一种Rg1联合hAD-MSCs治疗POI的实验方法技术

本发明专利技术涉及一种Rg1联合hAD

【技术实现步骤摘要】
一种Rg1联合hAD
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MSCs治疗POI的实验方法


[0001]本专利技术涉及一种Rg1联合hAD
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MSCs治疗POI的实验方法。

技术介绍

[0002]卵巢早衰(premature ovarian failure，POF)是指青春期之后40岁以前出现非生理性、至少4个月以上闭经，并有两次或两次以上血清促卵泡激素(follicle
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stimulating hormone，FSH)＞40μ/L(两次检查时间间隔1个月以上)，血清雌二醇(estradiol，E2)＜73.2pmol/L
[1]，临床主要表现为(1)原发或继发不孕、(2)低雌激素症状：如潮热，多汗，注意力下降，性欲减退，性交痛，阴道干涩，并有不同程度的生殖器官及乳房萎缩等、(3)远期并发症：骨质疏松，心血管疾病，老年性痴呆等。POF的发病机制尚不明确，多数学者认为其发病机制与生殖细胞的迁移、卵原细胞的有丝分裂和减数分裂的发动并形成原始卵泡有关。这个复杂过程的任一环节一旦被扰乱就可引起原始卵泡池减少而导致POF。目前研本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种Rg1联合hAD
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MSCs治疗POI的实验方法，其特征在于，具体包括以下步骤：1)人羊膜间充质干细胞hAD
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MSCs的培养：hAD
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MSCs细胞培养于含10％胎牛血清FBS的RPMI 1640培养液中，并添加1％的青霉素
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链霉素，在充入5％CO2的湿润的37℃恒温细胞培养箱中培养，将细胞连续传代在第3代的细胞用于后续实验；2)流式细胞术对hAD
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MSCs的鉴定：对培养第3代的hAD
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MSCs细胞的表面标志物进行流式细胞术分析，以确定其干细胞特性，收获细胞并以250
×
g于室温离心5min，然后将细胞沉淀重悬于PBS中制备单细胞悬液，并使细胞浓度为1
×
105/ml，细胞分别与抗人CD
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133、抗人CD
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45、抗人CD
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73、抗人CD
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105和抗人CD
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90单抗于室温避光孵育20min，然后用PBS清洗细胞2次去除一抗，细胞随后与偶联有FITC或PE的山羊抗鼠IgG二抗于4℃避光孵育30min，最后，用1％多聚甲醛溶液固定细胞，上机流式细胞仪，使用Kaluza软件进行分析，表面标志物CD11b
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/CD19
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/CD34
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/CD45
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/HLA
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DP/DQ/DR
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/CD44+/CD73+...

【专利技术属性】
技术研发人员：何连利，刘晓云，谢红梅，牟大英，莫晓莉，张青云，祝叶，路祥会，
申请(专利权)人：何连利，
类型：发明
国别省市：