术中所述马齿苋含氮有机酸化合物的分离和药理活性研究未被现有论文期刊所报道；本专利技术提供来源于马齿苋的含氮有机酸类化合物及一种针对本专利技术新化合物的提取分离方法，依次采用50%乙醇回流提取、硅胶柱层析、聚酰胺柱层析、ODS中压柱、SI中压柱、HPLC进行分离纯化与制备成功提取分离出一种含氮有机酸类化合物，该方法操作步骤仅为五步，操作方法简便及快速，提取分离过程主要采用50%乙醇提取，工艺方法环保，且经该方法分离得到的化合物纯度较高均大于90%，此外经研究表明该化合物具有抗胆碱酯酶作用，因此本专利技术的一种含氮有机酸类化合物及其盐和衍生物可以作为其他化合物合成先导物，以及新药开发和药理活性研究的原料，亦可用于制备抗胆碱酯酶的药物。
附图说明
[0019]图1为本专利技术含氮有机酸化合物5
‑
(diethylamino)
‑2‑
(3
‑
(diethylamino)
‑3‑
oxopropyl)
‑2‑
hydroxy
‑5‑
oxopentanoic acid的高分辨质谱图。
[0020]图2为本专利技术含氮有机酸化合物5
‑
(diethylamino)
‑2‑
(3
‑
(diethylamino)
‑3‑
oxopropyl)
‑2‑
hydroxy
‑5‑
oxopentanoic acid1H
‑
NMR光谱图。
[0021]图3为本专利技术含氮有机酸化合物5
‑
(diethylamino)
‑2‑
(3
‑
(diethylamino)
‑3‑
oxopropyl)
‑2‑
hydroxy
‑5‑
oxopentanoic acid的
13
C
‑
NMR光谱图。
[0022]图4为本专利技术含氮有机酸化合物5
‑...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从马齿苋药材中分离出的含氮有机酸类化合物，其特征在于，分子式为：C
16
H
30
N2O5，并且根据结构命名为5
‑
(diethylamino)
‑2‑
(3
‑
(diethylamino)
‑3‑
oxopropyl)
‑2‑
hydroxy
‑5‑
oxopentanoic acid，其化学结构式如下：。2.如权利要求1所述的化合物的提取分离方法，其特征在于，具体步骤为：步骤1：称取马齿苋干燥药材150kg，采用50%乙醇回流提取，50%乙醇用量为药材的8～16倍，回流提取两次，每次2h，减压回收乙醇，放凉至室温，得药液备用；步骤2：将步骤1中浓缩液经硅胶柱层析分离，依次用不同体积比的乙酸乙酯
‑
乙醇梯度洗脱，共得到4个部位，将3：1部分蒸干得到2.6kg提取物，提取物经聚酰胺柱分离，采用乙醇
‑
水梯度洗脱，将70%乙醇部分蒸干后备用；步骤3：将步骤2中所得部分经预处理的ODS中压柱层析分离，用甲醇
‑
水洗脱，将50：50部分在40℃以下减压浓缩至干，备用；步骤4：将步骤3中所得物再经SI中压柱层析分离，以乙酸乙酯等度洗脱，得到6个部位，即洗脱得6个瓶，每瓶200mL，经薄层色谱进行检测，将第一个部位50℃以下减压浓缩...

【专利技术属性】
技术研发人员：成泽东，英锡相，郭胜男，田佳音，
申请(专利权)人：辽宁中医药大学，
类型：发明
国别省市：