一种热稳定性提高的蔗糖磷酸化酶突变体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种热稳定性提高的蔗糖磷酸化酶突变体及其应用，属于生物技术领域。本发明专利技术提供的蔗糖磷酸化酶的热稳定性较野生型有明显提高，利用此方法生产的蔗糖磷酸化酶突变体在45℃下具有较好的热稳定性，其中，突变体Y334F、突变体P443T及突变体S444D的半衰期相比较于野生型来说有很大的提高，突变体P443T的半衰期大约为170min，比野生型(半衰期为96min)提高了77％。本发明专利技术属于酶工程和微生物工程技术领域，其有益效果是得到热稳定性优于野生型蔗糖磷酸化酶的突变体，以便更好地适应工业生产。应工业生产。应工业生产。

【技术实现步骤摘要】
NO.2所示。
[0009]在本专利技术的一种实施方式中，所述突变体是将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蔗糖磷酸化酶的第334位的酪氨酸突变为苯丙氨酸得到的，命名为Y334F；
[0010]或，所述突变体是将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蔗糖磷酸化酶的第443位的脯氨酸突变为苏氨酸得到的，命名为P443T；
[0011]或，所述突变体是将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蔗糖磷酸化酶的第444位的丝氨酸突变为天冬氨酸得到的，命名为S444D。
[0012]本专利技术还提供了编码上述突变体的基因。
[0013]本专利技术还提供了携带上述基因的重组载体。
[0014]在本专利技术的一种实施方式中，以pET
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28a(+)质粒为表达载体。
[0015]本专利技术还提供了表达上述突变体，或携带上述基因，或携带上述重组载体的重组细胞。
[0016]在本专利技术的一种实施方式中，所述重组细胞以细菌或真菌为宿主细胞。
[0017]本专利技术还提供了一种重组大肠杆菌，所述重组大肠杆菌表达了本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种蔗糖磷酸化酶突变体，其特征在于，所述突变体是将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蔗糖磷酸化酶的第334位、第443位、第444位的氨基酸中的任意一个进行突变得到的。2.如权利要求1所述的突变体，其特征在于，所述突变体是将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蔗糖磷酸化酶的第334位的酪氨酸突变为苯丙氨酸得到的；或，所述突变体是将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蔗糖磷酸化酶的第443位的脯氨酸突变为苏氨酸得到的；或，所述突变体是将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蔗糖磷酸化酶的第444位的丝氨酸突变为天冬氨酸得到的。3.编码权利要求1或2所述突变体的基因。4.携带权利要求3所述基因的重组载体。5.表达权利要求1或2所述突变体，或携带权利要求3所述基因，或携带权利要求4所述重组载体的重组细胞。6.如权利要求5所述的重组细胞...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩瑞枝，涂文雨，刘双玉，倪晔，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：