一种超临界CO2流体萃取法提取紫杉醇的方法技术

本发明专利技术属于溶剂萃取技术领域，公开了一种超临界CO2流体萃取法提取紫杉醇的方法，将粉碎后的曼地亚红豆杉于超临界装置的萃取罐中；CO2和C2H2OH分别由CO2泵和夹带剂泵打入各泵的腔体中，经流体混合器混合后，流入萃取釜中的集流腔，进入萃取釜开始萃取；超临界CO2流体经分离釜Ⅰ和Ⅱ减压排放，流体带出的萃取物分别从分离釜Ⅰ和Ⅱ收集；将收集物真空浓缩，并于真空干燥后检测其中的紫杉醇含量。以甲醇为修饰剂和吸收液进行萃取时，在120min内可使紫杉醇萃取完全，萃取率达96.7％，萃取物中紫杉醇纯度可达到1％以上。与传统的乙醇三次提取方法相比，超临界流体萃取法流程简单，步骤少，耗时短，无废渣溶剂残留。无废渣溶剂残留。无废渣溶剂残留。

【技术实现步骤摘要】
一种超临界CO2流体萃取法提取紫杉醇的方法


[0001]本专利技术属于溶剂萃取
，尤其涉及一种超临界CO2流体萃取法提取紫杉醇的方法。

技术介绍

[0002]目前，业内常用的现有技术是这样的：1971年美国化学家Wani等从产于北美的短叶红豆杉(T.brevifolia)树皮中分离出高抗癌活性紫杉烷二萜化合物紫杉醇，发现紫杉醇具有独特的抗肿瘤作用。紫杉醇临床研究始于1982年，到1989年完成了I、II期的临床试验，1990年进行III期临床试验。1992年12月29日美国国家食品与药物管理局(FDA)正式批准其作为晚期卵巢癌、肺癌、子宫癌等抗癌药物上市。1995年紫杉醇作为新药在中国获得批准上市。
[0003]近年来，抗癌药物发展迅速，层出不穷。但是，抗癌第一大药仍是多年使用的老药
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紫杉醇。目前，紫杉醇在世界各国均为医院首选的抗肿瘤药物。
[0004]紫杉醇从红豆杉中提取是其主要的来源之一。从红豆杉中提取紫杉醇，其特点是与FDA批准上市的紫杉醇结构一致。
[0005]目前从红豆杉提取紫杉醇的方法，大多采用乙酸乙酯、二氯甲化烷、丙酮、氯仿等有机溶剂对红豆杉原料多次浸提，浸提液回收后再用有机溶剂萃取，分离等步骤得到含紫杉醇的浸膏。这种方法存在的突出问题是：
[0006]1.工艺路线长，溶剂用量大。造成提取效率低，生产成本高，存在较大环保问题。
[0007]2.在浸提、回收过程中受热时间长，容易引起紫杉醇结构发生变化。
[0008]3.废渣残留有机溶剂。对人员和环境造成不良影响。
[0009]综上所述，现有技术存在的问题是：
[0010](1)工艺路线长，溶剂用量大。造成提取效率低，生产成本高，存在较大环保问题。
[0011](2)在浸提、回收过程中受热时间长，容易引起紫杉醇结构发生变化。
[0012](3)废渣残留有机溶剂。对人员和环境造成不良影响。
[0013]解决上述技术问题的难度和意义：红豆杉中的紫杉醇因其含量低、结构类似物较多，加上又是一种大分子、热敏性物质。受温度、有机溶剂、酸、碱等环境条件的影响，提取过程中易降解或异构生成其它紫杉烷类物质。这些特性给提取、分离带来了较大的困难。研究发现紫杉醇主要源于红豆杉的根、树皮以及枝叶。紫杉醇是红豆杉中的主要活性成分，该活性成份的化学结构是一种四环二萜化合物。因此，如何探索、选择以低成本、更环保、避免长时间受热的生产工艺提取紫杉醇具有重要的现实意义。

技术实现思路

[0014]针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种超临界CO2流体萃取法提取紫杉醇的方法。
[0015]本专利技术是这样实现的，一种超临界CO2流体萃取法提取紫杉醇的方法，所述超临界
CO2流体萃取法提取紫杉醇的方法包括以下步骤：
[0016]将粉碎后的曼地亚红豆杉于超临界装置的萃取罐中；
[0017]CO2和C2H2OH分别由CO2泵和夹带剂泵打入各泵的腔体中，经流体混合器混合后，流入萃取釜中的集流腔，进入萃取釜开始萃取；
[0018]超临界CO2流体经分离釜Ⅰ和Ⅱ减压排放，流体带出的萃取物分别从分离釜Ⅰ和Ⅱ收集；
[0019]将收集物真空浓缩，并于真空干燥后检测其中的紫杉醇含量。
[0020]进一步，将粉碎后的曼地亚红豆杉称取6000g于超临界装置的萃取罐中。
[0021]进一步，CO2和C2H2OH分别由CO2泵和夹带剂泵打入各泵的腔体中，经流体混合器混合后，流入萃取釜中的集流腔，在达到30MPa，45℃后进入萃取釜开始萃取。
[0022]进一步，将收集物真空浓缩，并于45℃真空干燥2h后检测其中的紫杉醇含量。
[0023]进一步，所述超临界CO2流体萃取法提取紫杉醇的方法还包括：原料的分析方法：
[0024](1)色谱条件：C
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色谱柱；流动相：乙腈一水55：45；流速：lml/min；柱温：室温；检测波长：227nm；进样量：10μl；
[0025](2)对照品溶液的制备：精密称取经五氧化磷干燥器内干燥24小时后的紫杉醇对照品1.0mg，置于10ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，作为对照品溶液，浓度为0.1mg/ml；
[0026](3)供试品溶液的制备：分别取CO2超临界萃取浸膏，加二氯甲烷一水30：1545ml，萃取3次，合并二氯甲烷液，蒸干，残渣溶解转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，过0.45μm微孔滤膜，注入液相色谱仪测定；
[0027](4)曼地亚红豆杉枝叶中紫杉醇的含量测定：取曼地亚红豆杉枝条12.5g，精密称定，分别加甲醇50ml超声提取2次，过滤，合并滤液，蒸干，残渣加二氯甲烷～水＝2：145ml萃取3次，合并二氯甲烷液，蒸干，残渣转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，过0.45μm，注入液相色谱仪测定，重复测定3次。
[0028]进一步，所述超临界CO2流体萃取法提取紫杉醇的方法的萃取釜压力30MPa，萃取釜温度45℃，萃取时间180min，CO2的体积流量为284L/h，夹带剂为C2H2OH，浓度：95％，用量；20％的乙醇溶液；分离釜Ⅰ压力为6.5MPa、温度为30℃，分离釜Ⅱ压力为5.5MPa、温度为30℃。
[0029]进一步，所述超临界CO2流体萃取法提取紫杉醇的方法的萃取物的分析方法包括：
[0030]取系统适用性试验溶液10μl注入液相色谱仪，紫杉醇峰与杂质I峰及杂质II峰的分离度均应大于1.0；
[0031]精密量取供试品溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；同法测定对照品溶液；
[0032]按外标法，以峰面积计算，即得。
[0033]综上所述，本专利技术的优点及积极效果为：本专利技术利用超临界CO2流体萃取法从红豆杉枝叶中提取分离紫杉醇，用反相高效液相色谱法(HPLC)测定萃取物中的紫杉醇含量，并用液质联用(LC/MS/MS)进行产物鉴定.结果表明，粒径为0.25～0.45mm的红豆杉枝叶在27.6MPa，31℃下，以甲醇为修饰剂和吸收液进行萃取时，在120min内可使紫杉醇萃取完全，萃取率达96.7％，萃取物中紫杉醇纯度可达到1％以上。与传统的乙醇三次提取方法相比，超临界流体萃取法流程简单，步骤少，耗时短，无废渣溶剂残留，是一种环境友好的提取方
法。
[0034]本专利技术主要以法规允许采伐、人工种植的曼地亚红豆杉为原料；以无毒、无害、价廉的CO2为萃取剂；以药用C2H2OH为夹带剂；以具有一定规模的超临界萃取装置提取紫杉醇，并对实现工业化生产具有重要的现实意义。有效解决了提取效率低，生产成本高，避免长时间受热，对环境影响的问题。
附图说明
[0035]图1是本专利技术实施例提供的超临界CO2流体萃取法提取紫杉醇的方法流程图。
[0036]图2是本专利技术实施提供的SFE法色谱图(al—a4)～ql传统有机萃取法色谱图b图。
[0037]图3是本专利技术实施提供的Ta本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种超临界CO2流体萃取法提取紫杉醇的方法，其特征在于，所述超临界CO2流体萃取法提取紫杉醇的方法包括以下步骤：将粉碎后的曼地亚红豆杉于超临界装置的萃取罐中；CO2和C2H2OH分别由CO2泵和夹带剂泵打入各泵的腔体中，经流体混合器混合后，流入萃取釜中的集流腔，进入萃取釜开始萃取；超临界CO2流体经分离釜Ⅰ和Ⅱ减压排放，流体带出的萃取物分别从分离釜Ⅰ和Ⅱ收集；将收集物真空浓缩，并于真空干燥后检测其中的紫杉醇含量。2.如权利要求1所述的超临界CO2流体萃取法提取紫杉醇的方法，其特征在于，将粉碎后的曼地亚红豆杉称取6000g于超临界装置的萃取罐中。3.如权利要求1所述的超临界CO2流体萃取法提取紫杉醇的方法，其特征在于，CO2和C2H2OH分别由CO2泵和夹带剂泵打入各泵的腔体中，经流体混合器混合后，流入萃取釜中的集流腔，在达到30MPa，45℃后进入萃取釜开始萃取。4.如权利要求1所述的超临界CO2流体萃取法提取紫杉醇的方法，其特征在于，将收集物真空浓缩，并于45℃真空干燥2h后检测其中的紫杉醇含量。5.如权利要求1所述的超临界CO2流体萃取法提取紫杉醇的方法，其特征在于，所述超临界CO2流体萃取法提取紫杉醇的方法还包括：原料的分析方法：(1)色谱条件：C
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色谱柱；流动相：乙腈一水55：45；流速：lml/min；柱温：室温；检测波长：227nm；进样量：10μl；(2)对照品溶液的制备：精密称取经五氧化磷干燥器内干燥24小时后的紫杉醇对照品1.0...

【专利技术属性】
技术研发人员：王强，
申请(专利权)人：王强，
类型：发明
国别省市：