靶向CD47与PD-L1双效融合蛋白及其应用制造技术

本申请涉及一种融合蛋白，其包含提高与CD47结合的亲和力的SIRPα变体与人PD

【技术实现步骤摘要】
靶向CD47与PD-L1双效融合蛋白及其应用


[0001]本申请涉及生物医药领域，具体的涉及一种靶向CD47与PD-L1双效融合蛋白及其应用。

技术介绍

[0002]目前，巨噬细胞是通过吞噬作用清除患病细胞(例如肿瘤细胞)的主要吞噬细胞。巨噬细胞对靶细胞的吞噬作用取决于靶细胞表面促吞噬信号和抗吞噬信号的相对强度。正常、健康的细胞免于吞噬作用，是因为正常细胞上普遍表达的CD47与巨噬细胞上的信号调节蛋白α(SIRPα)相互作用，触发“别吃我”的信号。同时，肿瘤细胞通过过表达PD-L1来逃避免疫监视，使得肿瘤细胞逃避免疫系统的杀伤。
[0003]因此，本领域需要能够开发一种药物，将抗PD-L1和SIRPα两种免疫检查点药物组合起来，形成同时与PD-L1、CD47抗原结合的协同效应。

技术实现思路

[0004]本申请提供了一种靶向CD47与PD-L1双效融合蛋白及其应用，包括针对CD47与PD-L1双抗原的融合蛋白、核酸分子、载体、细胞，及其制备方法、药物组合物和用途。
[0005]本申请提供一种融合蛋白，其包含a)与野生型人SIRPα相比，提高与CD47结合的亲和力的SIRPα变体；b)人PD-L1抗体或其抗原结合片段。
[0006]某些实施方式中所述的融合蛋白，其中所述SIRPα变体包含人SIRPα的IgV结构域、片段或其变体。
[0007]某些实施方式中所述的融合蛋白，其中所述SIRPα变体包含SEQ ID NO:12所示的氨基酸序列。
[0008]某些实施方式中所述的融合蛋白，其中所述抗体包括轻链，所述轻链包含轻链可变区VL，所述VL包含SEQ ID NO:13所示的氨基酸序列。
[0009]某些实施方式中所述的融合蛋白，其中所述轻链包含SEQ ID NO:15所示的氨基酸序列。
[0010]某些实施方式中所述的融合蛋白，其中所述抗体包括重链，所述重链包含重链可变区VH，所述VH包含SEQ ID NO:16所示的氨基酸序列。
[0011]某些实施方式中所述的融合蛋白，其中所述重链包含SEQ ID NO:20所示的氨基酸序列。
[0012]某些实施方式中所述的融合蛋白包括第一多肽链和第二多肽链，其中所述第一多肽链包含所述抗体的轻链，第二多肽链包含所述抗体的重链，且其中所述第一多肽链或所述第二多肽链包含所述SIRPα变体。
[0013]某些实施方式中所述的融合蛋白，其中所述第一多肽链包含所述抗体的轻链和所述SIRPα变体。
[0014]某些实施方式中所述的融合蛋白，其中在所述第一多肽链中，所述轻链的C端与所
述SIRPα变体的N端直接或间接连接。
[0015]某些实施方式中所述的融合蛋白，其中所述间接连接包括通过连接子连接，所述连接子包含SEQ ID NO:18-19中任一项所示的氨基酸序列。
[0016]某些实施方式中所述的融合蛋白，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:23所示的氨基酸序列。
[0017]某些实施方式中所述的融合蛋白，其中所述第二多肽链为所述抗体的重链。
[0018]某些实施方式中所述的融合蛋白，其中所述第二多肽链包含SEQ ID NO:20所示的氨基酸序列。
[0019]某些实施方式中所述的融合蛋白，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:23所示的氨基酸序列；且所述第二多肽链包含SEQ ID NO:20所示的氨基酸序列。
[0020]某些实施方式中所述的融合蛋白，其中所述第二多肽链包含所述抗体的重链和所述SIRPα变体。
[0021]某些实施方式中所述的融合蛋白，其中在所述第二多肽链中，所述SIRPα变体的C端与所述重链的N端直接或间接连接。
[0022]某些实施方式中所述的融合蛋白，其中所述间接连接包括通过连接子连接，所述连接子包含SEQ ID NO:18-19中任一项所示的氨基酸序列。
[0023]某些实施方式中所述的融合蛋白，其中所述第二多肽链包含SEQ ID NO:24所示的氨基酸序列。
[0024]某些实施方式中所述的融合蛋白，其中所述第一多肽链为所述抗体的轻链。
[0025]某些实施方式中所述的融合蛋白，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:15所示的氨基酸序列。
[0026]某些实施方式中所述的融合蛋白，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:15所示的氨基酸序列；且所述第二多肽链包含SEQ ID NO:24所示的氨基酸序列。
[0027]某些实施方式中所述的融合蛋白，其中所述第一多肽链和所述第二多肽链通过所述轻链可变区和所述重链可变区的相互作用而连接。
[0028]某些实施方式中所述的融合蛋白包含两条所述第一多肽链，以及两条所述第二多肽链。
[0029]某些实施方式中所述的融合蛋白为同二聚体。
[0030]另一方面，本申请提供了一种或多种分离的核酸分子，其编码所述融合蛋白或其片段。
[0031]另一方面，本申请提供了载体，其包含所述的核酸分子。
[0032]另一方面，本申请提供了细胞，其包含所述的载体，或者表达所述的融合蛋白。
[0033]另一方面，本申请提供了制备所述的融合蛋白的方法，其包括以下的步骤：合成所述的融合蛋白，和/或，在表达所述的融合蛋白的条件下培养所述的细胞。
[0034]另一方面，本申请提供了药物组合物，其包括所述的融合蛋白和任选地药学上可接受的佐剂。
[0035]另一方面，本申请提供了所述的融合蛋白和/或所述的药物组合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗肿瘤。
[0036]另一方面，本申请提供了所述的融合蛋白和/或所述的药物组合物在制备药物中
的用途，其中所述肿瘤包括乳腺癌。
[0037]另一方面，本申请提供了治疗肿瘤的方法，其包括以有效治疗癌症的量向需要其的对象施用所述的融合蛋白和/或所述的药物组合物。
[0038]另一方面，本申请提供了治疗肿瘤的方法，其包括以有效治疗癌症的量向需要其的对象施用所述的融合蛋白和/或所述的药物组合物，其中所述肿瘤包括乳腺癌。
[0039]另一方面，本申请提供了所述的融合蛋白和/或所述的药物组合物，其用于治疗肿瘤。
[0040]另一方面，本申请提供了所述的融合蛋白和/或所述的药物组合物，其用于治疗肿瘤，其中所述肿瘤包括乳腺癌。
[0041]本申请提供的融合蛋白具有的有益效果包括以下组：能够靶向表达CD47与PD-L1双抗原的细胞、具有体外促巨噬细胞吞噬能力、具有T细胞体外激活能力和/或肿瘤细胞杀伤能力。
[0042]本领域技术人员能够从下文的详细描述中容易地洞察到本申请的其它方面和优势。下文的详细描述中仅显示和描述了本申请的示例性实施方式。如本领域技术人员将认识到的，本申请的内容使得本领域技术人员能够对所公开的具体实施方式进行改动而不脱离本申请所涉及专利技术的精神和范围。相应地，本申请的附图和说明书中的描述仅仅是本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.融合蛋白，其包含a)与野生型人SIRPα相比，提高与CD47结合的亲和力的SIRPα变体；b)人PD-L1抗体或其抗原结合片段。2.根据权利要求1所述的融合蛋白，其中所述SIRPα变体包含人SIRPα的IgV结构域、片段或其变体。3.根据权利要求1-2中任一项所述的融合蛋白，其中所述SIRPα变体包含SEQ ID NO:12所示的氨基酸序列。4.一种或多种分离的核酸分子，其编码权利要求1-3中任一项所述的融合蛋白或其片段。5.载体，其包含权利要求4所述的核酸分子。6.细胞，其包含权利要求5所述的载体，...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱建伟，林桐，肖晓东，韩雷，谢跃庆，江华，
申请(专利权)人：美国杰科实验室有限公司杰科天津生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：