一种分枝横梗霉及其用途制造技术

本发明专利技术提供的一种分枝横梗霉(Lichtheimia ramosa)，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No.22463，所述分枝横梗霉具有较高的酸性蛋白酶、纤维素酶、β

【技术实现步骤摘要】
一种分枝横梗霉及其用途


[0001]本专利技术涉及微生物领域，具体涉及一种分枝横梗霉(Lichtheimiaramosa)及包含其的复合微生物菌剂、制备方法、用途。

技术介绍

[0002]近年来，随着抗生素全面禁止在饲料中的应用及饲料原料短缺和价格暴涨，使得饲料行业发展面临着一系列的挑战。棕榈粕作为棕榈油工业的副产品，含有13％－20％的纤维，其中58
‑
78％的纤维是不溶性甘露聚糖，适口性差，难以消化。此外，棕榈粕原料容易受霉菌毒素污染，目前主要防治方法为化学防治和生物防治，其中化学防治最直接有效，但长期的应用易引起药害和病原菌的抗药性，甚至污染环境，微生物源生物制剂作为新型无危害的防治策略，被逐渐开发和应用。同时微生物的发酵能够让棕榈粕的理化性质发生变化，提高其营养价值，如抗营养成分(如植酸盐)少、增加适口性，能够提高动物的消化率(低粗纤维和/或多糖含量)和抑制病原体、霉菌等。因此，发酵棕榈粕越来越多地被饲料行业和畜禽养殖企业所关注，实现这一过程很大程度上取决于所使用的发酵菌种和酶制剂的选择和配伍，以及生产工艺。
[0003]如中国专利申请号为202011292693.8的专利公开了一种利用酶和微生物制剂厌氧发酵棕榈粕的方法，固态发酵能够为有机废弃物增值，但是该专利文献中使用的酶制剂包括甘露聚糖酶、蛋白酶、纤维素酶及木聚糖酶，为养殖户增加了额外的使用成本。
[0004]中国专利申请号为20190509110.3的专利公开了一种利用酶解方式将棕榈粕中的甘露聚糖酶解提取分离制备甘露寡糖、再进一步酶解制备饲用多肽，最后将残留的纤维类固形物通过进一步发酵制备成饲用膳食纤维，提升了棕榈粕的营养价值。但是该专利在进行酶解的过程中需要控温 50
‑
60℃℃，调整pH4
‑
5，酶解反应12
‑
24h，离心，且没有表明3种配比的复合酶在酶解反应中具体与棕榈粕的使用比例。
[0005]中国专利申请号为201911408582.6的专利公开了一种营养发酵棕榈粕及其制备方法，该专利通过165℃高温处理10min后，通过接菌，在30
‑
45℃下发酵。该专利文献中棕榈粕经过发酵后中性洗涤纤维降解率仅≥20％。

技术实现思路

[0006]因此，本专利技术要解决的技术问题在于一种分枝横梗霉(Lichtheimiaramosa)及包含其的复合微生物菌剂、制备方法、用途，所述分枝横梗霉 (Lichtheimia ramosa)能够高产复合酶，降解棕榈粕中的甘露聚糖，改变棕榈粕的粗蛋白、粗脂肪和粗纤维的含量，对棕榈粕的品质改良具有优良的利用价值。
[0007]为此，本专利技术提供了如下的技术方案：
[0008]一种分枝横梗霉(Lichtheimia ramosa)，该菌株从粉碎树枝污泥堆肥样品中筛选得到，经18S rDNA/ITS分析鉴定为分枝横梗霉(Lichtheimiaramosa)，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCCNo.22463。所述的分枝横梗霉的生理生化特征
为：马铃薯葡萄糖培养基 (PDA)培养基上菌落生长初期为白色，后期浅黄色，菌落质地絮状。在 pH3.0
‑
12.0均能生长，最适pH4.5，在10
‑
37℃条件下均能较好生长，最适合生长温度25
‑
30℃，繁殖速度快。
[0009]一种复合微生物菌剂，包括所述的分枝横梗霉(Lichtheimia ramosa)。
[0010]可选的，还包括葡萄牙棒孢酵母(Clavispora lusitaniae)和/或植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。
[0011]可选的，所述葡萄牙棒孢酵母(Clavispora lusitaniae)，从利用粉碎树枝污泥堆肥的样品中分离，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No.22799；所述的葡萄牙棒孢酵母生理生化特征为：马铃薯葡萄糖培养基(PDA)培养基上生长良好，在10
‑
38℃条件下均能较好生长，最适合温度25
‑
30℃，在pH3.5
‑
9.0均能生长，最适pH4.5。
[0012]所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)，从利用粉碎树枝污泥堆肥的样品中分离，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No.15024。所述的植物乳杆菌生理生化特征为：MRS培养基上生长良好，生长温度10
‑
55℃，pH3.0
‑
7.0均能生长，最适生长温度30
‑
35℃。
[0013]可选的，所述复合微生物菌剂为液态时，所述分枝横梗霉的液态培养物、葡萄牙棒孢酵母的液态培养物和植物乳杆菌的液态培养物的体积比为 (30
‑
50)：(10
‑
30)：(0
‑
50)；
[0014]分枝横梗霉的液态培养物中分枝横梗霉总活菌数为1
×
106孢子/毫升
ꢀ‑9×
106孢子/毫升，优选的为2
×
106孢子/毫升；
[0015]葡萄牙棒孢酵母的液态培养物中葡萄牙棒酵母的总活菌数为 4
×
109‑2×
10
10
个/毫升；
[0016]植物乳杆菌的液态培养物中植物乳杆菌的总活菌数为6
×
109‑4×
10
10
个/毫升。
[0017]可选的，所述复合微生物菌剂中的菌落总数为≥109CFU/mL。
[0018]可选的，所述复合微生物菌剂为固态时，为液态的复合微生物菌剂经发酵制备得到。
[0019]可选的，固态复合微生物菌剂的制备方法，包括如下步骤：
[0020]1)固态发酵培养基配制：按木薯渣40
‑
50重量份，棕榈粕140
‑
150重量份，豆粕20
‑
30重量份，麸皮100
‑
120重量份，糖蜜5
‑
10重量份，水100
‑
120 重量份，混匀，121℃灭菌20
‑
30min，冷却备用；可选的，按木薯渣40重量份，棕榈粕140重量份，豆粕20重量份，麸皮100重量份，糖蜜4重量份，水100重量份，混匀，121℃灭菌20min，冷却备用；
[0021]2)固态培养：按10
‑
20wt％(可选的为10wt％)接种量接入液态的复合微生物菌剂至上述灭菌的固态发酵培养基中，混匀后移至带有透气阀的袋子中放入30
‑
35℃(可选的30℃)恒温箱中培养35
‑
72h，每12
‑
15h(可选的 12h)将袋子整理一次，将发酵产生的气体轻本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种分枝横梗霉(Lichtheimia ramosa)，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No.22463。2.一种复合微生物菌剂，其特征在于，包括权利要求1所述的分枝横梗霉(Lichtheimia ramosa)。3.根据权利要求2所述的复合微生物菌剂，其特征在于，还包括葡萄牙棒孢酵母(Clavispora lusitaniae)和/或植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。4.根据权利要求3所述的复合微生物菌剂，其特征在于，所述葡萄牙棒孢酵母(Clavispora lusitaniae)保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No.22799；所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No.15024。5.根据权利要求3或4所述的复合微生物菌剂，其特征在于，所述复合微生物菌剂为液态时，所述分枝横梗霉的液态培养物、葡萄牙棒孢酵母的液态培养物和植物乳杆菌的液态培养物的体积比为(30
‑
50)∶(10
‑
30)∶(0
‑
50)；分枝横梗霉的液态培养物中分枝横梗霉总活菌数为(1
‑
9)
×
106孢子/毫升；葡萄牙棒孢酵母的液态培养物中葡萄牙棒酵母的总活菌数为4
×
109‑2×
10
10
个/毫升；植物乳杆菌的液态培养物中植物乳杆菌的总活菌数为6
×
109‑4×
10
10
个/毫升。6.根据权利要求3或4或5所述的复合微生物菌剂，其特征在于，所述复合微生物菌剂为固态时，为液态的复合微生物菌剂经发酵制备得到。7.一种如权利要求2
‑
6任一项所述的复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，按照配方选取相应的菌株进行发酵。8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，包括：分枝横梗霉的液态培养物的制备方法：将分枝横梗霉菌种接种于PDA培养基，在温度25
‑
30℃，pH4.5
‑
7，转速150
‑
180rpm条件下培养48
‑
72小时，制备而成；或葡萄牙棒孢酵母的液态培养物的制备方法：将葡萄牙棒孢酵母菌种接种于PDA培养基，在温度25
...

【专利技术属性】
技术研发人员：金京华，王兴，杨艳，沈丹丹，程雅楠，
申请(专利权)人：轻工业环境保护研究所，
类型：发明
国别省市：