磁珠法提取核酸用的加样板制造技术

本实用新型专利技术的磁珠法提取核酸用的加样板，设置大容量孔，并通过分隔层、分隔为至少第一空腔和第二空腔，分别容纳裂解液和磁珠，且第一空腔的体积大于第二空腔。在提取核酸时，在第一空腔中加入样本液，与裂解液接触，细胞裂解，释放核酸进溶液中。裂解完成后，打破分隔层，磁珠纳入溶液中，吸附溶解在溶液中的核酸。然后使用磁棒配合磁棒套，在控制下，吸附磁珠并转移进洗涤孔中，加以清洗，再转运进洗脱孔，由洗脱液将核酸洗脱。本实用新型专利技术的加样板，因为设置了大容量孔，允许容纳较大量的样本液，故可以从核酸浓度较低的样本液中提取出足够量的核酸。避免了液体转移操作，结构简单，不需要对现有的提取核酸的仪器作出太大的改变，适应性佳。应性佳。应性佳。

【技术实现步骤摘要】
磁珠法提取核酸用的加样板


[0001]本技术属于分子生物试验设备
，具体涉及一种磁珠法提取核酸用的加样板。

技术介绍

[0002]核酸提取仪，是应用其配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸提取工作的仪器。广泛应用在疾病控制中心、临床疾病诊断、输血安全、法医学鉴定、环境微生物检测、食品安全检测、畜牧业和分子生物学研究等多种领域。根据工作原理不同，可以分为离心柱法核酸提取仪和磁珠法核酸提取仪，两个大类。
[0003]其中，磁珠法核酸提取仪，以磁珠为载体，利用磁珠在高盐低PH值下吸附核酸，在低盐高PH值下与核酸分离的原理，再通过移动磁珠或转移液体来实现核酸的整个提取纯化过程。由于其原理的独特性，所以可设计成很多种通量，既可以单管提取，也可以提取8
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96个样本，且其操作简单快捷，提取96个样本仅需30
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45min，大大提高了实验效率，且成本低廉，因而可以在不同实验室使用，是目前市场上的主流仪器。
[0004]磁珠法核酸提取仪又分为抽吸法和磁棒法两种，其区别在于，抽吸法是固定磁珠的位置，但使用机械臂来转移不同液体，以浸泡磁珠；而磁棒法，则是将不同操作阶段的各个液体，包括裂解后的样本液、洗涤缓冲液、洗脱缓冲液等，依次放置于一多孔加样板上的各个液体加样孔中，然后控制磁棒，插入磁棒套后，通过磁性吸附上磁珠，再平移并依次浸入各个液体中，通过磁珠吸附核酸，洗涤后将核酸洗脱分离。具体为：依次从裂解后的样本液中吸附提取核酸、在洗涤缓冲液中洗涤磁珠连同吸附于磁珠上的核酸、在洗脱缓冲液中将吸附的核酸从磁珠上洗脱，最后，再提升磁棒，移走磁珠，核酸就溶解在洗脱缓冲液中。而与移动磁珠的磁珠法核酸提取仪相适配，通常需要使用一种多孔加样板，即一块板子，其上开有至少一排加样孔，这样，磁棒插入磁棒套并吸附上磁珠后，就可以在控制下，依次插入各个加样孔内的相应液体中，通过液体浸泡磁珠，完成相应的核酸提取、核酸清洗和核酸洗脱的全部过程。
[0005]现在普遍使用的磁珠法核酸提取仪，如图1所示，使用的通常都是一种均匀分布有多个加样孔，通常为32或96个，并排成规则的阵列状的多孔加样板。这种多孔加样板，因为各个孔是完全等同的，设置为标准孔1，故而对磁棒的移动控制可以较为简单，只要配合好各个标准孔1的间距大小，就可以做到等距离机械性地移动所述磁棒，以对应并插入各个标准孔1中。但是，也是因为各个加样孔是等同的，故而很难一次加入较多的样本液，这样对于从核酸浓度较低的样本液中提取核酸，就不是很方便。
[0006]因此，现有技术有待于进一步改进和提高。

技术实现思路

[0007]有鉴于现有技术的上述缺陷，本技术的目的在于提供一种磁珠法提取核酸用的加样板，以解决现有技术的加样板，不方便一次加入较大量的样本液，因此不方便在浓度
较低溶液中提取核酸的技术缺陷。
[0008]本技术的技术方案如下：
[0009]本技术公开了一种磁珠法提取核酸用的加样板，其中，包括至少一组加样孔，每组加样孔包括依次排列的至少一大容量孔和至少两标准孔；所述大容量孔包括至少一分隔层，将所述大容量孔分隔为至少第一空腔和第二空腔；所述第一空腔的体积大于所述第二空腔，用于容纳裂解液，所述裂解液用于裂解细胞，释放细胞中的核酸进溶液中；所述第二空腔用于容纳磁珠，所述磁珠用于从溶液中吸附核酸；所述标准孔至少包括一用于容纳清洗液的洗涤孔，和一用于容纳洗脱液的洗脱孔；所述清洗液用于清洗磁珠及所吸附的核酸；所述洗脱液用于从磁珠上洗脱核酸。
[0010]优选地，所述大容量孔的长度等于至少两个所述标准孔无障碍连接后的长度。这样，每组加样孔的长度为至少4个标准孔的长度，从而方便由现有的96孔板改造而成。
[0011]优选地，每组加样孔包括依次排列的至少两个所述洗涤孔，所述洗涤孔位于所述大容量孔和所述洗脱孔之间。增加洗涤孔，增加对磁珠连同吸附的核酸的清洗，可进一步保证最后得到的核酸的纯度。
[0012]优选地，所述分隔层为软质惰性固体层，不与所接触的反应试剂发生化学反应；所述软质惰性固体层浮于水，且易于破开。这样，在提取时，待第一空腔中的裂解液裂解细胞膜完成后，细胞中的核酸释放进溶液中，就可以自动或手动打破所述分隔层，使磁珠进入溶液，对溶液中的核酸进行吸附提取操作。
[0013]更优选地，所述分隔层为石蜡层。石蜡属于软质惰性固体材料，常温下化学性质稳定，不容易与其他化学品溶液发生反应，且很容易在外力下被破开，破开后也是浮于液面上，很容易与液体分层，不会影响到对溶液的操作。
[0014]优选地，所述分隔层为接近水平设置，所述第一空腔位于所述第二空腔的上方。上下排列所述大容量孔中的两个空腔，并且容纳裂解液的第一空腔位于上方，这样方便直接加入待提取核酸的样本液，且加入样本液后，直接发送裂解反应，细胞中的核酸溶解进溶液中。裂解完成后，敲碎所述分隔层，溶液自动下落接触磁珠，磁珠吸附溶液中溶解的核酸。
[0015]优选地，所述分隔层为接近竖直设置，所述第一空腔和所述第二空腔水平排列。水平排列的第二空腔中的磁珠，因为第二空腔较小，故堆积高度较高，分隔层打破后，磁珠将会向下塌入第一空腔，更好地混合第一空腔中的溶液，接触并吸附核酸。
[0016]优选地，所述加样板包括多于一排的所述加样孔，每排包括至少一组加样孔。这样可以同时多进程地平行执行核酸提取操作，可大大加快核酸提取速度。
[0017]更优选地，所述标准孔为横截面方形的深孔，每排加样孔的大容量孔和相同功能的标准孔各自正对，以矩阵形式排列。从而更适合多磁棒的磁珠法核酸提取仪的自动提取工作，因为大部分核酸提取仪中的磁棒都是并排设置的。
[0018]进一步优选地，所述标准孔的底部中央设有弧形光滑的凹陷。底部中央设置凹陷，方便核酸提取仪的磁棒插入到底。
[0019]在一个较佳的实施例中，所述加样板包括8排，每排包括两组，每组包括依次排列的一大容量孔和三个标准孔，所述大容量孔的长度等于三个标准孔的长度。本实施例中的加样板可以通过对现有的12*8的96孔深孔板加以简单改造，将每组加样孔的前三个加样孔打通，无障碍连接而成。
[0020]更佳地，每组加样孔依次为大容量孔、两个洗涤孔、和洗脱孔。对现有的96孔深孔板简单改造，将每组的前三个加样孔打通，后三个加样孔依次设为洗涤孔、洗涤孔和洗脱孔。这样，一个现有的96孔板，就可以改造为8排，每排2组的加样孔。
[0021]本技术的磁珠法提取核酸用的加样板，设置大容量孔，并且将所述大容量孔通过分隔层、分隔为至少第一空腔和第二空腔，其中，第一空腔容纳裂解液，第二空腔容纳磁珠，且第一空腔的体积大于第二空腔。在提取核酸时，在第一空腔中加入样本液，与所述裂解液接触，裂解细胞，释放出核酸进溶液中。裂解完成后，打破所述分隔层，磁珠纳入溶液中，吸附溶解在溶液中的核酸。然后使用磁棒配合磁棒套，在控制下，将磁珠磁性吸附在磁棒套外侧，并转移进洗涤孔中，加以清洗，再转运进洗脱孔，由洗脱液将磁珠所吸本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种磁珠法提取核酸用的加样板，其特征在于，包括至少一组加样孔，每组加样孔包括依次排列的至少一大容量孔和至少两标准孔；所述大容量孔至少包括一分隔层，将所述大容量孔分隔为至少第一空腔和第二空腔；所述第一空腔的体积大于所述第二空腔，用于容纳裂解液，所述裂解液用于裂解细胞，释放细胞中的核酸进溶液中；所述第二空腔用于容纳磁珠，所述磁珠用于从溶液中吸附核酸；所述标准孔包括至少一用于容纳清洗液的洗涤孔，和一用于容纳洗脱液的洗脱孔；所述清洗液用于清洗磁珠及所吸附的核酸；所述洗脱液用于从磁珠上洗脱核酸。2.根据权利要求1所述的加样板，其特征在于，所述大容量孔的长度等于至少两个所述标准孔无障碍连接后的长度。3.根据权利要求1所述的加样板，其特征在于，每组加样孔包括依次排列的至少两个所述洗涤孔，所述洗涤孔位于所述大容量孔和所述洗脱孔之间。4.根据权利要求1或2或3所...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭敏，徐世云，于雪，
申请(专利权)人：康码上海生物科技有限公司，
类型：新型
国别省市：