一种昆虫细胞无血清、无动物源成分的基础培养基及其制备方法技术

本发明专利技术提供了一种昆虫细胞无血清、无动物源成分的基础培养基，包括基础组分、水解物组分和脂类组分，其中所述基础组分包括无机盐、氨基酸及糖类、维生素、微量元素和有机酸，所述水解物组分包括酵母水解物和植物蛋白水解物，所述脂类组分包括亚油酸、胆固醇和生育酚。其制备方法包括将各组分分别配成母液后混合，调节pH值在6.0

【技术实现步骤摘要】
一种昆虫细胞无血清、无动物源成分的基础培养基及其制备方法


[0001]本专利技术涉及昆虫细胞培养基
，具体涉及一种昆虫细胞无血清、无动物源成分的基础培养基，以及该基础培养基的制备方法。

技术介绍

[0002]由于昆虫杆状病毒系统能高水平地生产异源蛋白质，而且能保证异源蛋白质的生物活性并应用于医疗诊断、疫苗生产方面。目前已上市的利用昆虫杆状病毒表达系统生产的疫苗有猪瘟疫苗、猪圆环病毒2型疫苗、宫颈癌疫苗和治疗性前列腺癌疫苗等。昆虫杆状病毒系统不仅仅局限于疫苗的生产，还可用于基因治疗的载体和免疫活性分子等的生产。
[0003]传统工艺昆虫细胞的培养是以基础培养基添加5％
‑
10％血清进行培养，近些年国内也推出了多款低血清或者无血清含动物源成份的培养基仍无法避免因血清的原因引入支原体问题，引入病毒问题，引入动物源蛋白，质量不稳定，批间差异大，重复性差等问题。
[0004]国外无血清培养基gibco的SF900III或者Merck的420价格昂贵，且知识产权被国外垄断，所以迫切需要一款价格低廉、稳定性相对良好、无血清、无动物源的昆虫细胞基础培养基。

技术实现思路

[0005]为了解决上述问题，本专利技术提供了一种昆虫细胞无血清、无动物源成分的基础培养基。
[0006]本专利技术是采用如下技术方案实现的：
[0007]一种昆虫细胞无血清、无动物源成分的基础培养基，包括基础组分、水解物组分和脂类组分，其中所述基础组分包括无机盐、氨基酸及糖类、维生素、微量元素和有机酸，所述水解物组分包括酵母水解物和植物蛋白水解物，所述脂类组分包括亚油酸、胆固醇和生育酚。
[0008]优选的，以所述昆虫细胞无血清、无动物源成分的基础培养基体积计，所述水解物组分包括含量范围在2
‑
8g/L的酵母水解物和2
‑
10g/L的植物蛋白水解物；所述脂类组分包括含量范围在0.00001
‑
0.010g/L的亚油酸、0.01
‑
10g/L的胆固醇和0.00001
‑
0.010g/L的生育酚。
[0009]优选的，以所述昆虫细胞无血清、无动物源成分的基础培养基体积计，所述基础组分中包括如下含量范围的组分：
[0010]无机盐部分：0.2
‑
4.0g/L氯化钾、0.01
‑
1.0g/L氯化钙、0.5
‑
3.0g/L磷酸二氢钠、0.8
‑
4.0g/L氯化钠、0.2
‑
3.0g/L硫酸镁、0.5
‑
3.0g/L P188(泊洛沙姆188)；
[0011]氨基酸及糖类部分：0.5
‑
2g/L天冬酰胺、0.1
‑
0.6g/L蛋氨酸、0.1
‑
1.0g/L组氨酸、0.1
‑
2.0g/L天冬氨酸、0.1
‑
0.8g/L丝氨酸、0.5
‑
2.0g/L甘氨酸、1.0
‑
4.0g/L精氨酸、0.1
‑
0.5g/L异亮氨酸、0.2
‑
0.8g/L亮氨酸、1.0
‑
2.5g/L谷氨酸、1.2
‑
2.0g/L缬氨酸、0.3
‑
1.0g/L
赖氨酸、0.15
‑
0.5g/L苯丙氨酸、0.1
‑
0.2g/L脯氨酸、0.5
‑
1.0g/L苏氨酸、0.5
‑
0.8g/L谷氨酰胺、0.1
‑
1.0g/L酪氨酸、0.5
‑
0.8g/L丙氨酸、4
‑
10g/L葡萄糖、3
‑
8g/L蔗糖；
[0012]维生素部分：0.00001
‑
0.0001g/L维生素B6、0.00001
‑
0.00005g/L维生素B1、0.00001
‑
0.0005g/L生物素、0.00001
‑
0.0005g/L维生素B12、0.000001
‑
0.00001g/L泛酸、0.0001
‑
0.0010g/L叶酸、0.0001
‑
0.0050g/L烟酸、0.000001
‑
0.0002g/L核黄素、0.0001
‑
0.1g/L氯化胆碱、0.00001
‑
0.001g/L肌醇；
[0013]微量元素部分：0.0001
‑
0.01g/L氯化铜、0.00001
‑
0.001g/L氯化锌、0.0001
‑
0.01g/L硫酸亚铁、0.000001
‑
0.0001g/L钼酸铵、0.00001
‑
0.001g/L氯化钴、0.00001
‑
0.001g/L氯化锰；
[0014]有机酸部分：0.0001
‑
0.1g/L苹果酸、0.0001
‑
0.01g/L延胡索酸、0.0001
‑
0.1g/Lα
‑
酮戊二酸、0.0001
‑
0.01g/L琥珀酸。
[0015]作为进一步优选的技术方案，所述昆虫细胞无血清、无动物源成分的基础培养基包含如下含量范围的组分：
[0016]水解物组分：2
‑
6g/L酵母水解物、2
‑
6g/L植物蛋白水解物；
[0017]脂类组分：0.00003
‑
0.005g/L亚油酸、0.05
‑
8g/L胆固醇、0.00005
‑
0.005g/L生育酚。
[0018]基础组分中，
[0019]无机盐部分：0.3
‑
3.0g/L氯化钾、0.05
‑
0.8g/L氯化钙、0.8
‑
2.0g/L磷酸二氢钠、1.0
‑
3.0g/L氯化钠、0.5
‑
2.0g/L硫酸镁、1.0
‑
2.5g/L P188；
[0020]氨基酸及糖类部分：0.8
‑
1.5g/L天冬酰胺、0.2
‑
0.5g/L蛋氨酸、0.3
‑
0.8g/L组氨酸、0.5
‑
1.5g/L天冬氨酸、0.2
‑
0.6g/L丝氨酸、0.5
‑
1.5g/L甘氨酸、1.5
‑
3.0g/L精氨酸、0.3
‑
0.5g/L异亮氨酸、0.3
‑
0.6g/L亮氨酸、1.5
‑
2.0g/本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种昆虫细胞无血清、无动物源成分的基础培养基，其特征在于，包括基础组分、水解物组分和脂类组分，其中所述基础组分包括无机盐、氨基酸及糖类、维生素、微量元素和有机酸，所述水解物组分包括酵母水解物和植物蛋白水解物，所述脂类组分包括亚油酸、胆固醇和生育酚。2.如权利要求1所述的昆虫细胞无血清、无动物源成分的基础培养基，其特征在于，以所述昆虫细胞无血清、无动物源成分的基础培养基体积计，所述水解物组分包括含量范围在2
‑
8g/L的酵母水解物和2
‑
10g/L的植物蛋白水解物；所述脂类组分包括含量范围在0.00001
‑
0.010g/L的亚油酸、0.01
‑
10g/L的胆固醇和0.00001
‑
0.010g/L的生育酚。3.如权利要求2所述的昆虫细胞无血清、无动物源成分的基础培养基，其特征在于，以所述昆虫细胞无血清、无动物源成分的基础培养基体积计，所述基础组分中包括如下含量范围的组分：无机盐部分：0.2
‑
4.0g/L氯化钾、0.01
‑
1.0g/L氯化钙、0.5
‑
3.0g/L磷酸二氢钠、0.8
‑
4.0g/L氯化钠、0.2
‑
3.0g/L硫酸镁、0.5
‑
3.0g/L P188；氨基酸及糖类部分：0.5
‑
2g/L天冬酰胺、0.1
‑
0.6g/L蛋氨酸、0.1
‑
1.0g/L组氨酸、0.1
‑
2.0g/L天冬氨酸、0.1
‑
0.8g/L丝氨酸、0.5
‑
2.0g/L甘氨酸、1.0
‑
4.0g/L精氨酸、0.1
‑
0.5g/L异亮氨酸、0.2
‑
0.8g/L亮氨酸、1.0
‑
2.5g/L谷氨酸、1.2
‑
2.0g/L缬氨酸、0.3
‑
1.0g/L赖氨酸、0.15
‑
0.5g/L苯丙氨酸、0.1
‑
0.2g/L脯氨酸、0.5
‑
1.0g/L苏氨酸、0.5
‑
0.8g/L谷氨酰胺、0.1
‑
1.0g/L酪氨酸、0.5
‑
0.8g/L丙氨酸、4
‑
10g/L葡萄糖、3
‑
8g/L蔗糖；维生素部分：0.00001
‑
0.0001g/L维生素B6、0.00001
‑
0.00005g/L维生素B1、0.00001
‑
0.0005g/L生物素、0.00001
‑
0.0005g/L维生素B12、0.000001
‑
0.00001g/L泛酸、0.0001
‑
0.0010g/L叶酸、0.0001
‑
0.0050g/L烟酸、0.000001
‑
0.0002g/L核黄素、0.0001
‑
0.1g/L氯化胆碱、0.00001
‑
0.001g/L肌醇；微量元素部分：0.0001
‑
0.01g/L氯化铜、0.00001
‑
0.001g/L氯化锌、0.0001
‑
0.01g/L硫酸亚铁、0.000001
‑
0.0001g/L钼酸铵、0.00001
‑
0.001g/L氯化钴、0.00001
‑
0.001g/L氯化锰；有机酸部分：0.0001
‑
0.1g/L苹果酸、0.0001
‑
0.01g/L延胡索酸、0.0001
‑
0.1g/Lα
‑
酮戊二酸、0.0001
‑
0.01g/L琥珀酸。4.如权利要求1所述的昆虫细胞无血清、无动物源成分的基础培养基，其特征在于，包含如下含量范围的组分：水解物组分：2
‑
6g/L酵母水解物、2
‑
6g/L植物蛋白水解物；脂类组分：0.00003
‑...

【专利技术属性】
技术研发人员：王龙，冯慧慧，王猛，
申请(专利权)人：无锡多宁生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：