一种对新冠变异株广谱中和保护的免疫原及其制备方法和应用技术

本申请涉及一种对新冠变异株更广谱中和保护的免疫原及其制备方法和应用，具体涉及新型冠状病毒Spike蛋白的突变体，包含编码所述Spike蛋白的突变体的核苷酸序列的核酸分子，以及包含所述核酸分子的载体和假性化病毒样颗粒。此外，本申请还涉及包含所述Spike蛋白的突变体、核酸分子、载体或假性化病毒样颗粒的疫苗组合物。本申请制备的疫苗以及方法，对于新冠病毒及其突变株具有非常广谱的中和活性。新冠病毒及其突变株具有非常广谱的中和活性。新冠病毒及其突变株具有非常广谱的中和活性。

【技术实现步骤摘要】
一种对新冠变异株广谱中和保护的免疫原及其制备方法和应用


[0001]本申请涉及基因工程和分子生物学领域，具体涉及新型冠状病毒Spike蛋白的突变体，包含编码所述Spike蛋白的突变体的核苷酸序列的核酸分子，以及包含所述核酸分子的载体和假性化病毒样颗粒。此外，本申请还涉及包含所述Spike蛋白的突变体、核酸分子、载体或假性化病毒样颗粒的疫苗组合物。

技术介绍

[0002]假病毒(Pseudovirus)是一种嵌合病毒，脂质包膜包裹着一种病毒的核酸，包膜上有另一种病毒的表面蛋白。假病毒内部基因通常经过改造或修饰，不能表达自身的表面蛋白。因此，需要另一个表达目标病毒表面蛋白的质粒或稳定的细胞系来制造假病毒。假病毒可以感染易感细胞或动物，与活病毒相比，假病毒可以在生物安全2级实验室中进行操作。并且假病毒通常携带报告基因，感染细胞数量与报告基因表达量成正比，因此对假病毒感染和中和实验的定量分析比活病毒更加容易。假病毒携带的表面蛋白的天然构象与天然病毒蛋白高度相似，这些表面蛋白能够有效介导病毒进入宿主细胞。采用水泡性口炎病毒(Vesicular Stoma本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种载体，其包含编码Spike蛋白的突变体的核苷酸序列；所述Spike蛋白的突变体，其在对应于野生的新型冠状病毒的Spike蛋白的第614位、第484位和第501位的位点上包含突变；优选地，所述野生的新型冠状病毒的Spike蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；优选地，所述Spike蛋白的突变体包含下述突变：在对应于SEQ ID NO：1的第614位的位置上的氨基酸被突变为甘氨酸；在对应于SEQ ID NO：1的第484位的位置上的氨基酸被突变为赖氨酸；以及，在对应于SEQ ID NO：1的第501位的位置上的氨基酸被突变为酪氨酸；优选地，所述Spike蛋白的突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示；优选地，所述载体选自质粒(例如，PCDNA3.1)，噬菌粒，柯斯质粒，人工染色体，噬菌体或病毒载体；优选地，所述载体用于表达(例如在受试者(例如哺乳动物，例如人)体内表达)所述Spike蛋白的突变体；优选地，所述载体是用于基因治疗的载体，例如质粒，腺病毒载体，腺相关病毒载体，和慢病毒载体。2.一种核酸分子，其具有权利要求1的载体所包含的编码Spike蛋白的突变体的核苷酸序列。3.一种Spike蛋白的突变体，其如权1中所述，所述Spike蛋白的突变体，其在对应于野生的新型冠状病毒的Spike蛋白的第614位、第484位和第501位的位点上包含突变；优选地，所述野生的新型冠状病毒的Spike蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；优选地，所述Spike蛋白的突变体包含下述突变：在对应于SEQ ID NO：1的第614位的位置上的氨基酸被突变为甘氨酸；在对应于SEQ ID NO：1的第484位的位置上的氨基酸被突变为赖氨酸；以及，在对应于SEQ ID NO：1的第501位的位置上的氨基酸被突变为酪氨酸；优选地，所述Spike蛋白的突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。4.一种宿主细胞，其包含权利要求2所述的核酸分子或权利要求1所述的载体；优选地，所述宿主细胞选自原核细胞(例如，大肠杆菌细胞)，以及真核细胞(例如，酵母细胞)，昆虫细胞，植物细胞和动物细胞(例如，哺乳动物细胞，例如，小鼠细胞、人细胞等)；优选地，所述宿主细胞是大肠杆菌细胞，例如大肠杆菌DH5α细胞；或者所述宿主细胞是人细胞(例如，293T细胞)。5.一种假性化病毒样颗粒，其包含Spike蛋白的突变体；所述Spike蛋白的突变体，其在对应于野生的新型冠状病毒的Spike蛋白的第614位、第484位和第501位的位点上包含突变；优选地，所述野生的新型冠状病毒的Spike蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；优选地，所述Spike蛋白的突变体包含下述突变：在对应于SEQ ID NO：1的第614位的位置上的氨基酸被突变为甘氨酸；在对应于SEQ ID NO：1的第484位的位置上的氨基酸被突变为赖氨酸；以及，在对应于SEQ ID NO：1的第501位的位置上的氨基酸被突变为酪氨酸；优选地，所述Spike蛋白的突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示；优选地，所述假性化病毒样颗粒具有包含所述S蛋白的突变体的包膜蛋白；优选地，所述类病毒颗粒还包含VSV病毒或HIV病毒的核酸(例如，基因组)。6.一种药物组合物，其包含药学上可接受的载体、稀释剂、或赋形剂，以及选自下述中
的一项或多项：(1)权利要求3的Spike蛋白的突变体；(2)权利要求2的核酸分子；(3)权利要求1的载体；(4)权利要求4的宿主细胞；和，(5)权利要求5的假型化病毒样颗粒；优选地，所述药物组合物通过注射进行施用；优选地，所述药物组合物的形式为...

【专利技术属性】
技术研发人员：王佑春，黄维金，聂剑辉，李涛，崔智敏，张黎，赵晨燕，
申请(专利权)人：中国食品药品检定研究院，
类型：发明
国别省市：