溶瘤腺病毒和检查点抑制剂联合疗法制造技术

本发明专利技术涉及用于治疗癌症的溶瘤病毒特别是溶瘤腺病毒和检查点抑制剂的联合疗法，特别地涉及包括(a)编码肿瘤坏死因子α(TNFα)和/或白介素

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】溶瘤腺病毒和检查点抑制剂联合疗法


[0001]本专利技术总体上涉及病毒学、免疫学和医学。在某些方面，本专利技术涉及用于治疗癌症的溶瘤病毒特别是溶瘤腺病毒和检查点抑制剂的联合疗法。

技术介绍

[0002]检查点抑制剂(CPI)已经彻底改变了癌症疗法并验证了免疫治疗作为一种方法的可行性。不幸的是，只有少数患者有响应。一些患者仅在有限的时间内受益，而大多数患者没有可检测到的益处，特别是当它涉及常见类型的非黑素瘤实体瘤时。因此，CPI作为一种方法确实得到了验证，但由于只有少数患者受益，因此仍有未满足的临床需求。
[0003]这种未满足需求的一个实例是肾细胞癌(RCC)，对于肾细胞癌(RCC)，抗PD
‑
1纳武利尤单抗(nivolumab)已被批准用于二线治疗。在随机的3期试验中，CPI组中确认的响应率为21.5％，而依维莫司(everolimus)(雷帕霉素(rapamycine)的哺乳动物靶标的抑制剂)组中为3.9％。中位总生存率(OS)分别为25.0和19.1个月。另一项临床试验将CPI(阿替利珠单抗(atezolizumab)，抗PD
‑
L1)与抗VEGF(舒尼替尼(sunitinib))药物组合使用，将总响应率(ORR)提高至32％(抗PD
‑
L1作为单一疗法为25％，以及舒尼替尼作为单一疗法为29％)2。RCC是先前被描述为“免疫原性”的肿瘤类型，并且一些患者对高剂量IL
‑
2治疗有响应3，但大多数患者示出对免疫疗法没有响应。大多数肿瘤类型中都存在明显的改进空间，因为ORR仍然很低(黑素瘤40％4，尿路上皮癌21.1％5，非小细胞肺癌症19.4％6，肝细胞癌14.3％7等)。
[0004]WO2014170389涉及溶瘤腺病毒载体单独或连同治疗组合物用于癌症的治疗用途和治疗方法。在发展多年之后，目前开始将溶瘤病毒用作癌症治疗剂。尽管已经有涉及作用机制和影响病毒功效的因素的一些发现，但仍然需要确定决定对病毒疗法的总体响应的途径。在临床试验中，已证明溶瘤病毒具有良好的安全性和有前景的功效。然而，响应仍有改进的空间，特别是在具有显著转移负荷的患者中。与溶瘤病毒活性相关的途径的进一步表征可以揭示改进病毒疗法的功效的潜在靶标。

技术实现思路

[0005]本专利技术基于以下发现：将编码细胞因子TNFα和/或IL
‑
2的溶瘤腺病毒以及免疫检查点抑制剂抗PD
‑
L1或PD
‑
1共同给药至临床相关的癌症模型，相对于单独给药任一剂，导致针对所治疗癌症的免疫活性的显著转变，并伴随高存活益处。因此，在几个实施方式中，本申请提供了用于在哺乳动物中治疗和/或预防癌症和/或建立转移和/或用于在哺乳动物中启动、增强或延长抗肿瘤响应的联合疗法，包括向哺乳动物共同给药(a)编码TNFα和/或IL
‑
2作为转基因的溶瘤腺病毒载体和(b)优选选择性结合PD
‑
L1或PD
‑
1的一种或多种免疫检查点抑制剂。
[0006]在某些方面，与单独的任一种治疗相比，将溶瘤病毒和免疫检查点抑制剂共同给药至患有癌症的受试者提供了增强的且甚至协同的抗肿瘤免疫。
[0007]在其他相关方面，提供了用于优化、加强或延长检查点抑制剂的作用或者使检查点抑制剂的毒性或剂量或治疗次数能够降低的方法，包括向有此需要的哺乳动物给药(a)编码TNFα和/或IL
‑
2作为转基因的溶瘤腺病毒载体和(b)优选选择性结合PD
‑
L1或PD
‑
1的一种或多种免疫检查点抑制剂。
附图说明
[0008]图1.尽管T细胞浸润和抑制差异，但泌尿系统癌症患者来源的样品对溶瘤病毒疗法有响应。患者样品1是尿路上皮癌，患者样品2和3是透明细胞肾细胞癌。(A)对石蜡包埋的样品进行苏木精和伊红染色。(B)CD8免疫组织化学。(C)PD
‑
L1免疫组织化学(D)组织培养物经离体治疗后的MTS生存力测定。示出了通过非配对t检验与Welch
’
s校正计算的7天的统计显著性(**p<0.01；***p<0.001)。示出了平均值的均值标准误差(SEM)。
[0009]图2.在7天的治疗中在细胞因子水平下对病毒疗法和检查点抑制剂治疗的响应。将来自三名个体患者来源的肿瘤组织培养物的表达值绘制在一起。(A)IFNg。(B)TNFα。(C)IL
‑
2。(D)IFNb。(E)颗粒酶B。(F)CXCL10。(G)IL
‑
6。(H)TGFb。(I)精氨酸酶。通过双因素方差分析(two
‑
way ANOVA)计算统计显著性。(*p<0.05；**p<0.01)。示出了平均值的均值标准误差(SEM)。
[0010]图3.在第7天对病毒疗法和检查点抑制剂治疗的分组细胞因子响应的分析。将来自三名不同患者来源的肿瘤组织培养物的表达值绘制在一起。(A)免疫刺激细胞因子的倍数变化。(B)免疫抑制效应物的倍数变化。(C)总体抑制(包括IL
‑
6、TGF
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b和精氨酸酶)与总体刺激(包括IFNg、IFNb、颗粒酶B和CXCL10)。(D)免疫刺激细胞因子表达和肿瘤组织培养物生存力之间的皮尔逊r相关性。
[0011]图4.体内测试病毒疗法以实现检查点抑制疗法。(A)实验设计：患有B16.OVA肿瘤的66只动物在第0天开始治疗。在治疗后第7天(灰色虚线)处死其中的30只并收集肿瘤，同时使其余的活着用于生存率实验，进行更多轮治疗直至肿瘤完全消退或死亡(S：同时给药病毒和抗PD
‑
L1，PB：初免和加强(prime and boost))。(B)总生存率(Kaplan
‑
Meier，Log rank Mantel
‑
Cox检验)。(C
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G)个体肿瘤生长线。(*p<0.05；**p<0.01,***p<0.001)。
[0012]图5.表达单一细胞因子或两种细胞因子的腺病毒构建体的示意图。病毒骨架是人腺病毒血清型5，除了纤毛突起(fiber knob)来自血清型3。单和双转基因(TNFα、IL
‑
2或TNFα和IL
‑
2)均受病毒E3启动子的转录控制。在双转基因的情况下，IRES元件将两种细胞因子分开，导致每种细胞因子独立合成。将转基因置于E3区中，该区缺失gp19k和6.7k。E1A蛋白在恒定区2中缺失24个氨基酸(“D24”)，致使病毒E1A对于Rb结合存在缺陷。E1A表达受E2F启动子的调控。E1B/19k带有禁用缺失(disabling deletion)。
[0013]图6.对于抗PD
‑
1难治性的体内模型的开发和验证。(A本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于在需要这样治疗的受试者中治疗癌症的方法，所述方法包括向所述受试者给药有效量的(a)编码TNFα和/或IL
‑
2作为转基因的溶瘤腺病毒载体以及(b)一种或多种免疫检查点抑制剂。2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述一种或多种免疫检查点抑制剂选择性结合PD
‑
L1或PD
‑
1。3.根据权利要求1所述的方法，其中，将所述溶瘤腺病毒载体瘤内、静脉内、动脉内或腹腔内给药。4.根据权利要求3所述的方法，其中，将所述溶瘤腺病毒载体瘤内给药。5.根据权利要求1所述的方法，其中，所述免疫检查点抑制剂是选择性结合PD
‑
L1的单克隆抗体，优选地选自由以下组成的组：BMS
‑
936559、LY3300054、阿替利珠单抗、度伐利尤单抗和阿维鲁单抗。6.根据权利要求1所述的方法，其中，所述免疫检查点抑制剂是选择性结合PD
‑
1的单克隆抗体，优选地选自由帕博利珠单抗(MK
‑
3475)和纳武利尤单抗(BMS
‑
936558)组成的组。7.根据权利要求1所述的方法，其中，将所述病毒以约106‑
10
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VP、106‑
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VP、108‑
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14
VP、108‑
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VP或10
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‑
10
12
VP的量给药。8.根据权利要求1所述的方法，其中，将所述检查点抑制剂以约2mg/kg至25mg/kg的量给药。9.根据权利要求1所述的方法，其中，所述受试者患有选自以下的癌症：肝细胞癌、结直肠癌、肾细胞癌、膀胱癌、肺癌(包括非小细胞肺癌)、胃癌、食管癌、肉瘤、间皮瘤、黑素瘤、胰腺癌、头颈癌、卵巢癌、乳腺癌、宫颈癌和肝癌。10.根据权利要求9所述的方法，其中，所述受试者患有肾细胞癌或头颈癌。11.根据权利要求1所述的方法，其中，所述受试者之前已经失败过至少一次化学疗法或免疫疗法治疗，诸如用检查点抑制剂的治疗。12.根据权利要求11所述的方法，其中，所述受试者患有能够介导CD8+T细胞的功能障碍的癌症。13.根据权利要求11所述的方法，其中，所述受试者患有癌症，在所述癌症中，选自由GZMG、GMZF、KLRC2和CD46组成的组的与免疫活性相关的以及尤其选自由TNFSF18/GITRL和EAR2组成的组的与T细胞活性调控子相关的至少一种基因被下调。14.根据权利要求11所述的方法，其中，所述受试者患有抗PD
‑
1难治性癌症，所述癌症优选为黑素瘤。15.根据权利要求1所述的方法，所述方法包括向所述受试者给予选自以下的额外疗法：放射疗法、化学疗法、抗血管生成剂或靶向疗法，诸如烷化剂、核苷类似物、细胞骨架修饰剂、细胞生长抑制剂、单克隆抗体、激酶抑制剂。16.根据权利要求1所述的方法，其中，所述受试者是人。17.根据权利要求1所述的方法，其中，将第一剂所述溶瘤腺病毒载体和第一剂所述免疫检查点抑制剂同时给药至所述受试者。18.根据权利要求1所述的方法，其中，将第一剂所述溶瘤腺病毒载体和第一剂所述免疫检查点抑制剂在24小时内依次给药。19.根据权利要求1所述的方法，其中，所述编码TNFα和/或IL
‑
2作为转基因的溶瘤腺病
毒载体包括
‑
5/3嵌合纤毛突起，
‑
用于E1A的肿瘤特异性表达的E2F1启动子，
‑
腺病毒E1的Rb结合恒定区2中的24bp缺失(D24)，
‑
病毒gp19k和6.7k阅读框的核酸序列缺失，以及
‑
编码至少TNFα和/或IL
‑
2作为转基因的核酸序列替代E3区中缺失的gp19k/6.7K，导致在病毒E3启动子下对转基因表达的复制相关控制。20.根据权利要求19所述的方法，其中，所述编码TNFα和/或IL
‑
2作为转基因的溶瘤腺病毒载体进一步包括E1B19k的缺失。21.药物组合物，所述药物组合物包括(a)编码TNFα和/或IL
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2作为转基因的溶瘤腺病毒载体以及(b)一种或多种免疫检查点抑制剂。22.根据权利要求21所述的组合物，其中，所述一种或多种免疫检查点抑制剂选择性结合PD
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L1或PD
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1。23.根据权利要求21所述的药物组合物，其中，所述编码TNFα和/或IL
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2作为转基因的溶瘤腺病毒载体包括
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5/3嵌合纤毛突起，
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用于E1A的肿瘤特异性表达的E2F1启动子，
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腺病毒E1的Rb结合恒定区2中的24bp缺失(D24)，
‑
病毒gp19k和6.7k阅读框的核酸序列缺失，以及
‑
编码至少TNFα和/或IL
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2作为转基因的核酸序列替代E3区中缺失的gp19k/6.7K，导致在病毒E3启动子下对转基因表达的复制相关控制。24.一种试剂盒，所述试剂盒包括第一容器、第二容器和包装说明书，其中，所述第一容器包括至少一剂包含编码TNFα和/或IL
‑
2作为转基因的溶瘤腺病毒载体的药物组合物，以及所述第二容器包括至少一剂包含检查点抑制剂的药物组合物，以及所述包装说明书包括使用所述药物组合物治疗患有癌症的个体的说明。25.根据权利要求24所述的试剂盒，其中，所述编码TNFα和/或IL
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2作为转基因的溶瘤腺病毒载体包括
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5/3嵌合纤毛突起，
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用于E1A的肿瘤特异性表达的E2F1启动子，
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腺病毒E1的Rb结合恒定区2中的24bp缺失(D24)，
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病毒gp19k和6.7k阅读框的核酸序列缺失，以及
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编码至少TNFα和/或IL
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2作为转基因的核酸序列替代E3区中缺失的gp19k/6.7K，导致在病毒E3启动子下对转基因表达的复制相关控制。26.根据权利要求21所述的组合物或根据权利要求24所述的试剂盒，其中，所述编码TNFα和/或IL
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2作为转基因的溶瘤腺病毒载体进一步包括E1B19k的缺失。27.编码TNFα和/或IL
‑
2作为转基因的溶瘤腺病毒载体连同免疫检查点抑制剂用于治疗癌症或肿瘤的用途。28.根据权利要求27所述用途的编码TNFα和/或IL...

【专利技术属性】
技术研发人员：阿克塞，
申请(专利权)人：蒂尔坦生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：