用于CRISPR-Cas9基因组编辑的优化的质粒系统技术方案

技术编号:41527009 阅读:55 留言:0更新日期:2024-06-03 23:01
本发明专利技术提供一种用于CRISPR‑Cas9基因组编辑的优化的质粒系统、相应的改造方法、构建载体的方法以及基因编辑方法,以使得优化的质粒系统提高了该系统在菌株的基因编辑中的工作效率和经济性,特别是适用于乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis),其中,该优化的质粒系统包括:Cas9表达盒和gRNA表达盒,其中,所述优化的质粒系统仅具有两个酶切位点,所述两个酶切位点分别位于sgRNA的靶向序列的两个连接位点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物,具体涉及一种用于crispr-cas9基因组编辑的优化的质粒系统、相应的改造方法、构建载体的方法以及基因编辑方法。


技术介绍

1、在靶点基因附近诱导dna产生双链断裂(double-strand break,dsb)是有效进行编辑基因组的关键因素,dsb的产生可以刺激细胞发生内源性dna修复反应,并进一步通过同源重组(homologous recombination,hr)或易错的非同源末端连接(non-homologousend joining,nhej)实现dna序列的修复及替换,从而实现基因编辑的目的。

2、crispr是簇状规则间隔短回文重复序列(clustered regularly interspacedshort palindromic repeats)的简称,它和crispr相关蛋白(crispr associatedprotein,cas)共同组成细菌和古细菌普遍存在的适应性免疫系统。

3、天然的crispr-cas9系统由三部分组成:cas9、crrna、tracrrna。tracrrna(在本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于CRISPR-Cas9基因组编辑的优化的质粒系统,其特征在于,包括:

2.根据权利要求1所述的优化的质粒系统,其特征在于:

3.根据权利要求1所述的优化的质粒系统,其特征在于:

4.根据权利要求1-3任意一项所述的优化的质粒系统,其特征在于:

5.根据权利要求1-4任意一项所述的优化的质粒系统,其特征在于:

6.根据权利要求1-5任意一项所述的优化的质粒系统,其特征在于:

7.一种得到权利要求1-6任意一项所述的优化的质粒系统的方法,其特征在于:

8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于:...

【技术特征摘要】

1.一种用于crispr-cas9基因组编辑的优化的质粒系统,其特征在于,包括:

2.根据权利要求1所述的优化的质粒系统,其特征在于:

3.根据权利要求1所述的优化的质粒系统,其特征在于:

4.根据权利要求1-3任意一项所述的优化的质粒系统,其特征在于:

5.根据权利要求1-4任意一项所述的优化的质粒系统,其特征在于:

6.根据权利要求1-5任意一项所述的优化的质粒系统,其特征在于:

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【专利技术属性】
技术研发人员:郭敏熊亮于雪
申请(专利权)人:康码上海生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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