毛螺菌科细菌ND2006CAS12A突变型基因和由其编码的多肽制造技术

本发明专利技术涉及用于CRISPR/Cas12a核酸内切酶系统的突变型毛螺菌科(Lachnospiraceae)细菌ND2006(Lb)Cas12a核酸和蛋白质，以及它们的使用方法。特别地，本发明专利技术涉及一种分离的突变型LbCas12a蛋白，其中该分离的突变型LbCas12a蛋白在CRISPR/Cas12a核酸内切酶系统中具有活性。本发明专利技术还包括分离的编码突变型LbCas12a蛋白的核酸，具有突变型LbCas12a蛋白的核糖核蛋白复合物和CRISPR/Cas12a核酸内切酶系统。白复合物和CRISPR/Cas12a核酸内切酶系统。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】毛螺菌科细菌ND2006 CAS12A突变型基因和由其编码的多肽
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求于2019年2月22日提交的美国临时申请第62/808,984号的权益，所述临时申请的公开内容特此通过引用整体并入。


[0003]本专利技术涉及基于毛螺菌科(Lachnospiraceae)细菌Cas12a的CRISPR基因，由其编码的多肽，稳定表达Cas12的哺乳动物细胞系，crRNA以及这些材料在CRISPR
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Cas12a系统和方法的组合物中的用途。

技术介绍

[0004]Cas12a(以前称为Cpf1)是2类/V型CRISPR RNA引导的核酸内切酶。(Zetsche,B等人,(2015)Cas12a是2类CRISPR
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Cas系统的单一RNA引导的核酸内切酶(Cas12a is a single RNA
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guided endonuclease of a class 2CRISPR
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Cas system).Cell 163:1<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种分离的突变型LbCas12a，所述分离的突变型LbCas12a包含选自以下的取代突变：a)引入野生型LbCas12a蛋白中选自以下位置的单一取代突变：N527、D559和E795：或b)引入野生型LbCas12a蛋白中选自以下位置中的至少两者的多个取代突变：N527、D559和E795。2.根据权利要求1所述的分离的突变型LbCas12a蛋白，其中所述分离的突变型LbCas12a蛋白选自SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5。3.根据权利要求1所述的分离的突变型LbCas12a蛋白，其中所述分离的突变型LbCas12a蛋白选自SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.9。4.一种分离的核糖核蛋白复合物，所述分离的核糖核蛋白复合物包含：a)根据权利要求1所述的突变型LbCas12a蛋白；和b)gRNA复合物，其中所述分离的核糖核蛋白复合物作为CRISPR/Cas12a核酸内切酶系统具有活性，其中所得CRISPR/Cas12a核酸内切酶系统相对于野生型CRISPR/Cas12a核酸内切酶系统显示出保持的在靶编辑活性。5.根据权利要求4所述的分离的核糖核蛋白复合物，其中所述突变型LbCas12a蛋白选自SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.9。6.一种包含突变型LbCas12a蛋白和gRNA的CRISPR/Cas12a核酸内切酶系统，其中所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：莎拉，
申请(专利权)人：合成DNA技术公司，
类型：发明
国别省市：