分离检测阿伐斯汀中间体Z3中基因毒性杂质的方法技术

本发明专利技术属于分析化学领域，具体涉及一种分离测定阿伐斯汀中间体Z3中基因毒性杂质的方法。本发明专利技术方法采用的色谱柱是十八烷基键合硅胶为填料，采用缓冲盐溶液、有机溶液进行梯度洗脱，将阿伐斯汀中间体Z3中基因毒性杂质进行分离检测；检测波长为270

【技术实现步骤摘要】
分离检测阿伐斯汀中间体Z3中基因毒性杂质的方法


[0001]本专利技术属于分析化学领域，具体涉及一种HPLC法分离测定阿伐斯汀中间体Z3中基因毒性杂质的方法。

技术介绍

[0002]阿伐斯汀是一种中等强度的竞争性组织胺H1受休拮抗剂，属于抗组胺药。密度：1.17g/cm3，熔点：222℃(熔融分解)。是以2,6-二溴吡啶为起始原料,经酰化反应,HECK反应得到(E)-3-[6-[(4-甲苯基)羰基]-2-吡啶基]丙烯酸乙酯，再经Wittig反应得到(E)-6-[(E/Z)-3-(1-吡咯烷基)-1-(4-甲基苯基)丙烯基]-2-吡啶丙烯酸乙酯，经酸转化，水解，重结晶得阿伐斯汀。
[0003]阿伐斯汀能与组织胺竞争效应细胞上的组织胺H1受体，使组织胺不能同H1受体结合，从而抑制其引起过敏反应。没有明显的抗胆碱作用，对中枢神经系统的穿透能力低。因此，抗胆碱副作用和对中枢神经系统的副作用小。本品主要以原形经肾排泄。阿伐斯汀可以治疗过敏性鼻炎、过敏性皮肤疾病、慢性自发性荨麻疹、症状性皮肤划痕症、胆碱性荨麻疹、自发的后日性寒冷感冒荨麻疹、湿疹痕痒。
[0004]阿伐斯汀中间体Z3，根据其合成工艺路线，存在诸多杂质，其中杂质Z
1c
为基因毒性杂质，杂质Z
3x
可能转为基因毒性杂质；
[0005]由于杂质Z
1c
为基因毒性杂质，杂质Z
3x
可能转化为基因毒性杂质，因此需在中间体Z3中控制至较低限度。目前暂无定分析方法及文献分析方法可将杂质Z
1c
和杂质Z
3x
与中间体Z3及Z3中可能含有的其余各已知杂质有效分离。

技术实现思路

[0006]本专利技术目的之一是提供一种分离阿伐斯汀中间体Z3中基因毒性杂质的方法，该方法可有效分离阿伐斯汀中间体Z3中基因毒性杂质，确保药物原料安全性。
[0007]为了实现上述目的，本专利技术的技术方案为：
[0008]分离阿伐斯汀中间体Z3中基因毒性杂质的方法，所述方法采用的色谱柱是十八烷基键合硅胶为填料，采用流动相A、流动相B和流动相C进行梯度洗脱，将所述阿伐斯汀中间体Z3中基因毒性杂质进行分离；所述流动相A为缓冲盐溶液，流动相B、流动相C为有机溶液；所述阿伐斯汀中间体Z3中相关杂质为杂质Z1、杂质Z2、杂质Z
2a
、杂质Z
2b
、杂质Z
2e
、杂质Z
2f
、杂质Z
3a
、杂质Z
3b
、杂质Z
3c
、杂质Z
3d
、杂质Z
3e
、杂质Z
3f
、杂质Z
3x1
、杂质Z
1c
和Z
3x
中的一种或多种，基因毒性杂质为Z
1c
和/或Z
3x
；所述中间体Z3及相关杂质结构式具体如下：
[0009][0010][0011]进一步，所述流动相A为0.05mol/L乙酸铵溶液、体积百分比浓度为0.2％的三乙胺溶液，使用磷酸将所述流动相A的pH调至3.8～4.2；
[0012]具体的，所述流动相A的pH为4；
[0013]进一步，所述流动相B为乙腈；所述流动相C为甲醇；
[0014]进一步，所述梯度洗脱程序为：
[0015][0016]进一步，所述流动相流速为0.9～1.1ml/min；
[0017]具体的，所述流动相流速为1.0ml/min；
[0018]进一步，所述色谱柱柱温为28～32℃；
[0019]具体的，所述色谱柱柱温为30℃；
[0020]进一步，所述方法进样量为10～30μl；
[0021]具体的，所述方法进样量为20μl；
[0022]进一步，所述色谱柱为Thermo Acclaim C18 120 4.6mm
×
250mm，5μm。
[0023]本专利技术目的之二是提供一种检测阿伐斯汀中间体Z3中基因毒性杂质的方法，该方法可以有效检测阿伐斯汀中间体Z3中是否存在所述基因毒性杂质。
[0024]为了实现上述目的，本专利技术的技术方案为：
[0025]检测阿伐斯汀中间体Z3中基因毒性杂质的方法，利用目的一中所述的方法将阿伐斯汀中间体Z3中基因毒性杂质进行分离，通入检测器进行检测，将供试品色谱图与已知对照品色谱图进行对比，判定阿伐斯汀中间体Z3中是否含有所述基因毒性杂质；所述检测器波长设定为270
±
5nm；
[0026]进一步，所述检测器波长设定为270nm。
[0027]本专利技术目的之三是提供一种测定阿伐斯汀中间体Z3中基因毒性杂质的方法，该方法可以测定伐斯汀中间体Z3中所述基因毒性杂质的含量。
[0028]为了实现上述目的，不专利技术的技术方案为：
[0029]测定阿伐斯汀中间体Z3中基因毒性杂质的方法，所述方法具体包含以下步骤：
[0030]1)溶液配制：
[0031]取供试样品溶于稀释剂中，得供试品溶液；取所述基因毒性杂质对照品，用稀释剂溶解稀释得对照品溶液；
[0032]2)分离；
[0033]利用权目的一中所述的方法，将阿伐斯汀中间体Z3中基因毒性杂质进行分离；
[0034]3)检测；
[0035]利用目的二中所述的方法，检测阿伐斯汀中间体Z3中是否存在所述基因毒性杂质；
[0036]4)测定；
[0037]根据检测得到的色谱图，以峰面积考察供试品溶液中阿伐斯汀中间体Z3中基因毒性杂质的含量；
[0038]进一步，所述稀释剂及体积比为甲醇：水：甲酸：800:200:1。
[0039]本专利技术的有益效果在于：本专利技术方法采用高灵敏度、高耐用性色谱方法，可在24分钟内将基因毒性杂质Z
1c
和可能转化为含基因毒性结构的杂质Z
3x
与供试品主峰及供试品中可能存在的其他13个已知杂质很好分离，基因毒性杂质控制限度为0.00625％，提供了现有技术未能解决的杂质Z
1c
和杂质Z
3x
的分离测定问题；分析方法时间短、灵敏度高、专属性强、重现性好、操作简单可行。
附图说明
[0040]图1为专属性试验的HPLC色谱图；
[0041]图2为检测限试验的HPLC色谱图；
[0042]图3为色谱条件变化耐用性试验2的HPLC色谱图；
[0043]图4为色谱条件变化耐用性试验3的HPLC色谱图；
[0044]图5为色谱条件变化耐用性试验4的HPLC色谱图；
[0045]图6为色谱条件变化耐用性试验5的HPLC色谱图；
[0046]图7为色谱条件变化耐用性试验6的HPLC色谱图；
[0047]图8为色谱条件变化耐用性试验7的HPLC色谱图；
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.分离阿伐斯汀中间体Z3中基因毒性杂质的方法，其特征在于，所述方法采用的色谱柱是十八烷基键合硅胶为填料，采用流动相A、流动相B和流动相C进行梯度洗脱，将所述阿伐斯汀中间体Z3中基因毒性杂质进行分离；所述流动相A为缓冲盐溶液，流动相B、流动相C为有机溶液；所述阿伐斯汀中间体Z3中基因毒性杂质为杂质Z
1c
和Z
3x
中的一种或多种；所述阿伐斯汀中间体Z3及其基因毒性杂质Z
1c
和Z
3x
结构式具体如下：2.根据权利要求1中所述的方法，其特征在于，所述流动相A为0.05mol/L乙酸铵溶液、体积百分比浓度为0.2％的三乙胺溶液，使用磷酸将所述流动相A的pH调至3.8～4.2。3.根据权利要求1中所述的方法，其特征在于，所述流动相B为乙腈；所述流动相C为甲醇。4.根据权利要求1中所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱程序为：5.根据权利要求1中所述的方法，其特征在于，所述流动相流速为0.9～1.1ml/min。6.根据权利要求1中所述的方法，其特征在于，所述色谱柱柱温为28～32...

【专利技术属性】
技术研发人员：张荣，周春燕，
申请(专利权)人：重庆华邦制药有限公司，
类型：发明
国别省市：