用于植物健康的融合蛋白、重组细菌和孢子外壁片段制造技术

本发明专利技术涉及具有靶向序列、孢子外壁蛋白或孢子外壁蛋白片段和果胶酶的融合蛋白，所述靶向序列、孢子外壁蛋白或孢子外壁蛋白片段将融合蛋白靶向至重组蜡样芽孢杆菌家族成员的孢子外壁，其中果胶酶是具有SEQ ID NO：213

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于植物健康的融合蛋白、重组细菌和孢子外壁片段
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求于2019年3月19日提交的美国临时专利申请第62/820,789号的优先权，其全部内容通过引用整体并入本文。
专利

[0003]本专利技术涉及包含靶向序列、孢子外壁蛋白或孢子外壁蛋白片段的融合蛋白，所述靶向序列、孢子外壁蛋白或孢子外壁蛋白片段将所述融合蛋白靶向至重组蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)家族成员的孢子外壁(exosporium)。所述融合蛋白还包含果胶酶，包括果胶酸裂合酶(pectate lyase)或多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase)。本专利技术还涉及表达所述融合蛋白的重组蜡样芽孢杆菌家族成员、源自所述重组蜡样芽孢杆菌家族成员的孢子外壁片段和含有所述重组蜡样芽孢杆菌家族成员或孢子外壁片段的制剂。还提供了用重组蜡样芽孢杆菌家族成员、孢子外壁片段或制剂处理的植物种子。本专利技术还涉及使用重组蜡样芽孢杆菌家族成员、孢子外壁片段或制剂刺激植物生长和/或促进植物健康的方法。
[0004]电子方式提交的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种融合蛋白，其包含：将所述融合蛋白靶向至重组蜡样芽孢杆菌家族成员的孢子外壁的靶向序列、孢子外壁蛋白或孢子外壁蛋白片段；和多聚半乳糖醛酸酶，所述多聚半乳糖醛酸酶：包含来自黑曲霉ATCC 9029的多聚半乳糖醛酸内切酶；包含简单芽孢杆菌多聚半乳糖醛酸内切酶；包含沙福芽孢杆菌多聚半乳糖醛酸酶；包含高地芽孢杆菌多聚半乳糖醛酸酶；包含地衣芽孢杆菌多聚半乳糖醛酸酶；包含与SEQ ID NO：210具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％、至少99％或100％同一性的氨基酸序列；由与SEQ ID NO：210和227中的任一个具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％、至少99％或100％同一性的氨基酸序列组成；包含与SEQ ID NO：218
‑
221中的任一个具有至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％、至少99％或100％同一性的氨基酸序列；由与SEQ ID NO：218
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221中的任一个具有至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％％、至少98％、至少99％或100％同一性的氨基酸序列组成；包含与SEQ ID NO：211或212具有至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％、至少99％或100％同一性的氨基酸序列；由与SEQ ID NO：211或212具有至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％、至少99％或100％同一性的氨基酸序列组成；或其任意组合。2.根据权利要求1所述的融合蛋白，其中所述靶向序列包含以下序列或由以下序列组成：(a)与SEQ ID NO：1的氨基酸20
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35具有至少约43％同一性的氨基酸序列，其中与氨基酸25
‑
35的同一性至少为约54％；(b)SEQ ID NO：1的氨基酸1
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35；(c)SEQ ID NO：1的氨基酸20
‑
35；(d)SEQ ID NO：1；(e)SEQ ID NO：96；或者(f)SEQ ID NO：120。3.根据权利要求1所述的融合蛋白，其中所述靶向序列包含序列X1‑
X2‑
X3‑
X4‑
X5‑
X6‑
X7‑
X8‑
X9‑
X
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X
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X
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X
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X
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X
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‑
X
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，其中：X1为任何氨基酸或不存在；X2为苯丙氨酸(F)、亮氨酸(L)、异亮氨酸(I)或甲硫氨酸(M)；X3为任何氨基酸；X4为脯氨酸(P)或丝氨酸(S)；X5为任何氨基酸；X6为亮氨酸(L)、天冬酰胺(N)、丝氨酸(S)或异亮氨酸(I)；
X7为缬氨酸(V)或异亮氨酸(I)；X8为甘氨酸(G)；X9为脯氨酸(P)；X
10
为苏氨酸(T)或脯氨酸(P)；X
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为亮氨酸(L)或苯丙氨酸(F)；X
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为脯氨酸(P)；X13为任何氨基酸；X
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为任何氨基酸；X
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为脯氨酸(P)、谷氨酰胺(Q)或苏氨酸(T)；和X
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为脯氨酸(P)、苏氨酸(T)或丝氨酸(S)。4.根据权利要求1或权利要求2所述的融合蛋白，其中所述靶向序列、孢子外壁蛋白或孢子外壁蛋白片段还在紧邻所述靶向序列、孢子外壁蛋白或孢子外壁蛋白片段的第一个氨基酸之前的氨基酸位置处或在所述靶向序列的对应于SEQ ID NO：1的氨基酸20的位置处包含甲硫氨酸、丝氨酸或苏氨酸残基。5.根据权利要求1
‑
3中任一项所述的融合蛋白，其中所述融合蛋白还包含位于所述靶向序列、孢子外壁蛋白或孢子外壁蛋白片段与多聚半乳糖醛酸酶之间的氨基酸接头。6.根据权利要求5所述的融合蛋白，其中所述接头包含聚丙氨酸接头、聚甘氨酸接头或包含丙氨酸和甘氨酸残基二者的混合物的接头。7.根据权利要求1
‑
6中任一项所述的融合蛋白，其中所述多聚半乳糖醛酸酶包含来自黑曲霉ATCC 9029的多聚半乳糖醛酸内切酶或由来自黑曲霉ATCC 9029的多聚半乳糖醛酸内切酶组成。8.根据权利要求1
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6中任一项所述的融合蛋白，其中所述多聚半乳糖醛酸酶包含与SEQ ID NO：211具有至少85％序列同一性的氨基酸序列或由与SEQ ID NO：211具有至少85％序列同一性的氨基酸序列组成。9.根据权利要求1
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6中任一项所述的融合蛋白，其中所述多聚半乳糖醛酸酶包含与SEQ ID NO：218
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221中的任一个具有至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％、至少99％或100％同一性的氨基酸序列。10.根据权利要求1
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6中任一项所述的融合蛋白，其中所述多聚半乳糖醛酸酶包含与SEQ ID NO：219
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221中任一个具有至少90％序列同一性的氨基酸序列。11.根据权利要求1
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2中任一项所述的融合蛋白，其中所述多聚半乳糖醛酸酶包含SEQ ID NO：218
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221中的任一个或由SEQ ID NO：218
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221中的任一个组成。12.一种融合蛋白，其包含：将所述融合蛋白靶向至重组蜡样芽孢杆菌家族成员的孢子外壁的靶向序列、孢子外壁蛋白或孢子外壁蛋白片段；和果胶酸裂合酶，所述果胶酸裂合酶：包含枯草芽孢杆菌果胶酸裂合酶；...

【专利技术属性】
技术研发人员：J，
申请(专利权)人：斯博基生物科技公司，
类型：发明
国别省市：