杀伤细胞凝集素样受体亚家族G成员1(KLRG1)耗竭抗体制造技术

受体杀伤细胞凝集素样受体G1(killer cell lectin

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】杀伤细胞凝集素样受体亚家族G成员1(KLRG1)耗竭抗体
[0001]相关申请
[0002]本申请要求2019年4月9日提交的美国临时专利申请号62/831,713的权益，并且该美国临时专利申请的全部内容并入本文。


[0003]本公开涉及特异性结合杀伤细胞凝集素样受体G1(KLRG1)的抗体或其抗原结合片段。此类抗体或此类抗体的抗原结合片段可用于各种治疗或诊断目的，包括治疗自身免疫性疾病、癌症和提高疫苗的有效性。

技术介绍

[0004]自身免疫和移植
[0005]细胞损伤发生在许多疾病中，是细胞毒性T细胞攻击的结果。例如，致病性细胞毒性T细胞是发生在疾病包涵体肌炎中的肌肉破坏中的关键要素。细胞毒性T细胞损伤组织的类似机制牵涉其他自身免疫性疾病，诸如多发性硬化症、类风湿性关节炎、银屑病、炎症性肠病、自身免疫性甲状腺疾病、1型糖尿病、斑秃、白塞病、强直性脊柱炎和原发性胆汁性肝硬化。
[0006]类似的损伤机制也存在于实体器官移植，诸如移植物抗宿主病和与CD8+T细胞攻击组织相关联的移植环境中发展的器官排斥中，其中有增加比例的高效力的分化增加的T细胞，诸如T效应记忆(Teffector memory,TEM)细胞和T效应记忆RA(T effector memory RA,TEMRA)细胞。
[0007]如在PCT申请号PCT/US2017/051776中所述，杀伤细胞凝集素样受体G1(KLRG1)，一种已知存在于衰老细胞毒性T细胞上的细胞表面标记，已经被本公开的专利技术人证明也存在于具有高杀伤潜力的细胞毒性T细胞上。例如，在包涵体肌炎的情况下，细胞表面KLRG1标记直接杀伤健康肌细胞的T细胞。与关于小鼠和人类的血液中表达KLRG1的T细胞的衰老性和无活性的先前研究的教导不同，表达KLRG1的T细胞可以是有活性和致病性的，使它们成为细胞耗竭疗法的有利靶标。
[0008]在一个示例中，此类细胞耗竭疗法包括向有需要的受试者施用有效量的KLRG1耗竭剂(例如，表达KLRG1的细胞的耗竭剂)。KLRG1耗竭剂可靶向KLRG1的细胞外结构域，包括抗体依赖性细胞毒性(antibody dependent cellular cytotoxicity,ADCC)效应子功能，并且可以消除或减少损伤健康细胞的细胞毒性T细胞和/或NK细胞的数量。
[0009]施用KLRG1耗竭剂也可有效治疗白血病和淋巴瘤，白血病和淋巴瘤也涉及CD8+T细胞的异常扩增。特别地，T细胞大颗粒淋巴细胞白血病(T cell large granular lymphocytic leukemia,T
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LGLL)是一种以晚期分化CD8+T细胞的扩增为特征的白血病，并且NK细胞淋巴增生性疾患是一种以NK细胞扩增为特征的白血病。鼻外NK/T细胞淋巴瘤是一种相关疾患。
[0010]KLRG1是一种II型跨膜蛋白，并且是调节T细胞和NK细胞的活性的共抑制受体。其
细胞外部分含有C型凝集素结构域，C型凝集素结构域的已知配体是钙粘蛋白，并且其细胞内部分含有基于免疫受体酪氨酸的抑制基序(immunoreceptor tyrosine
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based inhibitory motif,ITIM)结构域，该ITIM结构域负责共抑制T细胞受体(T cell receptor,TCR)介导的信号传导。在各种实施方案中，配体可以是E
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钙粘蛋白、N
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钙粘蛋白、R
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钙粘蛋白、或它们的组合。
[0011]与KLRG1的钙粘蛋白配体相关联，KLRG1可以以与许多其他T细胞共抑制受体诸如CTLA
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4、PD
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1、LAG
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3和TIM
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3相似的方式作为共抑制受体起作用。因此，KLRG1是免疫疗法诸如癌症免疫疗法的有利靶标。例如，向有需要的受试者施用有效量的KLRG1/配体结合剂可以破坏KLRG1信号传导并激活CD8+细胞毒性T和/或NK细胞。因此，KLRG1/配体结合剂具有许多治疗用途，包括用于治疗癌症，而不管癌症本身是否表达KLRG1。
[0012]然而，已经观察到，在患有自身免疫性疾病的患者中，使用检查点抑制剂免疫疗法的癌症治疗增加了突发的风险。然而，这些突发与改善的癌症预后相关联。正如Ted Bosworth在2018年6月25日在Rheumatology News上发表的题为“Checkpoint inhibitors in autoimmune disease:More flares,better cancer outcomes”的文章中所指示的，“随着检查点抑制剂的引发，检查点抑制剂主要被提供用于治疗黑素瘤(59％)和非小细胞肺癌(36％)，42％的PAD患者发展出了疾病突发。在这些疾病突发中，30％被认为是严重的......然而，与没有突发或具有免疫相关不良事件的患者相比，那些具有突发或另一免疫相关不良事件的患者具有显著更好的无进展生存期(P＝.016)和总生存期(P＝.004)”不受理论束缚，本研究表明检查点抑制的释放激活了除了肿瘤特异性外，还具有各种类型的特异性的CD8+细胞毒性T和/或NK细胞，这可能导致在所治疗的患者中引发或重新激活自身免疫性疾病。
[0013]因此，本领域中需要用于经受检查点疗法的癌症患者的辅助疗法(不管癌症是否表达KLRG1)，其中辅助疗法包括使用KLRG1结合剂来耗竭攻击自身组织的致病性T细胞和/或NK细胞，有利的是没有损失针对癌细胞的T细胞和/或NK细胞1。
[0014]因此，本领域中需要治疗患有其中癌细胞表达KLRG1的类型的癌症的患者，其中治疗包括使用KLRG1结合剂来耗竭表达KLRG1的癌细胞，其中KLRG1结合剂不释放检查点抑制和随后对针对自身组织的致病性CD8+细胞毒性T和/或NK细胞的激活。
[0015][0016]因此，在自身免疫领域中需要使用KLRG1结合剂来耗竭攻击自身组织的致病性T细胞和/或NK细胞，其中KLRG1结合剂不释放检查点抑制和随后对针对自身组织的致病性CD8+细胞毒性T细胞和/或NK细胞的激活。
[0017]因此，在移植领域中需要使用KLRG1结合剂来耗竭攻击移植组织的致病性T细胞和/或NK细胞，其中KLRG1结合剂不释放检查点抑制和随后对针对移植的或自身的组织或细胞的致病性CD8+细胞毒性T细胞和/或NK细胞的激活。

技术实现思路

[0018]受体杀伤细胞凝集素样受体G1(killer cell lectin
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like receptor G1,KLRG1)在T细胞和NK细胞上表达，所述KLRG1与上皮细胞和间充质细胞上的配体结合。在T细胞和NK
细胞上表达的KLRG1配体已被描述为E
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钙粘蛋白、N
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钙粘蛋白和R
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钙粘蛋白。本公开提供了结合KLRG1的细胞外结构域(ECD)，但不本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种耗竭有需要的受试者中表达KLRG1的T细胞和/或NK细胞而不干扰E
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钙粘蛋白、N
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钙粘蛋白或R
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钙粘蛋白与KLRG1的细胞外结构域结合的方法，所述方法包括：向所述受试者递送有效量的抗体或其片段，其中所述抗体或其片段特异性结合KLRG1的所述细胞外结构域，但不与E
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钙粘蛋白、N
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钙粘蛋白或R
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钙粘蛋白竞争结合KLRG1的所述细胞外结构域，从而耗竭所述受试者中表达KLRG1的T细胞。2.如权利要求1所述的方法，其中所述抗体或其片段包含重链可变区，所述重链可变区包含以下氨基酸序列的三个互补决定区：SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:12、或SEQ ID NO:14；和/或其中所述抗体或其片段包含轻链可变区，所述轻链可变区包含以下氨基酸序列的三个互补决定区：SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:13、或SEQ ID NO:15。3.如权利要求1所述的方法，其中所述KLRG1包括人KLRG1或食蟹猴KLRG1。4.如权利要求1所述的方法，其中所述抗体或其片段包括单克隆抗体或其片段。5.如权利要求4所述的方法，其中所述单克隆抗体或其片段特异性结合包含至少五个连续氨基酸的表位PLNFSRI(SEQ ID NO:56)或其片段。6.如权利要求4所述的方法，其中所述单克隆抗体或其片段包含重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列，或与所述氨基酸序列大约至少90％同一的序列。7.如权利要求4所述的方法，其中所述单克隆抗体或其片段包含轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列，或与所述氨基酸序列大约至少90％同一的序列。8.如权利要求4所述的方法，其中所述单克隆抗体或其片段包含重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列，或与所述氨基酸序列大约至少90％同一的序列。9.如权利要求4所述的方法，其中所述单克隆抗体或其片段包含轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQ ID NO:7的氨基酸序列，或与所述氨基酸序列大约至少90％同一的序列。10.如权利要求4所述的方法，其中所述单克隆抗体或其片段包含重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列，或与所述氨基酸序列大约至少90％同一的序列。11.如权利要求4所述的方法，其中所述单克隆抗体或其片段包含轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列，或与所述氨基酸序列大约至少90％同一的序列。12.如权利要求4所述的方法，其中所述单克隆抗体或其片段包含重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列，或与所述氨基酸序列大约至少90％同一的序列。13.如权利要求4所述的方法，其中所述单克隆抗体或其片段包含轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQ ID NO:11的氨基酸序列，或与所述氨基酸序列大约至少90％同一的序列。14.如权利要求4所述的方法，其中所述单克隆抗体或其片段包含重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO:12的氨基酸序列，或与所述氨基酸序列大约至少90％同一的序列。15.如权利要求4所述的方法，其中所述单克隆抗体或其片段包含轻链可变区，所述轻
链可变区包含SEQ ID NO:13的氨基酸序列，或与所述氨基酸序列大约至少90％同一的序列。16.如权利要求4所述的方法，其中所述单克隆抗体或其片段包含重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO:14的氨基酸序列，或与所述氨基酸序列大约至少90％同一的序列。17.如权利要求4所述的方法，其中所述单克隆抗体或其片段包含轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQ ID NO:15的氨基酸序列，或与所述氨基酸序列大约至少90％同一的序列。18.如权利要求4所述的方法，其中所述单克隆抗体或其片段包括嵌合抗体或其片段。19.如权利要求4所述的方法，其中所述单克隆抗体或其片段包括人源化抗体或其片段。20.一种治疗有需要的受试者中与过量的表达KLRG1的T细胞相关联的疾患的方法，所述方法包括：向所述受试者递送治疗有效量的抗体或其片段，所述抗体或其片段特异性结合KLRG1的细胞外结构域，而不干扰E
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钙粘蛋白、N
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钙粘蛋白或R
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钙粘蛋白与KLRG1的所述细胞外结构域的结合，并且耗竭表达KLRG1的T细胞，其中向所述受试者的所述递送耗竭了过量的表达KLRG1的T细胞，其中所述递送不释放检查点抑制和随后的对针对自身组织的致病性CD8+细胞毒性T和/或NK细胞的激活，从而治疗所述疾患，其中所述抗体或其片段包含：重链可变区，所述重链可变区包含以下氨基酸序列的三个互补决定区：SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:12、或SEQ ID NO:14；并且/或者其中所述抗体或其片段包含：轻链可变区，所述轻链可变区包含以下氨基酸序列的三个互补决定区：SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:13、或SEQ ID NO:15。21.如权利要求20所述的方法，其中所述疾患包括移植疾患，并且其中向所述受试者的所述递送耗竭了攻击所述受试者中的移植组织的表达KLRG1的致病性T细胞和/或NK细胞。22.如权利要求20所述的方法，其中所述疾患包括自身免疫性疾病，并且其中向所述受试者的所述递送耗竭了攻击所述受试者中的自身组织的表达KLRG1的致病性T细胞和/或NK细胞。23.一种治疗受试者的癌症的方法，其中所述癌症包括表达KLRG1的癌细胞，所述方法包括：向所述受试者递送治疗有效量的抗体或其片段，所述抗体或其片段特异性结合KLRG1的细胞外结构域，而不干扰E
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钙粘蛋白、N
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钙粘蛋白或R
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钙粘蛋白与KLRG1的所述细胞外结构域的结合，其中向所述受试者的所述递送耗竭了表达KLRG1的癌细胞，并且
其中所述递送不释放检查点抑制和随后的对针对自身组织的致病性CD8+细胞毒性T和/或NK细胞的激活，其中所述抗体或其片段包含：重链可变区，所述重链可变区包含以下氨基酸序列的三个互补决定区：SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:12、或SEQ ID NO:14；并且/或者其中所述抗体或其片段包含：轻链可变区，所述轻链可变区包含以下氨基酸序列的三个互补决定区：SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:13、或SEQ ID...

【专利技术属性】
技术研发人员：斯蒂芬诺，
申请(专利权)人：阿波科有限责任公司，
类型：发明
国别省市：