一种信号肽突变体及其用途制造技术

本发明专利技术公开了一种信号肽突变体及其用途，属于基因工程技术领域。本发明专利技术中的信号肽突变体是将来源于革兰氏阳性菌Sec途径的信号肽N区的带电荷氨基酸进行定点突变，使N区氨基酸的电荷密度为0.2～0.8之间；对所述信号肽H区进行突变，使H区的氨基酸疏水性在0～70之间；对所述信号肽C区的氨基酸进行定点突变，使C区最后三位氨基酸突变为丙氨酸

【技术实现步骤摘要】
一种信号肽突变体及其用途
[0001]本申请是如下专利申请的分案申请，原申请的申请号：2020100747867，申请日：2020
‑
01
‑
22，专利技术名称：一种提高异源蛋白分泌量的信号肽突变体及其构建方法与用途。


[0002]本专利技术属于基因工程
，具体涉及一种信号肽突变体及其用途。

技术介绍

[0003]工业酶和生物制药蛋白等重组蛋白具有非常广阔的应用市场。目前人们已经研究出多种原核和真核表达系统来生产重组蛋白。其中，细菌具有容易处理、基因操作工具多等优点，更多地被用来当作重组蛋白的表达宿主。然而，异源蛋白在宿主中的表达往往会形成不溶性的包涵体，且容易被蛋白酶降解，这些都使得异源蛋白难以规模化生产。而将重组蛋白分泌到细菌宿主的生长介质中，则可以有效防止重组蛋白在胞浆中形成不溶性包涵体。另外，重组蛋白的分泌可以减轻该蛋白对生产宿主的毒性作用，可以简化产品下游处理步骤，显著降低生产成本。因此在生产过程中，人们希望能够将重组蛋白高效地分泌到细菌表达宿主的培养上清液中。r/>[0004]信本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提高异源蛋白分泌量的信号肽突变体，其特征在于：所述信号肽突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO：10所示。2.编码权利要求1所述信号肽突变体的基因。3.权利要求1所述信号肽突变体在提高异源蛋白分泌表达中的用途。4.如权利要求3所述的用途，其特征在于，所述异源蛋白为角质酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示。5.一种重组载体，其特征在于：含有权利要求2所述基因。6.一种宿主细胞，其特征在于：含有权利要求2所述基因或权利要求5所述重组载体。7.一种异源蛋白的生产方法，其特征在于：步骤如下：将含有权利要求1所述信号肽突变体的编码基因以及异源蛋白的编码基因的基因工程菌经活化后以1.5
‑
5％的接种量转接于发酵培养基中，于34
‑
40℃、215
‑
225r/min发酵培养20
‑
50h；所述发酵培养基组成为：玉米粉60
‑
70g/L，豆饼粉30
‑
50g/L，磷酸氢二钠2
‑
8g/L，磷酸二氢钾0.1
‑
0.6g/L，高温淀粉酶0.5
‑<...

【专利技术属性】
技术研发人员：李玉，路福平，刘逸寒，牛馨，王兴吉，刘夫锋，王克芬，张会图，刘文龙，张杰，彭冲，佟新伟，
申请(专利权)人：山东隆科特酶制剂有限公司，
类型：发明
国别省市：