一种特异性T细胞的培养方法技术

本发明专利技术提供一种特异性T细胞的培养方法，包括以下步骤：S1.将细胞培养器材用包被液进行包被；S2.抽取人体外周血并提取得到T细胞；S3.将步骤S2得到的T细胞接种于步骤S1包被后的细胞培养器材中并用扩增培养液培养过夜；S4.当步骤S3培养过夜后的T细胞的CD56表达在50

【技术实现步骤摘要】
一种特异性T细胞的培养方法


[0001]本专利技术是一种特异性T细胞的培养方法，属于细胞培养


技术介绍

[0002]哺乳动物包括独特的免疫系统，用不同方式起到防御细菌、病毒、毒素以及其他非宿主物质入侵宿主的作用，其中T淋巴细胞起到主要作用。T淋巴细胞来源于骨髓的多能干细胞，在人体胚胎期和初生期，骨髓中的一部分多能干细胞或前T细胞迁移到胸腺内，在胸腺激素的诱导下分化并发育成熟，成为具有免疫活性的T细胞，通过淋巴和血液循环而分布到全身的免疫器官和组织中发挥免疫功能。
[0003]T细胞由于具有较多功能和不同的发育阶段，可分为若干亚群，最主要的种类有辅助性T细胞、抑制性T细胞、效应T细胞、细胞毒性T细胞、迟发性变态反应T细胞、放大T细胞、天然T细胞、记忆T细胞等等。
[0004]随着我国癌症发病率呈逐年升高的趋势，以及治疗手段的不断发展，越来越多的医疗单位开始用免疫细胞培养方法培养免疫细胞，但培养周期较长且细胞的死亡速度可能高于细胞的增殖速度，比如专利文件CN107686831A公开的一种针对胰腺癌的Car
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种特异性T细胞的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.将细胞培养器材用包被液进行包被，包被液包括质量比为3
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5:1的重组人纤维连接蛋白和CD3单克隆抗体；S2.抽取人体外周血并提取得到T细胞；S3.将步骤S2得到的T细胞接种于步骤S1包被后的细胞培养器材中并用扩增培养液培养，过夜；S4.当步骤S3培养过夜后的T细胞的CD56表达在50
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70％范围内时，用激活培养液进行诱导培养；S5.将步骤S4诱导培养后的T细胞进行杀伤试验，收集杀伤率合格的T细胞进行细胞制备及质控，得到嵌合抗原受体T细胞。2.根据权利要求1所述的一种特异性T细胞的培养方法，其特征在于：所述细胞培养器材包括6孔板、12孔板、T25、T75中的一种或几种组合。3.根据权利要求2所述的一种特异性T细胞的培养方法，其特征在于：所述包被液包括PBS缓冲液、浓度在10
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20μg/mL范围内的芦荟大黄素、浓度在5
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20ng/mL范围内的细胞因子、浓度在2
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5μg/mL范围内的多聚赖氨酸、浓度在2
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5μg/mL范围内的纤维黏连蛋白、0.2
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0.4％的明胶、浓度在20
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50μg/mL范围内的重组人纤维连接蛋白、浓度在20
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70μg/mL范围内的CD3单克隆抗体，重组人纤维连接蛋白和CD3单克隆抗体...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙涛，余莹莹，
申请(专利权)人：杭州艾沐蒽生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：