用于产生抗TNF抗体组合物的方法技术

本文提供了用于产生具有包含SEQ ID NO：38的重链(HC)和包含SEQ ID NO：37的轻链(LC)的重组抗TNF抗体的方法以及包含重组抗TNF抗体的组合物。体的组合物。体的组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于产生抗TNF抗体组合物的方法
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[0003]本专利技术涉及用于产生具有包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的重链(HC)和包含氨基酸序列SEQ ID NO：37的轻链(LC)的重组抗TNF抗体的方法以及包含重组抗TNF抗体的组合物。

技术介绍

[0004]TNFα是17kD蛋白质亚基的可溶性同源三聚体。还存在膜结合的26kD前体形式的TNF。
[0005]除单核细胞或巨噬细胞以外的细胞也产生TNFα。例如，人非单核细胞肿瘤细胞系产生TNFα以及CD4+和CD8+外周血T淋巴细胞，并且一些培养的T细胞系和B细胞系也产生TNFα。
[0006]TNFα引起促炎作用，该促炎作用导致组织损伤诸如软骨和骨的降解，粘附分子的诱导，诱导血管内皮细胞上的促凝活性，增加中性粒细胞和淋巴细胞的粘附，以及刺激巨噬细胞、中性粒细胞和血管内皮细胞释放血小板活化因子。
[0007]TNFα一直以来与感染、免疫障碍、肿瘤病理学、自身免疫病理学和移植物抗宿主病理学相关联。TNFα与癌症和感染性病理学的关联通常与宿主的分解代谢状态有关。癌症患者体重减轻，通常与厌食症有关联。
[0008]与癌症和其他疾病相关联的明显消瘦被称为
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恶病质
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。恶病质包括渐进性体重减轻、厌食和恶性生长引起的瘦体重持续侵蚀。恶病质状态导致很多癌症发病率和死亡率。有证据表明TNFα与癌症、感染性病理学和其他分解代谢状态中的恶病质有关。
[0009]据信，TNFα在革兰氏阴性脓毒症和内毒素休克(包括发烧、不适、厌食和恶病质)中起着重要作用。内毒素强烈激活单核细胞/巨噬细胞的产生以及TNFα和其他细胞因子的分泌。TNFα和其他单核细胞衍生的细胞因子介导对内毒素的代谢和神经激素反应。向人类志愿者施用内毒素会产生急性疾病，伴有类似流感的症状，包括发烧、心动过速、代谢率增加和应激激素释放。革兰氏阴性脓毒症患者的循环TNFα增加。
[0010]因此，TNFα涉及炎性疾病、自身免疫疾病、病毒、细菌和寄生虫感染、恶性肿瘤和/或神经退行性疾病，并且是用于疾病诸如类风湿性关节炎和克罗恩氏病的特定生物治疗的有用靶点。已经报道了使用针对TNFα的单克隆抗体的开放标签试验中的有益效果为抑制炎症，并且在类风湿性关节炎和克罗恩氏病复发后成功再治疗。还报道了在随机化、双盲、安慰剂对照试验中在类风湿性关节炎中具有抑制炎症的有益效果。
[0011]已在除人类以外的哺乳动物中显示出中和TNF的抗血清或mAb可消除不利的生理变化，并防止实验性内毒素血症和菌血症的致死剂量攻击后的死亡。这种效应已经在例如啮齿动物致死率测定和灵长类动物病理学模型系统中得到证实。
[0012]已公开了hTNF的推定受体结合基因座，并且已公开了由TNF的氨基酸11
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13、37
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42、49
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57和155
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157组成的TNFα的受体结合基因座。
[0013]非人类哺乳动物、嵌合抗体、多克隆抗体(例如，抗血清)和/或单克隆抗体(Mab)以及片段(例如，蛋白水解消化或其融合蛋白质产物)是在一些情况下正在研究以尝试治疗某些疾病的潜在治疗剂。然而，当施用给人类时，此类抗体或片段可引发免疫应答。此类免疫应答可导致免疫复合物介导的抗体或片段从循环中清除，并使重复施用不适于治疗，从而降低对患者的治疗有益效果并限制抗体或片段的施用。例如，重复施用包含非人部分的抗体或片段可导致血清病和/或过敏反应。为了避免这些和其他问题，已采取了多种方法来降低此类抗体及其部分的免疫原性，包括本领域所熟知的嵌合和人源化。然而，这些和其他方法仍可导致抗体或片段具有一些免疫原性、低亲和力、低亲合力，或者在细胞培养、放大、生产和/或低产量方面存在问题。因此，此类抗体或片段可能不太适合制备或用作治疗性蛋白质。
[0014]因此，需要提供用作治疗由TNFα介导的疾病的治疗剂的抗TNF抗体或其片段。

技术实现思路

[0015]本专利技术的实施方案分别由本文所附的独立权利要求和从属权利要求限定，为了简洁起见，这些权利要求以引用方式并入本文。根据下面结合附图的详细描述，本专利技术的各个方面的其他实施方案、特征和优点是显而易见的。
[0016]在某些实施方案中，本专利技术提供了抗TNF抗体，该抗TNF抗体包含：(i)包含SEQ ID NO：38的氨基酸序列的重链；和(ii)包含SEQ ID NO：37的氨基酸序列的轻链，其中该抗TNF抗体在中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)中表达。
[0017]在某些实施方案中，本专利技术提供了抗TNF抗体，该抗TNF抗体包含：(i)包含SEQ ID NO：38的氨基酸序列的重链；和(ii)包含SEQ ID NO：37的氨基酸序列的轻链，其中该抗TNF抗体在中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)中表达，并且其中该抗TNF抗体的低聚糖谱包含＞99.0％的总中性低聚糖种类和＞1.0％的总带电低聚糖种类。
[0018]在某些实施方案中，本专利技术提供了抗TNF抗体，该抗TNF抗体包含：(i)包含SEQ ID NO：38的氨基酸序列的重链；和(ii)包含SEQ ID NO：37的氨基酸序列的轻链，其中该抗TNF抗体在中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)中表达，并且其中该抗TNF抗体的低聚糖谱还包含＞60.0％的单个的中性低聚糖物质G0F、＜20.0％的G1F和＜5.0％的G2F。
[0019]在某些实施方案中，本专利技术提供了抗TNF抗体，该抗TNF抗体包含：(i)包含SEQ ID NO：38的氨基酸序列的重链；和(ii)包含SEQ ID NO：37的氨基酸序列的轻链，其中该抗TNF抗体在中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)中表达，并且其中该抗TNF抗体不具有二唾液酸化聚糖种类，如通过高效液相色谱法(HPLC)或减少质量分析(RMA)所确定。
[0020]在某些实施方案中，本专利技术提供了抗TNF抗体，该抗TNF抗体包含：(i)包含SEQ ID NO：38的氨基酸序列的重链；和(ii)包含SEQ ID NO：37的氨基酸序列的轻链，其中该抗TNF抗体在中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)中表达，并且其中与在Sp2/0细胞中表达的抗TNF抗体
相比，该抗TNF抗体具有更长的半衰期或增加的抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)。
[0021]在某些实施方案中，本专利技术提供了抗TNF抗体，该抗TNF抗体包含：(i)包含SEQ ID NO：38的氨基酸序列的重链；和(ii)包含S本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.抗TNF抗体，所述抗TNF抗体包含：(i)包含SEQ ID NO：38的氨基酸序列的重链；和(ii)包含SEQ ID NO：37的氨基酸序列的轻链，其中所述抗TNF抗体在中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)中表达。2.根据权利要求1所述的抗TNF抗体，其中所述抗TNF抗体的低聚糖谱包含＞99.0％的总中性低聚糖种类和＜1.0％的总带电低聚糖种类。3.根据权利要求1所述的抗TNF抗体，其中所述抗TNF抗体的低聚糖谱还包含＞60.0％的单个中性低聚糖种类G0F、＜20.0％的G1F和＜5.0％的G2F。4.根据权利要求1所述的抗TNF抗体，其中所述抗TNF抗体不具有二唾液酸化聚糖种类，如通过高效液相色谱(HPLC)或减少质量分析(RMA)所确定。5.根据权利要求1至4中任一项所述的抗TNF抗体，其中与在Sp2/0细胞中表达的抗TNF抗体相比，所述抗TNF抗体具有更长的半衰期或增加的抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)。6.根据权利要求5所述的抗TNF抗体，其中所述抗TNF抗体是后续生物制剂。7.根据权利要求5所述的重组抗TNF抗体，其中所述抗TNF抗体抑制TNF阿尔法(TNFα)的活性。8.一种药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求5所述的重组抗TNF抗体。9.一种用于产生抗TNF抗体的制造方法，所述抗TNF抗体包含：(i)包含SEQ ID NO：38的氨基酸序列的重链；和(ii)包含SEQ ID NO：37的氨基酸序列的轻链，其中所述抗TNF抗体通过包括如下步骤的制造方法产生：a.培养具有编码所述抗TNF抗体的核苷酸的中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)；b.在所述CHO细胞中表达所述抗TNF抗体；以及，c.纯化所述抗TNF抗体。10.根据权利要求7所述的制造方法，其中所述抗TNF抗体的低聚糖谱包含＞99.0％...

【专利技术属性】
技术研发人员：K，
申请(专利权)人：詹森生物科技公司，
类型：发明
国别省市：