一种基因突变引物及其设计方法和设计突变质粒的方法技术

本发明专利技术提供了一种基因突变引物及其设计方法和设计突变质粒的方法，涉及基因定点突变技术领域。本发明专利技术改变了基因突变引物的设计思路，尤其是改变了下游引物设计思路，下游引物不包含要突变的序列，位于要突变的序列的上游。本发明专利技术设计的下游引物可大大降低下游引物长度，提高扩增效率和转化效率。基于本发明专利技术所述基因突变引物可方便快捷地设计突变质粒。述基因突变引物可方便快捷地设计突变质粒。述基因突变引物可方便快捷地设计突变质粒。

【技术实现步骤摘要】
一种基因突变引物及其设计方法和设计突变质粒的方法


[0001]本专利技术属于基因定点突变
，具体涉及一种基因突变引物及其设计方法和设计突变质粒的方法。

技术介绍

[0002]基因的定点突变是生物学实验中常用的一种载体、基因改造和优化的方法，是通过聚合酶链式反应(PCR)等方法对目的基因进行碱基单点多点突变、缺失、插入、替换等。体外定点突变技术是研究蛋白质结构和功能之间关系的有力工具。蛋白质的结构决定其功能，对某个已知基因的特定碱基进行定点突变、缺失、插入、替换，可以改变对应氨基酸的序列和蛋白的结构和功能，改变酶的活性或者动力学特征。
[0003]根据不同的目的设计相应的引物，引入要突变的碱基，经过PCR后将产物用DpnI或者其它甲基化模板消化酶消化处理，由于原模板质粒来源于大肠杆菌，是经dam甲基化修饰的，会被切碎(DpnI识别甲基化的GATC，从而将模板质粒消化掉)。而体外扩增的PCR产物由于没有甲基化而不被切开，在随后的转化中得以成功转化，得到突变质粒的克隆。
[0004]现有的基因定点突变、插入、替换上下游引物都包含本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基因突变引物的设计方法，其特征在于，包括以下步骤：下游引物依据突变的序列上游设计。2.根据权利要求1所述设计方法，其特征在于，所述基因突变包括点突变、缺失、插入或替换。3.根据权利要求1所述设计方法，其特征在于，所述下游引物的3
’
末端不超过上游引物的5
’
末端，整个下游引物包含在互补区之内。4.根据权利要求1所述设计方法，其特征在于，所述下游引物的3
’
末端超过上游的5
’
末端，但不包含基因突变的序列。5.利用权利要求1～4任一项所述设计方法设计得到的基因突变引物。6.权利要求5所述基因突变引物在设计突变质粒中的应用。7.一种获得突变质粒的方法，其特征在于，包括以下步骤：根...

【专利技术属性】
技术研发人员：闫亚平，郝文斌，刘龙月，李科，
申请(专利权)人：陕西脉元生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：