一种具有抗氧化活性的多棘海盘车皂苷制备工艺制造技术

本发明专利技术公开了一种具有抗氧化活性的多棘海盘车皂苷制备工艺，包括以下步骤：步骤一：对多棘海盘车样品进行预处理；步骤二：对样品粉末采用索氏提取法回流提取海星皂苷；步骤三：对提取液进行浓缩；步骤四：对多棘海盘车皂苷进行分离萃取；步骤五：对样本进行硅胶柱层析；步骤六：对各部洗脱液进行分别收集并进行浓缩、干燥；步骤七：对多棘海盘车皂苷样品进行活性测定实验；步骤八：对皂苷样品的抗氧化活性筛选实验结果。本发明专利技术属于提取技术领域，具体一种具有抗氧化活性的多棘海盘车皂苷制备工艺，是一种可以废物利用的方法，抗氧化活性高，通过此研究可以变废为宝。通过此研究可以变废为宝。通过此研究可以变废为宝。

【技术实现步骤摘要】
一种具有抗氧化活性的多棘海盘车皂苷制备工艺


[0001]本专利技术属于提取
，具体是指一种具有抗氧化活性的多棘海盘车皂苷制备工艺。

技术介绍

[0002]各项研究表明在动物界中，只有海洋的棘皮动物门中存在皂苷，其中报道较多的是海参和海星。皂苷有着很好的生物活性，包括抗氧化活性、抑菌活性和抗肿瘤活性等，除此之外较好的生理活性也是皂苷的一大特点，据研究表明海星的各个组织中都含有皂苷，正因如此我们选择海星这一海洋生物研究其皂苷活性。海星还具有很好的药理价值，但日常生活中海星没有太大的食用价值，海星皂苷这一研究领域在国内还属于起步阶段。许多生物体内细胞在正常的状态下就会不断地产生一定浓度的活性氧，体内活性氧主要产生于有免疫活性的生物细胞和许多协同配合的信号传递作用。一定生理剂量的活性氧在生物体内起着非常重要的生理作用，但活性氧过量产生，则会对生物体造成不同程度的伤害。因此需要利用活性氧清除剂来对过盛的活性氧进行清除。自由基清除剂也称为抗氧化剂，可清除体内多余的自由基，减轻它们对机体的损伤。自由基的清除是抗氧化剂发挥其抗氧化作用的主要途径。自由基清除能力就是检测抗氧化剂提供的氢或电子会向自由基迁移的能力。稳定的色原体自由基，如DPPH自由基，已经在有机体中被广泛应用于抗氧化活性的检测。

技术实现思路

[0003]针对上述情况，为克服现有技术的缺陷，本专利技术提供了一种具有抗氧化活性的多棘海盘车皂苷制备工艺，是一种可以废物利用的方法，抗氧化活性高，通过此研究可以变废为宝，在科学研究的基础上，为海星皂苷在食品、保健品及药学应用方面的开发利用提供可靠的科学依据。
[0004]本专利技术采取的技术方案如下：本专利技术提供了一种具有抗氧化活性的多棘海盘车皂苷制备工艺，包括以下步骤：
[0005]步骤一：对多棘海盘车样品进行预处理，得多棘海盘车样品粉末；
[0006]步骤二：对样品粉末采用索氏提取法回流提取海星皂苷，得多棘海盘车皂苷提取液；
[0007]步骤三：对提取液进行浓缩，得浓缩液冷藏备用；
[0008]步骤四：对多棘海盘车皂苷进行分离萃取，得萃取物；
[0009]步骤五：对样本进行硅胶柱层析，以硅胶为固定相，石油醚为溶剂，用五倍柱体积氯仿
‑
甲醇混合液为流动相，对正丁醇层提纯后的皂苷进行梯度洗脱，得洗脱液；
[0010]步骤六：对各部洗脱液进行分别收集并进行浓缩、干燥后冷藏保存备用；
[0011]步骤七：对多棘海盘车皂苷样品进行活性测定实验；
[0012]步骤八：对皂苷样品的抗氧化活性筛选，得抗氧化活性测定的实验结果。
[0013]进一步地，所述步骤一将多棘海盘车样品干燥后，用高速粉碎机打成碎末状。
[0014]进一步地，所述步骤二粗皂苷的提取按照1:10的料液比在圆底烧瓶装入一定量的85％乙醇，采用索氏提取法回流提取海星皂苷1.5h，重复提取海星皂苷3次。
[0015]进一步地，所述步骤三将所有提取液用旋转蒸发仪在54℃条件下进行浓缩，全部浓缩完成后，将浓缩液放入细口瓶中冷藏备用。
[0016]进一步地，所述步骤四粗皂苷提取液与等体积的石油醚混合于分液漏斗进行液液萃取以去除提取液中的脂类杂质，重复萃取三次后分离出水层合并萃取液并浓缩；将浓缩后的萃取液再用等体积的乙酸乙酯萃取三次，继续分离出水层合并萃取液并浓缩；最后用等体积的水饱和的正丁醇萃取三次，分离出正丁醇层合并后浓缩至浸膏状样品。
[0017]进一步地，所述步骤五和步骤六氯仿与甲醇的混合液梯度依次设定为10∶0、9∶1、8∶2、7∶3、6∶4、5∶5、4∶6、0∶10，分别收集各部洗脱液并进行浓缩、干燥后冷藏保存备用。
[0018]进一步地，所述步骤七抗氧化活性的研究采用对DPPH自由基清除率测定的方法进行分析。取1mL分离精制后的多棘海盘车皂苷样品，加入3mLDPPH自由基溶液，静置反应10min，在517nm下测定吸光度，将测得的吸光度记为Ai；取1mL分离精制后的多棘海盘车皂苷样品加3mL无水乙醇测定吸光度记为Aj；取1mL空白试剂加3mLDPPH溶液测定吸光度记为A1，根据公式计算皂苷样品清除率。
[0019][0020]式中：
[0021]Ai——皂苷样品溶液+DPPH
·
溶液的吸光度值；
[0022]Aj——皂苷样品溶液+无水乙醇的吸光度值；
[0023]A1——空白溶液+DPPH
·
溶液的吸光度值。
[0024]采用上述结构本专利技术取得的有益效果如下：本方案一种具有抗氧化活性的多棘海盘车皂苷制备工艺，是一种可以废物利用的方法，抗氧化活性高，通过此研究可以变废为宝，在科学研究的基础上，为海星皂苷在食品、保健品及药学应用方面的开发利用提供可靠的科学依据。
[0025]说明书附图
[0026]图1为本专利技术提出的一种具有抗氧化活性的多棘海盘车皂苷制备工艺中步骤四的液液萃取具体实验步骤。
具体实施方式
[0027]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例；基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0028]实施例1：一种具有抗氧化活性的多棘海盘车皂苷制备工艺，包括以下步骤：
[0029]步骤一：对多棘海盘车样品进行预处理；
[0030]步骤二：对样品粉末采用索氏提取法回流提取海星皂苷；
[0031]步骤三：对提取液进行浓缩；
[0032]步骤四：对多棘海盘车皂苷进行分离萃取；
[0033]步骤五：对样本进行硅胶柱层析；
[0034]步骤六：对各部洗脱液进行分别收集并进行浓缩、干燥；
[0035]步骤七：对多棘海盘车皂苷样品进行活性测定实验；
[0036]步骤八：对皂苷样品的抗氧化活性筛选实验结果。
[0037]进一步地，所述步骤一将多棘海盘车样品干燥后，用高速粉碎机打成碎末状。
[0038]进一步地，所述步骤二粗皂苷的提取按照1:8的料液比在圆底烧瓶装入一定量的87％乙醇，采用索氏提取法回流提取海星皂苷1.4h，重复提取海星皂苷3次。
[0039]进一步地，所述步骤三将所有提取液用旋转蒸发仪在58℃条件下进行浓缩，全部浓缩完成后，将浓缩液放入细口瓶中冷藏备用。
[0040]进一步地，所述步骤四粗皂苷提取液与等体积的石油醚混合于分液漏斗进行液液萃取以去除提取液中的脂类杂质，重复萃取三次后分离出水层合并萃取液并浓缩；将浓缩后的萃取液再用等体积的乙酸乙酯萃取三次，继续分离出水层合并萃取液并浓缩；最后用等体积的水饱和的正丁醇萃取三次，分离出正丁醇层合并后浓缩至浸膏状样品。
[0041]进一步地，所述步骤五和步骤六氯仿与甲醇的混合液梯度依次设定为10∶0、9∶1、8∶2、7∶3、本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有抗氧化活性的多棘海盘车皂苷制备工艺，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：对多棘海盘车样品进行预处理；步骤二：对样品粉末采用索氏提取法回流提取海星皂苷；步骤三：对提取液进行浓缩；步骤四：对多棘海盘车皂苷进行分离萃取；步骤五：对样本进行硅胶柱层析；步骤六：对各部洗脱液进行分别收集并进行浓缩、干燥；步骤七：对多棘海盘车皂苷样品进行活性测定实验；步骤八：对皂苷样品的抗氧化活性筛选实验结果。2.根据权利要求1所述的一种具有抗氧化活性的多棘海盘车皂苷制备工艺，其特征在于：所述步骤一将多棘海盘车样品干燥后，用高速粉碎机打成碎末状。3.根据权利要求1所述的一种具有抗氧化活性的多棘海盘车皂苷制备工艺，其特征在于：所述步骤二粗皂苷的提取按照1:10的料液比在圆底烧瓶装入一定量的85％乙醇，采用索氏提取法回流提取海星皂苷1.5h，重复提取海星皂苷3次。4.根据权利要求1所述的一种具有抗氧化活性的多棘海盘车皂苷制备工艺，其特征在于：所述步骤三将所有提取液用旋转蒸发仪在54℃条件下进行浓缩，全部浓缩完成后，将浓缩液放入细口瓶中冷藏备用。5.根据权利要求1所述的一种具有抗氧化活性的多棘海盘车皂苷制备工艺，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：李敏晶，夏榕，胡澜，孙庆，焦雅倩，刘上，
申请(专利权)人：大连海洋大学，
类型：发明
国别省市：