一种织物洗涤剂除菌性能的测试评价方法技术

本发明专利技术公开了一种织物洗涤剂除菌性能的测试评价方法。本发明专利技术以金黄色葡萄球菌作为试验菌，JB

【技术实现步骤摘要】
一种织物洗涤剂除菌性能的测试评价方法


[0001]本专利技术涉及一种织物洗涤剂除菌性能的测试评价方法，属于应用化学领域。

技术介绍

[0002]目前，国内外对于日化产品抗/抑菌性能测试的标准化工作进行了大量的探索和研究，并建立了一系列国家或行业标准。在我国现行的轻工行业标准《日化产品抗菌抑菌效果的评价方法》（QB/T 2738
‑
2012）中，规定了日化产品如织物洗涤用品、人体皮肤清洁产品等的抗菌、抑菌效果的检测方法及评价标准。主要是通过最低杀/抑菌浓度、抑菌环的大小、杀/抑菌率、杀灭对数值等评价指标来判断抗抑菌产品对各种菌的抗抑菌效果。抗/抑菌是采用化学或物理的方法杀灭/抑制或妨碍细菌生长繁殖及其活性的过程，除菌是采用化学和物理的方法抑制并去除作用载体上的细菌或真菌的过程。然而，关于日化产品除菌性能的测试评价方法，目前尚未有完善的国家或行业标准。

技术实现思路

[0003]本专利技术旨在提供一种织物洗涤剂除菌性能的测试评价方法，建立一种除菌效果评价方法，对织物洗涤剂的除菌效果进行评价。
[0004]本专利技术是通过将微生物悬浮液涂覆到载体上，模拟实际洗涤过程用待测试样处理染菌载体，最后回收载体表面残留活菌，评价产品的除菌效果。该方法可用于织物洗涤剂的除菌性能评价。
[0005]本专利技术提供了一种织物洗涤剂除菌性能的测试评价方法，包括以下步骤：（1）在无菌环境下，用接种环划取试验菌种第3代~6代的营养琼脂培养基斜面新鲜培养物（18h~24h）至装有0.03mol/L磷酸盐缓冲溶液（PBS）的无菌试管中稀释，用涡旋震荡器混匀，以使细菌悬浮均匀。用浊度仪粗测其含菌浓度，要求作用浓度为1.0
×
108cfu/mL～5.0
×
108cfu/mL。
[0006]（2）在广口玻璃瓶中将待测试样用250mL的无菌硬水稀释至产品标明的作用浓度，并将稀释后的试样置于恒温磁力搅拌器上混匀10min，温度控制在（25
±
1）℃。
[0007]（3）以3cm
×
3cm 的JB
‑
00棉布作为载体，每片载体上以5点法接种20μL菌悬液，载体平铺于培养皿内，于（36
±
1）℃的培养箱中干燥固定20min，备用（染菌载体应当天使用）。
[0008]（4） 每3片3cm
×
3cm染菌载体为一个单元，在每个广口玻璃瓶中放入3片染菌载体，启动恒温磁力搅拌器，（200
±
20）r/min磁力搅拌20min。用无菌镊子夹出布片，倒掉广口玻璃瓶中的洗涤溶液，将布片放回广口玻璃瓶中，再加入250mL无菌硬水，（200
±
20）r/min磁力搅拌漂洗5min，以此方式漂洗2次。
[0009]（5）用无菌摄子取出3片染菌载体，放入含30mL0.5%吐温80 PBS的无菌塑料瓶中洗脱，在涡旋震荡器上混合60s，取混匀后的洗脱液0.5mL，加入到含4.5mL经灭菌的PBS试管中进行稀释。并选择适宜的稀释度样液0.5mL（一般不超过3个稀释度，具体稀释度取决于试样除菌效果）置于无菌平皿内，每个稀释度接种两个无菌平皿。用凉至40℃~45℃的TSA培养基
15mL~20mL作倾注，转动平皿，使其充分混匀，静置使琼脂凝固。
[0010]（6）以无菌硬水代替试验样品，重复步骤（2）~步骤（5），作为空白对照组。
[0011]（7）将试验组、对照组平皿倒置于（36
±
1）℃的培养箱，培养（48
±
4）h，计数菌落数并计算试验样品的除菌率。除菌率按照以下公式计算。试验重复三次，求其平均值。
[0012]式中：Ⅰ——洗涤后空白对照组回收残留菌落数；Ⅱ——洗涤后试验组回收残留菌落数。
[0013]本专利技术的有益效果：（1）本专利技术所述除菌性能评价方法可用于评价织物洗涤剂对织物的除菌效果。
[0014]（2）本专利技术所述除菌效果测试方法模拟织物的实际洗涤过程，使得试验结果更准确有效。
[0015]（3）本专利技术所述织物洗涤剂除菌效果测试方法，可用于评价不同织物洗涤剂产品的除菌效果，在产品功效评价以及配方开发领域具有潜在的应用价值；同时也可作为日化产品除菌行业标准的制定基础。
附图说明
[0016]图1为空白对照组5次重复试验的除菌率结果；图2为5种不同试样的除菌率结果。
具体实施方式
[0017]下面通过实施例来进一步说明本专利技术，但不局限于以下实施例。
[0018]选择市售5种织物洗涤剂产品，使用本专利技术方法分别对不同织物洗涤剂的除菌性能进行测试，每种产品分别进行3次试验，每次试验做2组平行，试验结果取平均值。具体试验流程如下：（1）在无菌环境下，用接种环划取金黄色葡萄球菌（ATCC6538）第3代~6代的营养琼脂培养基斜面新鲜培养物（18h~24h）至装有0.03mol/L磷酸盐缓冲溶液（PBS）的无菌试管中稀释，用涡旋震荡器混匀，以使细菌悬浮均匀。用浊度仪粗测其含菌浓度，要求作用浓度为1.0
×
108cfu/mL～5.0
×
108cfu/mL。
[0019]（2）称取0.50g试验样品至广口玻璃瓶中，加入250mL的无菌硬水稀释，并将稀释后的洗涤溶液置于恒温磁力搅拌器上混匀10min，洗涤溶液的水温控制在（25
±
1）℃。
[0020]（3）以3cm
×
3cm 的JB
‑
00棉布作为载体，每片载体上以5点法接种20μL菌悬液，载体平铺于培养皿内，于（36
±
1）℃的培养箱中干燥固定20min，备用（染菌载体应当天使用）。
[0021]（4） 每3片3cm
×
3cm染菌载体为一个单元。在每个广口玻璃瓶中放入3片染菌载体，启动恒温磁力搅拌器，（200
±
20）r/min磁力搅拌20min。用无菌镊子夹出布片，倒掉广口玻璃瓶中的洗涤溶液，将布片放回广口玻璃瓶中，再加入250mL无菌硬水，（200
±
20）r/min磁力搅拌漂洗5min，以此方式漂洗2次。
[0022]（5）用无菌摄子取出3片染菌载体，放入含30mL 0.5%吐温80 PBS的无菌塑料瓶中洗脱，在涡旋震荡器上混合60s。取混匀后的洗脱液0.5mL，加入到含4.5mL经灭菌的PBS试管
中进行稀释。并选择适宜的稀释度（10
‑1、10
‑2、10
‑3）样液0.5mL（一般不超过3个稀释度，具体稀释度取决于试样除菌效果）置于无菌平皿内，每个稀释度接种两个无菌平皿。用凉至40℃~45℃的TSA培养基15mL~20mL作倾注，转动平皿，使其充分混匀，静置使琼脂凝固。
[0023]（6）以无菌硬水代替试验产品，重复步骤（2）~步骤（5），作为空白对照组。
[0024]（7）将试验组本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种织物洗涤剂除菌性能的测试评价方法，其特征在于包括以下步骤：（1）用接种环划取试验菌种的营养琼脂培养基斜面新鲜培养物至装有磷酸盐缓冲溶液PBS的无菌试管中稀释，用涡旋震荡器混匀，以使细菌悬浮均匀；（2）将待测试样用250mL无菌硬水稀释至作用浓度，置于恒温磁力搅拌器上混匀10min；（3）将试验菌的菌悬液涂覆到载体上制备染菌载体；（4）将染菌载体放入待测试样中，启动恒温磁力搅拌器洗涤20min，待洗涤结束后再换水漂洗2次，每次5min；（5）用无菌镊子取出漂洗后染菌载体，放入装有30mL的含0.5%吐温80 PBS的无菌塑料瓶中，在涡旋震荡器上洗脱60s；（6）将洗脱液用PBS做10倍系列稀释，选择适宜的稀释度样液接种于胰蛋白胨大豆琼脂培养基TSA，每个稀释度接种2个平皿；将平皿倒置于恒温培养箱中培养后计数菌落数；试验重复三次，求其平均值，算出待测样品的除菌率。2.根据权利要求1所述的织物洗涤剂除菌性能的测试评价方法，其特征在于：试验过程在无菌环境中进行，试验中所用到设备及试剂均经过高温灭菌或紫外线消毒后使用，试验所用菌种为金黄色葡萄球菌ATCC6538的第3代~第6代新鲜培养物，培养时间18h~24h，试验菌悬液要求浓度为1.0
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108cfu/mL~5.0
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108cfu/mL。3.根据权利要求1所述的织物洗涤剂除菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：姚晨之，杨洁，严方，
申请(专利权)人：中国日用化学研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：