【技术实现步骤摘要】
一种直接用于聚合酶链式扩增反应的细胞裂解液
[0001]本专利技术涉及生物
,具体是一种直接用于聚合酶链式扩增反应的细胞裂解液。
技术介绍
[0002]DNA作为生物体重要的遗传信息物质,其检测和分析已广泛应用于各个领域,尤以应用最为广泛的聚合酶链式扩增反应(PCR)在临床疾病诊断、食品安全、环境治理、动物疫病,特别是在法庭鉴定中已经成为一种不可或缺的技术手段。
[0003]刑事侦查领域的生物样品具有其特殊性,现场采集到的样品经常是微量、甚至是痕量。虽然理论上一个DNA模板就可完成PCR反应,但实际工作中需要一定量的DNA模板数和良好的质量才可完成PCR过程。特别是法庭鉴定过程中经常使用STR分型技术,受DNA模板数和质量的影响较大,如果模板量不足会造成基因座丢失或峰值过低而无法保证鉴定的准确性。目前,PCR进行之前需要对生物样品中的DNA进行提取纯化处理,主要方法包括Chelex
‑
100法、有机法(饱和酚法)、二氧化硅法(硅珠法、磁珠法)、盐析法等,虽然各有优势,但对于微量甚至痕量生物样品 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种直接用于聚合酶链式扩增反应的细胞裂解液,其特征在于,包括如下步骤:首先制备低共熔溶剂,然后将微量生物检材加入到低共熔溶剂中,在50℃
‑
60℃温度中孵育,并且震荡10
‑
20分钟后,取微量低共熔溶剂直接加入PCR扩增体系中,低共熔溶剂的量不超过扩增总体积的30%,检材与离子液体的质量比为1:99
‑
1:50。2.根据权利要求1所述的一种直接用于聚合酶链式扩增反应的细胞裂解液,其特征在于,所述低共熔溶剂由咪唑和烷基化羧酸以及水组成,该低共熔溶剂中的咪唑以带正电荷的状态存在,而烷基化羧酸具有溶解细胞膜脂质的特性,释放出的DNA可以特异性地与咪唑结合,将该混合物加入PCR体系后,由于PCR的反应缓冲液pH值通常为8
‑
9,在该体系中咪唑发生去质子化,导...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘亚楠,孟宪江,张静,施嘉骏,
申请(专利权)人:天津诺维莱博科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。