氧化石墨烯基核酸适配体传感器的构建及检测伏马菌素B1的方法和应用技术

技术编号:31710200 阅读:36 留言:0更新日期:2022-01-01 11:13
本发明专利技术提供了一种氧化石墨烯基核酸适配体传感器的构建及检测伏马菌素B1的方法和应用,构建过程包括:设计与合成核酸适配体荧光探针;利用氧化石墨烯与核酸适配体共轭吸附作用进行荧光淬灭;靶标伏马菌素B1与核酸适配体结合,核酸适配体空间构象变化,荧光信号恢复;核酸内切酶DNase I酶切核酸适配体,释放靶标伏马菌素B1,稀释并配置标准溶液,测定荧光信号标准曲线;将实际待测样品经前处理,利用荧光适配体传感器检测平台,根据线性模型,测定伏马菌素B1含量;该检测方法具有高灵敏度和高特异性的优点,可以快速检测小麦粉中伏马菌素B1含量,与ELISA检测试剂盒有较高的符合度,在食品安全检测中具有重要的实际应用价值。食品安全检测中具有重要的实际应用价值。食品安全检测中具有重要的实际应用价值。

【技术实现步骤摘要】
氧化石墨烯基核酸适配体传感器的构建及检测伏马菌素B1的方法和应用


[0001]本专利技术属于伏马菌素B1的快速检测
,具体涉及一种基于酶信号放大的氧化石墨烯基核酸适配体传感器的构建及检测伏马菌素B1(FB1)的方法和应用。

技术介绍

[0002]伏马菌素是毒性最强的霉菌毒素之一,具有四种亚型(A、B、C和P),其中FB1毒性最强,存在最普遍,约占70%。2002年,FB1被世界卫生组织国际癌症研究机构认定为2B级致癌物。美国食品药品管理局(FDA)限定了玉米产品中伏马菌素总量(FB1、FB2和FB3)不得超过2mg kg
‑1。因此,开发快速、高灵敏和高特异性的FB1检测技术对食品安全领域非常重要。
[0003]传统的FB1检测技术主要基于仪器法的检测平台,包括高效液相色谱法、气相色谱

质谱串联法、高效液相色谱

质谱串联法等,然而该类方法检测步骤复杂,对于样品处理要求高,耗时长,且需要专业的仪器和操作人员。相比之下,免疫分析法具有快速、简单、方便等优点,包括酶联免疫法(ELISA)、本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种氧化石墨烯基核酸适配体传感器的构建方法,其特征在于:其包括如下步骤:(1)、在核酸适配体的5

端修饰羧基

X

罗丹明荧光基团,得到荧光标记的核酸适配体;(2)、氧化石墨烯与所述荧光标记的核酸适配体共轭吸附进行荧光淬灭,得到氧化石墨烯基核酸适配体传感器。2.根据权利要求1所述的氧化石墨烯基核酸适配体传感器的构建方法,其特征在于:步骤(1)中,所述荧光标记的核酸适配体的激发波长为575

595nm,发射波长为595

615nm,发射光颜色为橙红色;所述核酸适配体序列如SEQ ID NO.1所示。3.根据权利要求1所述的氧化石墨烯基核酸适配体传感器的构建方法,其特征在于:步骤(2)中,所述荧光标记的核酸适配体的最高荧光强度为758.34

928.61,结合氧化石墨烯后,荧光发生淬灭,荧光强度为4.77

39.97。4.一种氧化石墨烯基核酸适配体传感器,其特征在于:其由权利要求1

3任一项所述的构建方法得到。5.一种验证权利要求4所述的氧化石墨烯基核酸适配体传感器的方法,其特征在于:其包括如下步骤:(1)、将氧化石墨烯基核酸适配体传感器与靶标伏马菌素B1进行反应;(2)、核酸内切酶DNaseI酶切核酸适配体反应,释放靶标伏马菌素B1,实现靶标循环信号放大。6.根据权利要求5所述的验证氧化石墨烯基核酸适配体传感器的方法,其特征在于:步骤(1)中,所述反应的时间...

【专利技术属性】
技术研发人员:郭晓东张梦柯梁双林韦阳谢明树张晓伟
申请(专利权)人:上海交通大学
类型:发明
国别省市:

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