一种RT-PCR反应体系、RT-PCR方法及应用技术

本发明专利技术提供了一种RT

【技术实现步骤摘要】
一种RT
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PCR反应体系、RT
‑
PCR方法及应用


[0001]本专利技术涉及核酸扩增与检测
，尤其是涉及一种RT
‑
PCR反应体系、RT
‑
PCR方法及应用。

技术介绍

[0002]聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction，PCR)是美国Mullis博士在1985年专利技术的核酸扩增技术，可以在体外短时间内扩增待测DNA片段，在医学检验、分子生物学基础研究、考古学研究、农业研究等领域有广泛的应用。
[0003]常规PCR反应体系包括Tris缓冲液、氯化钾、氯化镁、dNTP、添加剂、稳定剂等。随着PCR技术的推广，原来实验室手工操作已经不适合医学检验化验室的需求，自动化批量检测已经成为核酸检测的标准流程，大幅度提高了检测效率。
[0004]在采用自动化设备批量检测核酸样本时，样品按照进样顺序配制反应体系后进行PCR扩增、检测。样本检测的速度与自动化设备的加样器数量有关，目前市售自动化核酸检测设备一般配制2针、4针、8针、16本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种RT
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PCR反应体系，其特征在于，所述反应体系包含RNA模板、探针、上下游引物、DNA聚合酶、缓冲液、无机盐、dNTP、反转录酶和Carrier RNA，其中，所述反转录酶为MMLV反转录酶；所述Carrier RNA在所述反应体系中的终浓度为0.1~0.3 μg/μL。2.根据权利要求1所述的RT
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PCR反应体系，其特征在于，所述Carrier RNA在所述反应体系中的终浓度为0.2 μg/μL。3.根据权利要求1所述的RT
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PCR反应体系，其特征在于，所述Carrier RNA为多聚腺苷酸RNA或含有3
’
端多聚腺苷酸尾的carrier RNA。4.根据权利要求1所述的RT
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PCR反应体系，其特征在于，所述DNA聚合酶为耐热DNA聚合酶。5.根据权利要求1所述的RT
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PCR反应体系，其特征在于，所述缓冲液包括Tris
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HCl缓冲液；所述缓冲液的pH值为6.5~8.5。6.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈启跃，邓京，
申请(专利权)人：北京金诺美生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：