产二氢尼洛替星的重组酿酒酵母及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种重组酿酒酵母及其制备方法与应用。本发明专利技术提供的重组酿酒酵母，其保藏编号为CGMCC No.23630。与传统技术相比，本发明专利技术具备如下有益效果：本发明专利技术提供的重组酿酒酵母能产二氢尼洛替星，为实现二氢尼洛替星的生物合成提供了工程菌，为酿酒酵母工业化生产二氢尼洛替星化合物提供新的途径，还可以将其作为底盘菌株在胞内鉴定印楝生物下游合成途径中的功能基因。中的功能基因。中的功能基因。

【技术实现步骤摘要】
产二氢尼洛替星的重组酿酒酵母及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于生物
，涉及利用合成生物学生产三萜化合物等
，具体地，本专利技术涉及产二氢尼洛替星的重组酿酒酵母的制备方法及其应用。

技术介绍

[0002]印楝素是一种公认无害的植物源杀虫剂，是从楝属植物印楝种子中提取的一种高度氧化的柠檬苦素类三萜化合物，有10多种类似物，但大家通常所说的印楝素指的是印楝素A，相对分子质量为720.71。印楝素纯品为白色非结晶物质，易溶于甲醇、丙酮和二甲亚砜等极性有机溶剂，对光、热都不稳定。印楝素对200多种害虫有明显的驱避效果，使用更加安全、对环境的压力小，是目前全球公认的最优秀的生物农药。
[0003]印楝素及其前体物质二氢尼洛替星均具有杀虫功效，但是两者在植物中的含量很低，仅存在于印楝树的树叶树皮及种子中，其中种仁中印楝素的含量最高，但也仅有0.02%。印楝素的含量还取决于印楝的品种以及种子的收获时间，随着种子的成熟，印楝素的含量会呈现先增加再下降的趋势。另外，印楝素的含量与种植的气候条件有关，雨水温度湿度均会影响印楝素的含量，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株重组酿酒酵母，其特征在于，其保藏编号为CGMCC No. 23630。2.一种重组酿酒酵母的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：敲除酿酒酵母中的BTS1基因和ERG27基因，过表达所述酿酒酵母的ERG19基因、ERG10基因、ERG12基因和IDI1基因，并在所述酵母菌中外源表达AtCPR基因、AiOSC1基因、tHMGR基因、AtSQE2基因和AiCYP71CD2基因。3.根据权利要求2所述的重组酿酒酵母的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：敲除酿酒酵母中的BTS1基因和ERG27基因，制备酿酒酵母C
‑
E
‑
B；在所述酿酒酵母C
‑
E
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B的染色体rDNA位点整合ERG19基因、ERG10基因、ERG12基因、IDI1基因和AtCPR基因，制备酿酒酵母CB
‑
9；在所述酿酒酵母CB
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9的染色体Delta位点上整合AiCYP71CD2基因、AiOSC1基因、tHMGR基因和AtSQE2基因，制备酿酒酵母DI
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3，获得重组酿酒酵母；所述AiCYP71CD2基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。4.根据权利要求3所述的重组酿酒酵母的制备方法，其特征在于，获取所述AiCYP71CD2基因的步骤包括：以印楝...

【专利技术属性】
技术研发人员：薛强，王彩霞，侯康鑫，苏新尭，刘佳，于宛彤，
申请(专利权)人：中国中医科学院中药研究所，
类型：发明
国别省市：