嗜吡啶红球菌聚羟基脂肪酸酯合成酶及其编码基因与应用制造技术

本发明专利技术涉及基因工程技术领域，公开了嗜吡啶红球菌聚羟基脂肪酸酯合成酶及其编码基因与应用，所述嗜吡啶红球菌聚羟基脂肪酸酯合成酶来源于嗜吡啶红球菌，具有较好的序列新颖性，具有良好的短链单体聚合活性，对3

【技术实现步骤摘要】
嗜吡啶红球菌聚羟基脂肪酸酯合成酶及其编码基因与应用


[0001]本专利技术涉及基因工程
，特别是嗜吡啶红球菌聚羟基脂肪酸酯合成酶及其编码基因与应用。

技术介绍

[0002]聚羟基脂肪酸酯(PHA)是许多细菌合成脂肪族聚酯，是作为细胞内碳源和能量储存物质。PHA是一种可降解塑料，具有良好的生物降解性，丢弃到环境中后可由环境微生物作用产生水和二氧化碳。PHA用作环保材料有可能解决或减少石油基塑料带来的白色污染等一系列环境问题，可以用于制备可生物降解的薄膜、容器等包装材料。PHA还具有组织相容性特点，因此在组织工程材料领域也有很大的应用前景，可用于外科手术缝合线、药物释放载体、聚合物支架等医用材料。PHA根据聚合单体碳原子数可分为由3
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5个碳原子单体组成的短链PHA和由6
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14个碳原子单体组成的中长链PHA。
[0003]PHA合成酶是PHA生物合成中的关键酶，可聚合羟酰基辅酶A(HA
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CoA) 产生高分子量聚合物PHA。迄今为止，PHA合成酶已被广泛发现并根据其氨基酸残基序列本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.嗜吡啶红球菌聚羟基脂肪酸酯合成酶，其特征在于，所述嗜吡啶红球菌聚羟基脂肪酸酯合成酶的氨基酸残基序列如SEQ ID NO：1所示。2.根据权利要求1所述的嗜吡啶红球菌聚羟基脂肪酸酯合成酶的编码基因，其特征在于，所述编码基因的脱氧核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。3.含有权利要求2所述的编码基因的表达载体、基因工程菌和转基因细胞系。4.一种在大肠杆菌中异源表达嗜吡啶红球菌聚羟基脂肪酸酯合成酶的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)根据权利要求1中所述的嗜吡啶红球菌聚羟基脂肪酸酯合成酶的氨基酸残基序列，在该序列的C端加上6
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His标签，后根据大肠杆菌的密码子的偏好性设计基因序列，得到适用于大肠杆菌表达的所述的嗜吡啶红球菌聚羟基脂肪酸酯合成酶的优化基因序列；(2)根据优化基因序列进行全基因合成，连入大肠杆菌pET系列表达载体，构建表达质粒,之后导入大肠杆菌BL21(DE3)中，进行培养繁殖；(3)通过异丙基
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β
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D
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硫代半乳糖苷诱导酶的表达后，经分离纯化获得嗜吡啶红球菌聚羟基脂肪酸酯合成酶。5.根据权利要求4所述的在大肠杆菌中异源表达嗜吡啶红球菌聚羟基脂肪酸酯合成酶的方法，其特征在于，优化基因序列如SEQ ID NO：3所示。6.根据权利要求4所述的在大肠杆菌中异源表达嗜吡啶红球菌聚羟基脂肪酸酯合成酶的方法，其特征在于，大肠杆菌BL21(DE3)导入聚羟基脂肪酸酯合成酶的优化基因序列后，在含有卡那霉素抗性的LB培养基中培养至OD
600
为0.3
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【专利技术属性】
技术研发人员：郭文斌，
申请(专利权)人：自然资源部第三海洋研究所，
类型：发明
国别省市：