一种鸭ACE2基因真核表达质粒的构建方法以及在CHO稳定细胞系构建中的应用技术

本发明专利技术涉及可以表达外源鸭ACE2的重组质粒pcDNA3.1

【技术实现步骤摘要】
一种鸭ACE2基因真核表达质粒的构建方法以及在CHO稳定细胞系构建中的应用


[0001]本专利技术属于基因工程和细胞工程领域，涉及一种质粒型重组过表达载体pcDNA3.1-ACE2 的构建方法，以及通过压力筛选获得稳定过表达ACE2基因的细胞株。

技术介绍

[0002]血管紧张素转化酶2(Angiotensin-converting enzyme 2，ACE2)是一种附着在肺，动脉， 心脏，肾脏和肠道中细胞表面(细胞膜)上的酶。是一种能催化血管紧张素II转化为血管紧 张素-(1-7)的外肽酶。此外，ACE2还是SARS冠状病毒(SARS-CoV)、严重急性呼吸道综合 征冠状病毒2型(SARS-CoV-2)和人类冠状病毒NL63的受体。ACE2在动物界广泛存在，从 鱼类，两栖动物，爬行动物，鸟类到哺乳动物。从2000年至今，ACE2的研究主要集中在人、 小鼠、大鼠，近几年在绵羊、猪以及牛等农场动物上也有研究。但是ACE2在禽类方面的研究 尚没有相关文献，缺乏基本的信息资料。ACE2是一种糖蛋白，对其功能的研究首先要获得其 真核表达产物。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.重组质粒pcDNA3.1-ACE2质粒的构建，在细胞内可以稳定的表达外源ACE2重组蛋白。2.G418压力筛选浓度的确定为800μg/mL，其特征在于，在无重组质粒转染进CHO细胞时，14d时杀死培养细胞的最低浓度。在转染重组质粒后，既可以杀死没有转染进质粒的CHO细胞，又可以将伤害降到最低。3.通过免疫荧光和Western ...

【专利技术属性】
技术研发人员：张源淑，李帅，王换换，叶平生，付亚丽，谢娜娜，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：