具有增强的T细胞介导的对肿瘤细胞的细胞毒性作用的针对CHI3L1和PD1的双特异性抗体制造技术

本文所述的是同时靶向CHI3L1和免疫检查点分子PD

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】具有增强的T细胞介导的对肿瘤细胞的细胞毒性作用的针对CHI3L1和PD1的双特异性抗体
专利

[0001]本专利技术的实施方式涉及同时靶向CHI3L1和免疫检查点分子PD
‑
1的双特异性抗体。这些双特异性抗体表现出增强的协同细胞毒性效果，强于单独的CHI3L1和PD
‑
1抗体(单独或组合)的效果。
[0002]关于联邦资助研究或开发的声明
[0003]本专利技术是在以下资助下开发的：国家卫生研究院(National Institutes of Health)授予的NIH CADET资助UH2 HL123876。政府对本专利技术享有某些权利。
[0004]专利技术背景
[0005]目前，针对单个免疫检查点抑制剂(ICPI)分子的免疫疗法正被有效地应用于多种恶性肿瘤患者，包括肺癌和成胶质细胞瘤。实例包括针对程序性死亡受体1(PD
‑
1)等部分的抗体。然而，只有部分患者对这些治疗有反应。此外，观察到的缓解通常不持久。因此，世界范围内正在加紧努力，开发使用针对包括PD
‑
1在内的免疫检查点分子的抗体来增强ICPI免疫疗法的有效性。
[0006]因此，需要针对单个免疫检查点抑制剂分子(如PD
‑
1)的更有效免疫治疗。
[0007]专利技术概述
[0008]先前的研究证明，几丁质酶3样蛋白1(CHI3L1)在各种癌症的发病机制中起着关键作用。此外，我们之前已经证明，抗CHI3L1抗体与抗PD
‑
1抗体的组合在癌症治疗中提供协同效应。基于这些发现，我们假设同时靶向CHI3L1和PD
‑
1可能具有额外的协同和/或相加的抗肿瘤作用。为了解决这些可能性，开发了同时与CHI3L1和PD
‑
1反应的双特异性抗体。
[0009]本专利技术的实施方式提供了同时识别并中和CHI3L1和免疫检查点抑制剂PD
‑
1的人源化双特异性抗体。双特异性抗体包含抗
‑
人PD
‑
1抗体的抗原结合部分和抗人CHI3L1抗体的抗原结合部分。
[0010]在一些实施方式中，双特异性抗体包含附接至抗
‑
人CHI3L1抗体骨架的抗
‑
人PD
‑
1单链可变片段(ScFv
‑
PD1)。ScFv
‑
PD1可以被附接至CHI3L1抗体重链(CHI3L1
‑
HC
‑
PD1)或CHI3L1抗体轻链(CHI3L1
‑
LC
‑
PD1)。
[0011]在替代性实施方式中，双特异性抗体包含附接至抗
‑
人PD
‑
1抗体骨架的抗
‑
人CHI3L1单链可变片段(ScFv
‑
CHI3L1)。ScFv
‑
CHI3L1可以被附接至PD
‑
1抗体重链(PD
‑1‑
HC
‑
CHI3L1)或PD
‑
1抗体轻链(PD
‑1‑
LC
‑
CHI3L1)。
[0012]在一个实施方式中，抗
‑
人CHI3L1抗体的抗原结合部分包含以下的互补决定区(CDR)：(a)具有SEQ ID NO：4的氨基酸序列的轻链CDR1；(b)具有SEQ ID NO：5的氨基酸序列的轻链CDR2；(c)具有SEQ ID NO：6的氨基酸序列的轻链CDR3；(d)具有SEQ ID NO：1的氨基酸序列的重链CDR1；(e)具有SEQ ID NO：2的氨基酸序列的重链CDR2；和(f)具有SEQ ID NO：3的氨基酸序列的重链CDR3。在一个实施方式中，抗
‑
人CHI3L1抗体的抗原结合部分包含具有SEQ ID NO：13的氨基酸序列的重链序列。在一个实施方式中，抗
‑
人CHI3L1抗体的抗原结合部分包含具有SEQ ID NO：14的氨基酸序列的轻链序列。
[0013]在一个实施方式中，抗
‑
人PD
‑
1抗体的抗原结合部分包含SEQ ID NO：35的氨基酸序列。
[0014]如本文所述，本专利技术的双特异性抗体具有显著的抗肿瘤作用。与单独的CHI3L1和PD
‑
1抗体(单独或组合)的效果相比，这些双特异性抗体表现出增强的协同细胞毒性效果。本专利技术的双特异性抗体(i)增强Jurkat T细胞对U87细胞的附着；(ii)增强Jurkat T细胞在U87细胞中诱导细胞毒性/凋亡反应的能力；(iii)增强与U87细胞共培养的Jurkat T细胞中颗粒酶和穿孔素的积累；和/或(iv)增强Jurkat T细胞在U87细胞中诱导细胞细胞毒性反应和乳酸脱氢酶(LDH)释放的能力。
[0015]本专利技术的实施方式还提供了包含本专利技术的双特异性抗体和药学上可接受的运载体的药物组合物。在一个实施方式中，药物组合物进一步包含化疗剂。
[0016]本专利技术的实施方式还提供了通过给予治疗有效量的本专利技术的双特异性抗体或药物组合物来治疗对象的癌症的方法。在一个实施方式中，癌症是恶性癌症。在一个实施方式中，癌症是原发癌或转移性癌。在一个实施方式中，癌症是以下其中之一：前列腺癌、结肠癌、直肠癌、卵巢癌、肾癌、乳腺癌、成胶质细胞瘤、黑色素瘤、恶性黑色素瘤或肺癌。在一个实施方式中，对象是被确定具有升高的CHI3L1水平的对象。在一个实施方式中，升高的CHI3L1水平是循环CHI3L1。在一个实施方式中，癌症表达PD
‑
L1。
[0017]本专利技术的双特异性抗体靶向CHI3L1和PD
‑
1，并且具有超过单独或组合的抗
‑
CHI3L1和抗
‑
PD
‑
1抗体的作用的抗肿瘤细胞毒性作用。
[0018]本文还描述和叙述了其他实施方式。
[0019]附图简要说明
[0020]出于说明的目的，本专利技术的某些实施方式在下面描述的附图中示出。附图中相同的数字始终表示相同的元件。然而，应理解，本专利技术不局限于所示的精确设置、尺寸和仪器。图中：
[0021]图1提供了CHI3L1xPD1双特异性抗体结构的示意图。用于产生双特异性抗体的平台示于图1A：CHI3L1
‑
LCxScFv
‑
HC
‑
PD1
‑
ScFv
‑
LC
‑
PD1(CHI3L1
‑
LC
‑
PD1)和图1B：CHI3L1
‑
HCxScFv
‑
HC
‑
PD1
‑
ScFv
‑
LC
‑
PD1(本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种检测并中和几丁质酶3样蛋白1(CHI3L1)和程序性死亡受体1(PD
‑
1)的双特异性抗体，其包含抗
‑
人PD
‑
1抗体的抗原结合部分和抗
‑
人CHI3L1抗体的抗原结合部分。2.如权利要求1所述的双特异性抗体，其包含附接至抗
‑
人CHI3L1抗体骨架的抗
‑
人PD
‑
1单链可变片段(ScFv
‑
PD1)。3.如权利要求1所述的双特异性抗体，其包含附接至抗
‑
人PD
‑
1抗体骨架的抗
‑
人CHI3L1单链可变片段(ScFv
‑
CHI3L1)。4.如权利要求2所述的双特异性抗体，其中所述ScFv
‑
PD1附接至所述CHI3L1抗体重链(CHI3L1
‑
HC
‑
PD1)。5.如权利要求2所述的双特异性抗体，其中所述ScFv
‑
PD1附接至所述CHI3L1抗体轻链(CHI3L1
‑
LC
‑
PD1)。6.如权利要求1
‑
5中任一项所述的双特异性抗体，其中所述抗
‑
人CHI3L1抗体的抗原结合部分包含以下的互补决定区(CDR)：(a)具有SEQ ID NO：4的氨基酸序列的轻链CDR1；(b)具有SEQ ID NO：5的氨基酸序列的轻链CDR2；(c)具有SEQ ID NO：6的氨基酸序列的轻链CDR3；(d)具有SEQ ID NO：1的氨基酸序列的重链CDR1；(e)具有SEQ ID NO：2的氨基酸序列的重链CDR2；和(f)具有SEQ ID NO：3的氨基酸序列的重链CDR3。7.如权利要求4所述的双特异性抗体，其中所述CHI3L1抗体重链具有SEQ ID NO：13的氨基酸序列。8.如权利要求5所述的双特异性抗体，...

【专利技术属性】
技术研发人员：J，
申请(专利权)人：布朗大学，
类型：发明
国别省市：