一种FARS2基因敲除或敲低的非人动物模型及其构建方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种FARS2基因敲除或敲低的非人动物及非人动物模型、一种FARS2相关疾病治疗药物筛选模型及其构建方法和在生物医药领域的应用。本发明专利技术构建的FARS2基因敲除或敲低非人动物或FARS2相关疾病非人动物模型可以应用于识别FARS2疾病的潜在病理机制，进而在筛选、验证、评价或制备FARS2突变抑制剂以及FARS2相关疾病的药物筛选与制备方面发挥重要作用。作用。

【技术实现步骤摘要】
一种FARS2基因敲除或敲低的非人动物模型及其构建方法和应用


[0001]本专利技术属于生物模型
，具体地说，涉及一种FARS2基因敲除或敲低的非人动物模型及其构建方法和应用。

技术介绍

[0002]氨酰tRNA合成酶(ARSs)是一个酶家族，催化氨基酸与其同源的tRNA连接以保持翻译保真度。人类基因组编码的ARS基因有37个，其中17个位于细胞质，17个作用于线粒体，3个同时存在于细胞质和线粒体。除了它们在tRNA充电中的典型作用外，这些酶在细胞内也具有非常规功能，如转录和翻译调节、信号转导、炎症、血管生成和肿瘤发生。自从在Charcot
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Marie
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Tooth(CMT)病患者中首次发现glycyl
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tRNA合成酶(GARS) 变异以来，许多ARS基因座的致病性变体已经被报道。在这些变异中，线粒体ARS编码基因(ARS2)的突变与多种线粒体疾病有关，并导致具有高代谢需求的组织的表型，包括中枢神经系统。尽管这些ARS2基因普遍表达，但某些ARS2突变导致组织特异性表型。这些与各种本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种FARS2基因敲除非人动物的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括敲除FARS2基因的1号外显子；优选的，所述的非人动物为昆虫；进一步优选的，所述的昆虫为双翅目昆虫；更优选的，所述的双翅目昆虫为果蝇；优选的，所述构建方法包括删除FARS2基因1号外显子上的第264位核苷酸，并在删除位置引入随机插入片段；优选的，所述随机插入片段为GGGGCAAGGGG。2.根据权利要求1所述构建方法，其特征在于，所述构建方法利用基因编辑技术进行非人动物的构建；优选的，所述的基因编辑技术选自胚胎干细胞的基因打靶技术、CRISPR/Cas9技术、锌指核酸酶技术、转录激活子样效应因子核酸酶技术、归巢核酸内切酶或其他基因编辑技术的至少一种；优选的，所述构建方法利用sgRNA进行FARS2基因敲除非人动物的构建；优选的，所述sgRNA的浓度为20ng/μL
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60ng/μL；优选的，所述sgRNA的序列如SEQ ID NO：1所示。3.根据权利要求1
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2任一项所述构建方法，其特征在于，所述非人动物的苯丙氨酰
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tRNA合成酶表达降低或缺失。4.一种sgRNA，其特征在于，所述sgRNA的靶位点位于FARS2基因的1号外显子上；优选的，所述sgRNA序列如SEQ ID NO：1所示。优选的，所述sgRNA通过DNA模板体外转录得到；优选的，所述的合成DNA模板核苷酸序列如SEQ ID NO：2和3所示。5.一种非人动物模型构建方法，其特征在于，所述的构建方法包含权利要求1
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3任一项所述FARS2基因敲除非人动物的构建方法或RNAi介导中的至少一种；优选的，所述的非人动物选自线虫、酿酒酵母、果蝇、蟾蜍、斑马鱼、小鼠、大鼠、豚鼠、兔、犬、猪、猴等任何可以进行基因...

【专利技术属性】
技术研发人员：戈万忠，管敏鑫，杨小杭，范文露，金晓晔，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：