一株具有减轻致癌物对人体细胞基因毒性作用的长双歧杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术涉及功能微生物筛选与应用技术领域，具体提供一株新型长双歧杆菌（Bifidobacterium longum）VHProbi Y08及其应用。所述长双歧杆菌VHProbi Y08筛选自婴幼儿新鲜粪便，保藏号为CCTCC NO：M2019780。该菌株具备在人体细胞中减轻致癌物的基因毒性作用，具有有效的肿瘤预防机制，在防治癌症方面具备一定的价值。一定的价值。

【技术实现步骤摘要】
一株具有减轻致癌物对人体细胞基因毒性作用的长双歧杆菌及其应用


[0001]本专利技术涉及功能微生物筛选与应用
，具体涉及一种长双歧杆菌，特别是一株具有减轻致癌物对人体细胞基因毒性作用的长双歧杆菌及其应用。

技术介绍

[0002]双歧杆菌是婴儿肠道微生物群中最丰富的成员，在大肠中含量最高，口腔中也有发现。双歧杆菌可通过垂直传播从母亲那里获得，它们在婴儿肠道中持续存在与它们对婴儿肠道中聚糖的持续糖酵解有关。像是青春双歧杆菌和链状双歧杆菌它们在成人体内较为常见，而两歧双歧杆菌、短双歧杆菌和长双歧杆菌则在母乳喂养的婴儿肠道中较为常见。
[0003]癌症是世界范围内的重大公共健康问题，已经成为当今世界人类健康的最大威胁之一。肿瘤的发生发展是一个十分复杂的医学和生物学问题，受到多种因素的作用。除了遗传因素外，环境因素对肿瘤的发生发展起到了重要的影响作用。流行病学研究认为，绝大多数肿瘤与环境因素相关，外界环境的刺激会导致染色体不稳定，致使宿主具有肿瘤发生易感性。而在所有的环境因素中化学因素引起的恶性肿瘤比例大于90%，远高于物理和生物等其它致癌因素。
[0004]基因毒性是指能直接或间接造成人体细胞DNA损伤的性质。具有基因毒性的物质可以引起遗传物质突变。自然界中存在多种基因毒性物质，如致癌芳香烃、苯并芘、致癌芳香胺、亚硝酸化合物和黄曲霉毒素等。这些物质广泛存在于自然环境中，如果人体长期暴露在具有基因毒性物质的环境中，则会增加患癌的风险。
[0005]基因毒性物质的致癌能力可以通过体内动物实验进行评价，这种方法可以直接可靠的表征基因毒性水平，但是耗时长、费用高、不能适应大量筛选的需要。本专利技术采用了人体活细胞和益生菌共培养的方式来直接鉴定益生菌或其代谢产物在减轻致癌物对人体细胞基因毒性方面的作用效果。微生物可以通过直接吸附或者将基因毒性物质代谢为无毒性的物质，或者增强人体细胞本身的脱毒性能力，实现对致癌物和其它对细胞基因有毒害物质的预防作用。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是提供一株新型长双歧杆菌（Bifidobacterium longum）及其应用。所述长双歧杆菌筛选自婴幼儿粪便，能够有效降低致癌物对人体细胞的基因毒性作用，显示出了肿瘤预防功能，在防治癌症方面具备一定的应用价值。
[0007]本专利技术一方面涉及一株长双歧杆菌VHProbi Y08（Bifidobacterium longum VHProbi Y08），已于 2019 年 10月 8 日保藏于中国武汉大学的中国典型培养物保藏中心，其保藏号为CCTCC NO：M2019780。
[0008]本专利技术一方面涉及所述长双歧杆菌在降解胆固醇中的应用。
[0009]本专利技术一方面涉及所述长双歧杆菌在预防癌症中的应用。
[0010]本专利技术还涉及一种益生菌制剂，包含上述长双歧杆菌。
[0011]所述益生菌制剂还包含芽孢杆菌、双歧杆菌、乳杆菌、链球菌、乳球菌、明串球菌、丙酸杆菌、酵母菌、片球菌、葡萄球菌中的任意一种或两种或多种的组合。
[0012]所述芽孢杆菌优选凝结芽孢杆菌。
[0013]所述双歧杆菌优选青春双歧杆菌、短双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、动物双歧杆菌、两歧双歧杆菌。
[0014]所述乳杆菌优选嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、副干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、发酵乳杆菌、保加利亚乳杆菌。
[0015]所述链球菌优选嗜热链球菌。
[0016]所述乳球菌优选乳酸乳球菌乳酸亚种、乳酸乳球菌乳脂亚种、乳酸乳球菌双乙酰亚种。
[0017]所述丙酸杆菌优选费氏丙酸杆菌谢氏亚种、产丙酸丙酸杆菌。
[0018]所述明串球菌优选肠膜明串珠菌肠膜亚种。
[0019]所述酵母菌优选马克斯克鲁维酵母。
[0020]所述片球菌优选乳酸片球菌、戊糖片球菌。
[0021]所述葡萄球菌优选小牛葡萄球菌、木糖葡萄球菌、肉葡萄球菌。
[0022]所述益生菌制剂中上述长双歧杆菌的活菌量至少为108CFU/g。
[0023]本专利技术还涉及上述益生菌制剂在降解胆固醇中的应用。
[0024]本专利技术还涉及上述益生菌制剂在预防癌症中的应用。
[0025]本专利技术提供的长双歧杆菌VHProbi Y08对人工胃液和人工肠液具有很强的耐受性，对红霉素等常见抗生素敏感，生物安全性良好。该菌株抗氧化性能强，对DPPH自由基和HRS自由基的清除率分别达到23.8%和74.5%，其上清液抗脂质过氧化抑制率为41.99%，菌体抗脂质过氧化抑制率为43.17%。该菌株还能有效降解胆固醇，降解率达到20%。
[0026]长双歧杆菌VHProbi Y08的细胞黏附指数较高，对小肠上皮细胞的粘附力较强，在肠道中更容易定植并存活下来。该菌株可选择性利用菊糖、FOS、GOS这三种不同类型的益生元，代谢产生不同分子量的蛋白质。这些蛋白质或可在肠道内发挥抵抗病原体，调节免疫、增加矿物质吸收，改善肠道功能，影响代谢和饱腹感等功能，具有重要的潜在益生作用。
[0027]长双歧杆菌VHProbi Y08能有效减轻4NQO、IQ等致癌物对人体细胞的基因毒性作用，具有有效的肿瘤预防机制，在预防基因毒性物质引发的癌症方面具备一定的价值。其中，当HT-29细胞单独存在时，受4NQO基因毒性作用，其活性保留率仅为25.1%；而长双歧杆菌VHProbi Y08存在时，HT-29细胞受4NQO基因毒性作用减弱，HT-29细胞的活性保留率达到49.7%；当NCI-H460细胞单独存在时，受4NQO基因毒性作用，其活性保留率仅为49.0%；而在长双歧杆菌VHProbi Y08存在时，NCI-H460细胞受4NQO基因毒性作用减弱，其活性保留率达到88.7%，均得到显著提高。此外，经SOS反应检测后，长双歧杆菌VHProbi Y08 对IQ的平均清除率达到了94%以上，能够显著减轻IQ的基因毒性作用。
[0028]本专利技术提供的长双歧杆菌VHProbi Y08作为一株天然来源的益生菌株，对机体本身无毒性，并可大幅度减少致癌物的基因毒性作用，具有重要的应用价值。
[0029]附图说明
[0030]图1为Riboprinter 指纹图谱；图2为RAPD指纹图谱；图3为rep-PCR指纹图谱；图4为长双歧杆菌VHProbi Y08在分别添加有3种益生元和葡萄糖培养基中的生长速率；图5为长双歧杆菌VHProbi Y08在分别添加有3种益生元和葡萄糖培养基中的代谢产物的MALDI-TOF质谱图；图6为长双歧杆菌VHProbi Y08细胞黏附图。
具体实施方式
[0031]本专利技术所述筛选方法并不局限于实施例所述，已知的能够达到筛选目的的方法均可以，实施例的筛选说明只是对本专利技术的说明，并不是对本专利技术保护范围的限制。在不背离本专利技术精神和实质的情况下，对本专利技术方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本专利技术的范围。
[0032]下面结合具体实施例，对本专利技术做进一步阐述本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种长双歧杆菌，其特征在于，所述长双歧杆菌的保藏号为CCTCC NO：M2019780。2.权利要求1所述的长双歧杆菌在降解胆固醇中的应用。3.权利要求1所述的长双歧杆菌在预防癌症中的应用。4.一种益生菌制剂，包含权利要求1所述的长双歧杆菌。5.如权利要求4所述的益生菌制剂，其特征在于，所述的益生菌制剂还包含凝结芽孢杆菌、双歧杆菌、乳杆菌、链球菌、乳球菌、明串球菌、丙酸杆菌、酵母菌、片球菌、葡萄球菌中的任意一种或两种或多种的组合。6.如权利要求5所述的益生菌制剂，其特征在于，所述的双歧杆菌为青春双歧杆菌、短双...

【专利技术属性】
技术研发人员：段治，崔洪昌，张景燕，郭超群，张陆霞，
申请(专利权)人：青岛蔚蓝生物集团有限公司，
类型：发明
国别省市：