一种牙周炎模型的快速建立方法及治疗药物技术

本发明专利技术公开了一种牙周炎模型的快速建立方法及治疗药物，通过大鼠上颌双侧第二磨牙并配合5天高糖饮食成功得到单纯性大鼠牙周炎模型。本发明专利技术建立大鼠牙周炎模型后，将中性三七多糖应用于本模型，为三七资源的综合利用提供参考依据，给予中性三七多糖治疗后，大鼠炎症得到缓解，显著抑制了牙槽骨丢失，极大的保护了牙龈出血，本发明专利技术增加了中性三七多糖用于牙周炎治疗的新用途，为中性三七多糖治疗牙周炎的生物研究。的生物研究。的生物研究。

【技术实现步骤摘要】
一种牙周炎模型的快速建立方法及治疗药物


[0001]本专利技术涉及三七天然产物的应用领域，具体地说是一种牙周炎模型的快速建立方法及治疗药物。

技术介绍

[0002]牙周炎是一种常见的慢性感染性疾病，在口腔疾病中十分常见和流行，其特点是结缔组织附着以及牙槽骨丧失，常伴有牙齿松动和牙龈出血等症状，是成人牙齿脱落的主要原因，现今，许多研究已经证实牙周炎疾病始动因子是牙菌斑生物膜在牙龈周围积累，继而引发由一系列炎症细胞因子介导的宿主免疫应答。在整个牙周炎病理过程中，IL
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1β水平均较高，其可促进破骨细胞的增殖活化，参与牙周炎组织结构破坏和牙齿松动及脱落。大鼠是建立牙周炎模型的常用动物，具有经济高效的优点，牙周炎模型建立常用方法有涂菌法、LSP法、结扎法、结扎配合长期高糖饮食法等。相较于钢丝结扎，其他方法具有步骤繁琐、丝线需要重新固定等缺点。有研究者用正畸2
‑
0钢丝结扎配合20％高糖饮食诱导模型四周，成功得到大鼠牙周炎模型，但长期高糖饮食可诱发机体代谢性疾病，还可能破环机体免疫系统，不利于对单纯性牙周炎模型的研究。
[0003]三七(Panax notoginseng是中国传统名贵中药材，应用广泛，含有多种活性物质。截至目前，关于三七的研究主要集中在三七皂苷，而对三七多糖的研究较少，三七多糖是三七主要药效活性物质之一，研究证实其具有体外免疫刺激活性、调节免疫和抗肿瘤活性、保护神经功能、较强的清除自由基活性能力以及抗炎和修复骨损伤作用。ZL 2017 1 0459344中已阐述了三七中性多糖的提取纯化方法及具有促进人牙周膜干细胞和小鼠成骨细胞体外增殖的作用，但目前关于中性三七多糖对大鼠牙周炎的治疗作用还未见报道。因此需要一种牙周炎模型的快速建立方法及治疗药物。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种简单易行、效果理想的牙周炎模型建立方法，并将中性三七多糖应用于该模型的牙周炎模型的快速建立方法及治疗药物。
[0005]一种牙周炎模型的建立方法，用2
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0正畸钢丝结扎大鼠上颌双侧第二磨牙并配合5天高糖饮食成功得到大鼠牙周炎模型。
[0006]一种牙周炎模型的治疗药物，包含85％左右的中性三七多糖。
[0007]进一步地，将含量85％左右的中性三七多糖通过灌胃的方式用于该模型，给药剂量分别为200、400、800mg/kg,每天给药一次，持续给药28天。
[0008]运用本方法成功得到牙周炎模型，将中性三七多糖应用于该模型后，牙周炎症状大大缓解：血清IL
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1β水平下降；牙釉本质界到牙槽嵴顶的距离显著降低；根分叉区骨吸收面积百分比显著减少；牙龈出血情况显著改善；磨牙松动情况得到缓解。
[0009]本专利技术的有益效果在于：
[0010]本专利技术建立大鼠牙周炎模型后，将中性三七多糖应用于本模型，为三七资源的综
合利用提供参考依据，给予中性三七多糖治疗后，大鼠炎症得到缓解，显著抑制了牙槽骨丢失，极大的保护了牙龈出血，此外，磨牙松动情况得到改善，本专利技术增加了中性三七多糖用于牙周炎治疗的新用途，为中性三七多糖治疗牙周炎的生物研究。
附图说明
[0011]图1是实施例1中性三七多糖对大鼠牙周炎模型血清中IL
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1β水平影响的实验结果图。
[0012]图2是实施例1中性三七多糖对大鼠牙周炎模型牙釉本质界到牙槽嵴顶距离(CEJ
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ABC)影响的实验结果图。
[0013]图3是实施例1中性三七多糖对大鼠牙周炎模型第二磨牙根分叉区病理切片影响的实验结果图。
[0014]图4是实施例1中性三七多糖对大鼠牙周炎模型第二磨牙根分叉区骨吸收百分比影响的实验结果图。
具体实施方式
[0015]为了进一步了解本专利技术的技术特征，下面结合具体实施例对本专利技术进行详细地阐述。实施例只对本专利技术具有示例性的作用，而不具有任何限制性的作用，本领域的技术人员在本专利技术的基础上做出的任何非实质性的修改，都应属于本专利技术的保护范围。
[0016]一种牙周炎模型的建立方法，用2
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0正畸钢丝结扎大鼠上颌双侧第二磨牙并配合5天高糖饮食成功得到大鼠牙周炎模型。
[0017]实施例1
[0018]大鼠牙周炎模型的建立和中性三七多糖对该模型的应用
[0019](1)模型建立与分组：取30只SPF级SD大鼠，雄性，5周龄，体重100
‑
140g，适应性常规喂养2周后，体重在200g左右。随机选取25只作为造模组对其进性牙周炎造模，剩下5只作为正常组(N)，不作处理。牙周炎造模方法如下：用戊巴比妥钠溶液对大鼠进性腹腔注射麻醉(40mg/kg)，仰卧固定，选取上颌双侧第二磨牙，剥离牙龈，用3.0医用正畸钢丝结扎，尽量使结扎头位于龈沟内，结扎完成后，将造模组随机分为模型组、盐酸米诺环素阳性对照组、中性三七多糖低(200mg/kg)、中(400mg/kg)、高(800mg/kg)剂量治疗组(n＝5)。自结扎之日起，造模组大鼠饲以10％高糖水和10％高糖水浸泡的软食，连续饲养5天，第6天起，则进行常规饲养。正常组在整个实验过程均采取常规饲养方式。自结扎后的第二天开始，按表1对各组大鼠进行灌胃，连续灌胃28天。
[0020]表1实验分组
[0021][0022][0023]如图1所示，与正常组大鼠相比，本方法显著增加模型组大鼠血清IL
‑
1β水平(P<0.01)，形态学结果表明模型组牙槽骨吸收距离显著高于正常组(P<0.01，见图2)，上述实验结果表明，应用本方法可成功得到大鼠牙周炎模型。
[0024]一种牙周炎模型的治疗药物，包含85％左右的中性三七多糖。
[0025](2)试药配制及给药：准确称取中性三七多糖，溶于无菌蒸馏水，按200mg/kg、400mg/kg、800mg/kg剂量分别配制20mg/mL、40mg/mL、80mg/mL三种浓度的中性三七多糖试药，每100g体重大鼠灌胃1mL多糖体积给药；称取适量盐酸米诺环素溶于无菌蒸馏水，使其浓度为2mg/mL，每100g体重大鼠灌胃1mL盐酸米诺环素试药；模型组灌胃相应体积的无菌蒸馏水。
[0026]给药周期结束后对各项指标进行检查
[0027](1)细胞因子检查：末次给药后，各组大鼠禁食不禁水12h，用戊巴比妥钠溶液腹腔麻醉大鼠，真空采血管收集腹主动脉血约4mL，室温静置20min，4℃下3000rpm/min离心15min，小心分离得血清，
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20℃分装保存备用，酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清炎症因子IL
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1β水平，按照试剂盒说明书严格操作。
[0028](2)形态学观察：脱颈处死各组大鼠，小心分离双侧上颌骨，将左侧上颌骨剥离牙龈及骨膜等组织，煮沸5min以更好的祛除组织后，清洗浸泡于0.2moL/L的NaOH溶液中5min，去本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种牙周炎模型的建立方法，其特征在于用2
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0正畸钢丝结扎大鼠上颌双侧第二磨牙并配合5天高糖饮食成功得到大鼠牙周炎模型。2.一种牙周炎模型的治疗药物，其特征在于，包含85％的中性三七多...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈彤，唐祥，李怀宇，
申请(专利权)人：昆明医科大学，
类型：发明
国别省市：