一株爪哇虫草菌株Bd01及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株爪哇虫草菌株Bd01及其应用，属于农业微生物技术领域。所述爪哇虫草(Cordyceps javanica)菌株Bd01，其于2021年8月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.23078保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。所述爪哇虫草菌株Bd01从罹病死亡的咖啡灭字脊虎天牛幼虫僵虫虫体上分离得到，以该菌体的活体或其孢子悬浮液作为活性成分制备生物制剂，实现了防治咖啡灭字脊虎天牛以及由咖啡灭字脊虎天牛引起的病害的目的，利于提高咖啡的产量和品质。利于提高咖啡的产量和品质。利于提高咖啡的产量和品质。

【技术实现步骤摘要】
一株爪哇虫草菌株Bd01及其应用


[0001]本专利技术涉及农业微生物
，特别是涉及一株爪哇虫草菌株Bd01及其应用。

技术介绍

[0002]咖啡树是属茜草科多年生常绿灌木或小乔木，日常饮用的咖啡所用的咖啡豆就是源于咖啡树果实里面的果仁，随着人们消费观念的改变，人们对于咖啡的需求逐年增多。而云南省作为中国小粒咖啡的主要产区，供应着全国各地以及贸易出口所需的咖啡，但是由于近些年小粒咖啡单一大面积的种植，导致危害咖啡的害虫形成一个稳定的生态系统，严重危害了咖啡的产量和品质，对于市场需求造成了一定的影响。危害咖啡的害虫有多种，世界上报道达360多种，我国初步调查有94种，而危害咖啡的天牛据记载有60多种，我国危害咖啡的种类的天牛主要有咖啡灭字脊虎天牛、咖啡旋皮锦天牛、海南灰天牛等，而云南省小粒咖啡种植区主要受咖啡灭字脊虎天牛危害较重。目前，用于防治咖啡灭字脊虎天牛的方法主要以化学防治、物理防治或两者结合的方式，但是都未见明显成效。
[0003]随着国家对于多种剧毒农药的禁用，以及由于长期大量使用化学农药造成天敌昆虫大量死亡、破坏生态系统、农药残留造成环境污染等问题的日益突出，寻求非化学手段的防治已成为解决问题的关键。而微生物因其能够制备成高效、安全、无残留的生物农药，一直被科研者大力追求，也为消费者带来福音，目前虽然有用于防治鞘翅目害虫的微生物报道，但是目前能够高效用于防治咖啡灭字脊虎天牛的微生物很少，而用爪哇虫草菌防治咖啡灭字脊虎天牛的报道更是鲜有报道。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一株爪哇虫草菌株Bd01及其应用，以解决上述现有技术存在的问题，利用该菌可以防治鞘翅目害虫咖啡灭字脊虎天牛，有效减少该害虫对于咖啡的危害以及减少有该害虫引起的咖啡病害，利于咖啡产量的提高。
[0005]为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
[0006]本专利技术提供一株爪哇虫草(Cordyceps javanica)菌株Bd01，其于2021年8月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.23078；保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。
[0007]本专利技术还提供爪哇虫草或其孢子悬浮液在防治咖啡灭字脊虎天牛方面的应用，所述爪哇虫草为所述的爪哇虫草菌株Bd01。
[0008]本专利技术还提供爪哇虫草或其孢子悬浮液在制备防治咖啡灭字脊虎天牛的生物制剂中的应用，所述爪哇虫草为所述的爪哇虫草菌株Bd01。
[0009]本专利技术还提供爪哇虫草或其孢子悬浮液在制备防治咖啡灭字脊虎天牛引起的咖啡病害的生物制剂中的应用，所述爪哇虫草为所述的爪哇虫草菌株Bd01。
[0010]本专利技术还提供一种防治咖啡灭字脊虎天牛的生物制剂，包括所述的爪哇虫草或其孢子悬浮液。
[0011]本专利技术还提供一种防治咖啡灭字脊虎天牛引起的咖啡病害的生物制剂，包括所述的爪哇虫草或其孢子悬浮液。
[0012]本专利技术化提供一种爪哇虫草孢子悬浮液的制备方法，包括：
[0013]将所述的爪哇虫草菌株Bd01接种于PPDA培养基中，在恒温恒湿培养箱中黑暗培养2周；
[0014]将培养2周完全产孢的爪哇虫草菌株Bd01用含0.1％吐温
‑
80无菌水洗出，磁力搅拌器搅拌均匀，经血球计数板计数后，配成所需浓度孢子悬浮液。
[0015]优选的是，所述PPDA培养基由以下方法制备：去皮马铃薯200g，切块加水煮沸20min，双层纱布过滤，滤液加葡萄糖20g、蛋白胨10g、琼脂15～20g，融化后加水补足体积至1000mL。
[0016]优选的是，所述恒温恒湿培养条件：温度为26℃，湿度≥85％。
[0017]本专利技术公开了以下技术效果：
[0018]本专利技术公开的爪哇虫草菌株是从自然罹病死亡的咖啡灭字脊虎天牛幼虫中分离的，以爪哇虫草菌株活体或其孢子悬浮液制备生物制剂，应用于防治咖啡灭字脊虎天牛幼虫，其致死率可达95.83％，感染率达93.61％；致死中浓度LC
50
为4.56
×
105孢子/mL。此外，还能防治由咖啡灭字脊虎天牛引起的咖啡病害，降低该害虫或其引起的病害对咖啡产量和品质的影响，进而利于咖啡产量和品质的提高。
附图说明
[0019]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0020]图1为不同培养基对爪哇虫草Bd01菌株生长的影响；
[0021]图2为不同培养基对爪哇虫草Bd01菌株产孢量的影响；
[0022]图3为不同温度对爪哇虫草Bd01菌株生长的影响；
[0023]图4为不同湿度对爪哇虫草Bd01菌株生长的影响；
[0024]图5为不同紫外光照时长对爪哇虫草Bd01菌株生长的影响；
[0025]图6为爪哇虫草Bd01菌株系统发育进化树。
具体实施方式
[0026]现详细说明本专利技术的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本专利技术的限制，而应理解为是对本专利技术的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
[0027]应理解本专利技术中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本专利技术。另外，对于本专利技术中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本专利技术内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
[0028]除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本专利技术所述领域的常规
技术人员通常理解的相同含义。虽然本专利技术仅描述了优选的方法和材料，但是在本专利技术的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。
[0029]在不背离本专利技术的范围或精神的情况下，可对本专利技术说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本专利技术的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见的。本申请说明书和实施例仅是示例性的。
[0030]关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。
[0031]实施例1
[0032]爪哇虫草Bd01菌株的分离纯化以及鉴定
[0033]一、菌株的分离纯化
[0034]从自然罹病死亡的咖啡灭字脊虎天牛幼虫僵虫虫体上分离，该咖啡灭字脊虎天牛幼虫采集于普洱市思茅区南岛河村咖啡种植基地，该种植基地从未使用过相关微生物农药。采用如下步骤进行分离纯化：
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株爪哇虫草(Cordyceps javanica)菌株Bd01，其特征在于，其于2021年8月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.23078；保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。2.爪哇虫草或其孢子悬浮液在防治咖啡灭字脊虎天牛方面的应用，其特征在于，所述爪哇虫草为权利要求1所述的爪哇虫草菌株Bd01。3.爪哇虫草或其孢子悬浮液在制备防治咖啡灭字脊虎天牛的生物制剂中的应用，其特征在于，所述爪哇虫草为权利要求1所述的爪哇虫草菌株Bd01。4.爪哇虫草或其孢子悬浮液在制备防治咖啡灭字脊虎天牛引起的咖啡病害的生物制剂中的应用，其特征在于，所述爪哇虫草为权利要求1所述的爪哇虫草菌株Bd01。5.一种防治咖啡灭字脊虎天牛的生物制剂，其特征在于，包括权利要求1所述的爪哇虫草或其孢子...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴国星，刘全俊，秦小萍，易璟，贾奔，高熹，何明川，李金梁，兰明先，施春兰，
申请(专利权)人：富民县进出口有限公司，
类型：发明
国别省市：