综合提取五味子中的五味子多糖、五味子总木脂素和五味子总皂苷的方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种综合提取五味子中的五味子多糖、五味子总木脂素和五味子总皂苷的方法及其应用，提取方法包括水提取、多糖的提取和纯化、闪式醇提、总木脂素的提取和纯化、总皂苷的提取和纯化。本发明专利技术通过往水提醇沉后的五味子粗多糖中加入硫酸铵溶液，可有效去除蛋白等大分子杂质，离心后的上清液用透析袋在去离子水中透析可去除小分子杂质，得到高纯度五味子多糖；通过将水提醇沉上清液和醇提液合并去醇后上大孔树脂，水洗后用低浓度乙醇洗脱，能有效去除非目标成分，使醇洗所得到的目标成分含量进一步提高，经过大孔树脂纯化后可得较高含量的木脂素和总皂苷的混合物，方便后续纯化；本发明专利技术的方法资源利用高，提取效率高，应用前景广阔。前景广阔。

【技术实现步骤摘要】
综合提取五味子中的五味子多糖、五味子总木脂素和五味子总皂苷的方法及其应用


[0001]本专利技术涉及植物有效成分的提取
，更具体地，涉及一种综合提取五味子中的五味子多糖、五味子总木脂素和五味子总皂苷的方法及其应用。

技术介绍

[0002]五味子为木兰科植物五味子的干燥成熟果实，有北五味子和南五味子之分；北五味子的主要产地为东北地区及内蒙古、河北、山西等地，南五味子在长江流域以南各省均有种植。
[0003]五味子果实的药理作用较广泛，具有抗肝损伤作用、中枢神经抑制作用、强心、增强机体免疫和抗菌等功效，其主要化学成分包含五味子总木脂素、多糖、皂苷类、维生素C和鞣质等。
[0004]现有技术中，五味子总木脂素的提取方法包括溶剂浸提法、回流提取法、超声提取法和超临界CO2萃取法；其中，溶剂浸提法和回流提取法是较传统的方法，虽然对设备的要求不高，但是存在提取时间长和费溶剂等缺点，超声提取法和超临界CO2萃取法作为新兴提取技术，可以加速有效成分的溶出，提取时间短，提取温度低，可以保护有效成分不被破坏，但是设备昂贵，不适用于大规模的工业生产。
[0005]公开号为CN107126460A的中国专利技术专利申请公开了一种五味子总木脂素的制备方法，将五味子粉碎后加入乙醇提取，浓缩，大孔树脂柱层析，分别采用不同浓度的乙醇水冲洗，浓缩，得到浸膏，将浸膏用甲醇溶解后与硅胶混合，搅拌均匀分散，干燥后加入装填有硅胶的层析柱中，用石油醚
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丙酮混合液冲洗，收集洗脱液，浓缩得总木脂素。
[0006]公开号为CN101757111A的中国专利技术专利申请公开了一种五味子总木脂素的制备方法，将五味子粉碎后醇提，提取液加活性炭搅拌脱色，脱色液硅胶压柱，以氯仿/甲醇混合液分段洗脱，洗脱液用丙酮结晶，干燥得产品。
[0007]公开号为CN108676176A的中国专利技术专利申请公开了一种南五味子木脂素类成分的制备方法，将南五味子采用乙醇提取，浓缩，得到浸膏依次采用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，先经大孔树脂除去大极性物质，再经硅胶柱层析，得木脂素类成分。
[0008]公开号为CN108083992A的中国专利技术专利申请公开了一种提取分离五味子醇甲和醇乙的简易方法，将原料采用浸出法得到五味子油，采用聚酰胺拌样，在经过聚酰胺色谱柱分离，得醇甲、醇乙单体化合物。
[0009]综上，关于五味子总木脂素的提取，使用最多的为乙醇提取，该方法简便易行，但提取液中成分复杂，后续的纯化工艺较为繁琐；此外，还有以丙酮、乙酸乙酯和二氯甲烷为溶剂的浸提方法，虽然能减少杂质提出，但是，这类溶剂的危害性大，不适合在工业生产中大量使用。
[0010]现有技术中，五味子多糖的提取大多以水作为溶剂进行提取，之后用不同的手段进行纯化以得到目标产物。
[0011]公开号为CN107163157A的中国专利技术专利申请公开了一种五味子酸性多糖及其制备方法和应用，其原料采用水提取，继而浓缩，醇沉，得总多糖，总多糖溶解后上DEAE
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纤维素柱，氯化钠洗脱得酸性多糖；该方法一般用于实验室，难以进行大规模的生产。
[0012]公开号为CN109651522A的中国专利技术专利申请公开了一种五味子多糖的制备方法，其原料加入无水乙醇脱脂，原料干燥后水提，水提液醇沉，得五味子粗多糖；该方法醇沉后没有进行后续的操作，所得产物没有较好的纯度。
[0013]公开号为CN102492050A的中国专利技术专利申请公开了五味子药渣中活性成分多糖的制备方法，具体公开了将药渣水提，醇沉，沉淀用水溶解，冻融，离心取清液，乙醇分级，离心得沉淀，沉淀用水溶解，用链蛋白酶酶解，Sevag法脱蛋白，冷冻干燥得多糖；该法所得多糖纯度高，但是容易造成有害溶剂残留。
[0014]现有技术中，五味子总皂苷的提取纯化方法，常规是用水或有机溶剂浸提，提取液用弱极性树脂来纯化，然后用水饱和正丁醇进一步精制得到纯度较高的总皂苷。
[0015]公开号为CN102028754A的中国专利技术专利申请公开了一种五味子总木脂素和总皂苷的快速制备方法，分别以中药五味子果实(果浆)、茎和果柄为原料，粉碎后加入甲醇或者高度乙醇在低温(室温)下进行多次闪式提取，提取物经大孔树脂层析和萃取等操作后得到50％含量以上总皂苷；但该法得到五味子总皂苷和总木脂素不能实现较好分离且没有较高收率。
[0016]迄今为止，尚未见到有关综合提取五味子中的五味子多糖、五味子总木脂素和五味子总皂苷的方法的相关报道。
[0017]鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0018]针对现有技术所存在的不足，本专利技术提供了一种综合提取五味子中的五味子多糖、五味子总木脂素和五味子总皂苷的方法及其应用。
[0019]为实现上述目的，本专利技术的技术方案如下：
[0020]一种综合提取五味子中的五味子多糖、五味子总木脂素和五味子总皂苷的方法，包括，
[0021]S1、水提取
[0022]将粉末状五味子原料加入水中，加热提取后固液分离，得到水提液，并将提取渣低温干燥备用；
[0023]S2、多糖的提取和纯化
[0024]将水提液浓缩到1.1
‑
1.2波美后再加入乙醇并控制其乙醇含量为70
‑
80v％，静置后过滤，得到含皂苷的第一滤液和含多糖的滤饼，将滤饼进行后处理得到五味子多糖；
[0025]S3、闪式醇提
[0026]采用闪式提取法将步骤S1中干燥后的提取渣用高浓度的乙醇水溶液进行提取并过滤，得到含总木脂素和总皂苷的醇提液；
[0027]S4、总木脂素的提取和纯化
[0028]将步骤S2中的第一滤液和步骤S3中的醇提液合并，依次经除杂处理、醇液洗脱和浓缩去醇后用石油醚萃取，将石油醚萃取物进行再处理得到五味子总木脂素；
[0029]S5、总皂苷的提取和纯化
[0030]将步骤S4中石油醚萃取后的水相剩余物进行提纯处理得到五味子总皂苷；
[0031]其中，步骤S2和步骤S3的顺序可互换。
[0032]在上述技术方案中，步骤S2中，加入的所述乙醇的浓度为92
‑
98v％，且加入乙醇的同时进行搅拌。
[0033]在上述技术方案中，步骤S2中，所述静置的时间为12
‑
20h，进一步优选为在3
‑
8℃下静置12
‑
15h。
[0034]进一步地，在上述技术方案中，步骤S2中，所述后处理包括，
[0035]用温度低于35℃的无水乙醇洗涤滤饼得到五味子粗多糖，随后用水复溶后离心去除不溶物，加入硫酸铵直至饱和，静置后离心去蛋白质，取上清液并透析得到多糖提取液，最后浓缩干燥，即得五味子多糖。
[0036]在本专利技术的具体实施方式中，步骤S2中，加入所述硫酸铵并离心去蛋白质的次数为3
‑
5次。
[0037]在本专利技术的具体实施方式中，步骤S2中，所本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种综合提取五味子中的五味子多糖、五味子总木脂素和五味子总皂苷的方法，其特征在于，包括，S1、水提取将粉末状五味子原料加入水中，加热提取后固液分离，得到水提液，并将提取渣低温干燥备用；S2、多糖的提取和纯化将水提液浓缩到1.1
‑
1.2波美后再加入乙醇并控制其乙醇含量为70
‑
80v％，静置后过滤，得到含皂苷的第一滤液和含多糖的滤饼，将滤饼进行后处理得到五味子多糖；S3、闪式醇提采用闪式提取法将步骤S1中干燥后的提取渣用高浓度的乙醇水溶液进行提取并过滤，得到含总木脂素和总皂苷的醇提液；S4、总木脂素的提取和纯化将步骤S2中的第一滤液和步骤S3中的醇提液合并，依次经除杂处理、醇液洗脱和浓缩去醇后用石油醚萃取，将石油醚萃取物进行再处理得到五味子总木脂素；S5、总皂苷的提取和纯化将步骤S4中石油醚萃取后的水相剩余物进行提纯处理得到五味子总皂苷；其中，步骤S2和步骤S3的顺序可互换。2.根据权利要求1所述的综合提取五味子中的五味子多糖、五味子总木脂素和五味子总皂苷的方法，其特征在于，步骤S2中，加入的所述乙醇的浓度为92
‑
98v％，且加入乙醇的同时进行搅拌；和/或，所述静置的时间为12
‑
20h，进一步优选为在3
‑
8℃下静置12
‑
15h。3.根据权利要求1或2所述的综合提取五味子中的五味子多糖、五味子总木脂素和五味子总皂苷的方法，其特征在于，步骤S2中，所述后处理包括，用温度低于35℃的无水乙醇洗涤滤饼得到五味子粗多糖，随后用水复溶后离心去除不溶物，加入硫酸铵直至饱和，静置后离心去蛋白质，取上清液并透析得到多糖提取液，最后浓缩干燥，即得五味子多糖。4.根据权利要求3所述的综合提取五味子中的五味子多糖、五味子总木脂素和五味子总皂苷的方法，其特征在于，步骤S2中，加入所述硫酸铵并离心去蛋白质的次数为3
‑
5次；和/或，所述透析具体为，将上清液用截留分子量为5000
‑
10000道尔顿的透析袋进行透析；和/或，所述透析的温度和时间分别为2
‑
10℃和48
‑
120h。5.根据权利要求1所述的综合提取五味子中的五味子多糖、五味子总木脂素和五味子总皂苷的方法，其特征在于，步骤S3中，
所述乙醇水溶液的浓度为75
‑
85v％，优选为78
‑
82v％；和/或，所述乙醇水溶液的加入量为控制其料液比为1g∶5
‑
50ml；和/或，所述提取的温度和时间分别为20
‑
50℃和5
‑
10min；和/或，所述提取的次数为2
‑
3次，并在提取和过滤后将其合并，得到醇提液。6.根据权利要求1所述的综合提取五味子中的五味子多糖、五味子总木脂素和五味子总皂苷的方法，其特征在于，步骤S1中，往水中加入的所述粉末状五味子原料的量为控制其料液比为1g∶5
‑
50ml；和/或，所述加热提取的温度和时间分别为80<...

【专利技术属性】
技术研发人员：张宝堂，范斌，谭家忠，王会文，
申请(专利权)人：湖南绿蔓生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：