一种黄梁木四倍体诱导方法技术

本发明专利技术公开了一种黄梁木四倍体诱导方法，包括如下步骤：S1.下胚轴外植体预培养；S2.四倍体诱导培养：将经预培养后的下胚轴外植体接种到含秋水仙素的愈伤诱导液体培养基中进行暗培养；S3.组培幼苗：将步骤S2中经暗培养后的下胚轴外植体进行愈伤组织诱导后，转移至促芽培养基，诱导形成不定芽，切取不定芽接种于第一生根培养基进行生根诱导得到黄梁木再生植株。本发明专利技术以无菌黄梁木种子苗下胚轴作为外植体材料，通过先对下胚轴外植体进行预培养，再用含秋水仙素的愈伤诱导液体培养基处理外植体，再进行外植体进行愈伤诱导、促芽和生根培养等步骤，建立了黄梁木四倍体诱导体系，得到的黄梁木四倍体诱导率高，具有显著的优势。具有显著的优势。具有显著的优势。

【技术实现步骤摘要】
一种黄梁木四倍体诱导方法


[0001]本专利技术涉及生物
，具体地，涉及一种黄梁木四倍体诱导方法。

技术介绍

[0002]黄梁木(Neolamarckia cadamba)别名团花，隶属茜草科(Rubiaceae)团花属(Neolamarckia)。黄梁木富含类固醇、生物碱、皂苷、β～谷甾醇、类黄酮、卡丹宾、金鸡宁及其衍生物质等多种活性成分，具有潜在的医学价值(抗炎、抗疟疾寄生虫、治疗糖尿病、降低血糖和血脂等)；同时，黄梁木树叶富含粗蛋白、粗脂肪、粗纤维和微量元素，是一种优质的植物饲料原料。黄梁木自然分布于南亚、东南亚热带地区和我国南亚热带。从黄梁木的分布特性可以看出黄梁木喜高温高湿，只能种植于气候温暖，雨量充足，湿度大的地区，对低温的耐受性差。
[0003]多倍体育种是一种常见的育种手段。多倍体植物是指体内含有3套或3套以上染色体组的植物，一般来源分为两种，即自然产生和人工诱导。植株染色体经诱导加倍后，由于基因的互作效应和基因的剂量效应，植株细胞生理平衡被打破，与二倍体相比较，多倍体会表现出“巨大性”，根、茎、叶等营养器官的生物本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种黄梁木四倍体诱导方法，其特征在于，包括如下步骤：S1.下胚轴外植体预培养：切取无菌黄梁木种子苗下胚轴作为外植体，接种在第一愈伤诱导固体培养基上进行预培养；S2.四倍体诱导培养：将经预培养后的下胚轴外植体接种到含秋水仙素的愈伤诱导液体培养基中进行暗培养，所述秋水仙素浓度为100mg/L时，暗培养时间为2～4d，所述秋水仙素浓度大于100mg/L且小于等于400mg/L时，暗培养时间为1～4d；S3.组培幼苗：将步骤S2中经暗培养后的下胚轴外植体接种于第二愈伤诱导固体培养基中进行愈伤组织诱导后，转移至促芽培养基，诱导形成不定芽，待不定芽长至2cm后，切取不定芽接种于第一生根培养基进行生根诱导得到黄梁木再生植株。2.根据权利要求1所述的诱导方法，其特征在于，步骤S2中，所述秋水仙素浓度为200mg/L、300mg/L、400mg/L，暗培养时间为1～4d。3.根据权利要求2所述的诱导方法，其特征在于，步骤S2中，所述秋水仙素浓度为300mg/L，所述暗培养时间为3d。4.根据权利要求1所述的诱导方法，其特征在于，步骤S1中所述预培养时间为3d；步骤S3中所述培养时间为35d；步骤S2中，所述暗培养条件为：在摇床上恒温26℃以转速90～150rpm进行培养。5.根据权利要求1所述的诱导方法，其特征在于，所述第一愈伤诱导固体培养基和第二愈伤固体诱导培养基均为：MS培养基+3.0mg/L TDZ+0.1mg/L 2,4
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D+0.05mg/L NAA+30g/L蔗糖+5.0g/L琼脂，pH为5.8～6.0；所述愈伤诱导液体培养基为：MS+3.0mg/L TDZ+0.1mg/L 2,4
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D+0.05mg/L NAA+30g/L蔗糖，pH为5.8～6.0；所述促芽培养基为：MS培养基+1.5mg/L 6
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BA+0.05mg/L NAA+30g/L蔗糖+5.0g/L琼脂，pH为5.8～6.0；所述第一生根培养基为MS+0.1mg/L NAA+30g/L蔗糖+5.0g/L琼脂，pH 5.8～6.0。6.根据权利要求1
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5任一项所述的诱导方法，其特征在于，还包括如下步骤：S4.倍性鉴定：待步骤S3中...

【专利技术属性】
技术研发人员：周玮，张石虎，陈晓阳，欧阳昆唏，阙青敏，古敏，李春梅，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：