一种解鸟氨酸拉乌尔菌菌株SK2021-1及其防控旱地蜗牛应用制造技术

本发明专利技术属于农业技术领域，具体涉及一种解鸟氨酸拉乌尔菌菌株SK2021

【技术实现步骤摘要】
一种解鸟氨酸拉乌尔菌菌株SK2021
‑
1及其防控旱地蜗牛应用


[0001]本专利技术属于农业
，具体涉及一种解鸟氨酸拉乌尔菌菌株SK2021
‑
1及其防控旱地蜗牛应用。

技术介绍

[0002]旱地蜗牛一般指陆生的蜗牛，生活于灌木丛、低矮草丛、农田及住宅附近阴暗潮湿地区及果园、山坡草丛之中。蜗牛昼伏夜出，多在黄昏以后开始活动、取食，在晚上20
‑
23时期间达到高峰，午夜后摄食量逐渐减少，至清晨陆续停止取食，并潜入土中或隐蔽处。蜗牛喜阴暗、潮湿的环境，阴雨天或浇水后可昼夜活动、取食。
[0003]旱地蜗牛觅食范围非常广泛，主食众多农作物的叶、茎、芽、花及多汁的果实，一般在4
‑
5月和9
‑
10月期间大量活动，对农作物造成很大的危害，是农业重要有害生物。目前防治旱地蜗牛的主要措施包括：（1）农业防治：如采用地膜覆盖栽培，合理密植，疏枝整叶，清除田间杂草，秋季深耕、晒地，通过降低环境的潮湿度，从而不利于蜗牛的生活，以达到防治蜗牛的效果，但这中方法需要耗费大量劳动力，防治效果低。
[0004]（2）人工诱捕：在傍晚时，将树叶、杂草、菜叶等堆放在田间，每隔3
‑
5米放置1堆，制造潮湿环境以吸引蜗牛，天亮前揭开堆积物，人工捕捉加以消灭，这种方法同样需要耗费大量人力。
[0005]（3）药剂防治：每亩用6%密达杀螺颗粒剂0.5
‑
0.6千克、30%聚醛
·
甲萘威颗粒剂300克、10%四聚乙醛颗粒剂500克等化学农药，拌适量细土或细沙，于傍晚在田间均匀撒施，这种方法有一定的防治效果，但是化学农药会可能会造成人、畜中毒，同时也会造成环境的污染。
[0006]综上可见，目前常见的旱地蜗牛防治措施虽然有一定的防治作用，但存在不够简便、低效、安全性差的等不足，因此，研发一种简便、高效且安全的生物防控技术及制剂很有必要。

技术实现思路

[0007]鉴于上述内容，有必要提供一种解鸟氨酸拉乌尔菌菌株SK2021
‑
1（（Raoultella ornithinolytica SK2021
‑
1））及由其制成的发酵液在防控旱地蜗牛应用，由该菌株制成的发酵液对旱地蜗牛的防控效果很好。
[0008]为达到上述目的，本专利技术所采用的技术方案是：一种解鸟氨酸拉乌尔菌菌株SK2021
‑
1，其于2021年06月28日保藏于中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心(CGMCC)，分类命名为解鸟氨酸拉乌尔菌菌株SK2021
‑
1（Raoultella ornithinolytica SK2021
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1），保藏编号为CGMCC No.22783。
[0009]本专利技术提供的解鸟氨酸拉乌尔菌菌株SK2021
‑
1从云南农业大学后山农场玉米地自然死亡的蜗牛体内分离获得，于不同是时间段分离得到的菌株生理特性相同，该菌株的
生物学特性如下：生长最适温度为37℃。在LB平板培养基上，菌落呈圆形、凸起、灰白色、较大、具有光泽，呈黏液状。菌体具有较厚的荚膜，有菌毛，球杆形,大小0.3
‑
1.0
×
0.6
‑
6μm，常呈单个、成双或短链状排列，革兰氏染色阴性，不运动，好氧，兼性厌氧。氧化酶阴性，细胞生长在肉汁培养基上，接触酶阳性，可利用柠檬酸盐和葡萄糖作为唯一碳源，用葡萄糖发酵产酸和气，发酵葡萄糖产生2，3
‑
丁二醇作为最终产品，V
‑
P检测阳性。经对所分离菌株SK2021
‑
1的16S
ꢁ
rDNA基因序列测定，结果发现本专利技术提供的菌株SK2021
‑
1的16S
ꢁ
rDNA基因序列与解鸟氨酸拉乌尔菌菌株172117885的同源性最高，相似性达99%，结合生理生化测定从而确定分离出的解鸟氨酸拉乌尔菌菌株SK2021
‑
1（Raoultella ornithinolytica SK2021
‑
1）。
[0010]通过试验研究解鸟氨酸拉乌尔菌菌株SK2021
‑
1对旱地蜗牛的防治效果，发现用菌株SK2021
‑
1对旱地蜗牛进行药剂喷雾处理，蜗牛出现了部分死亡和中毒的现象，表现出优良的蜗牛防治效果。
[0011]一种如上述解鸟氨酸拉乌尔菌菌株SK2021
‑
1在防控旱地蜗牛的应用，将所述解鸟氨酸拉乌尔菌菌株SK2021
‑
1制成防控菌剂后用于旱地蜗牛的防控，所述防控菌剂的制备方法包括以下步骤：（1）先制备培养基，接着将制备好的培养基分装于三角瓶中，并置于121℃的条件下进行灭菌30min，再降温至37℃，得到备用瓶；（2）取1μL解鸟氨酸拉乌尔菌菌株SK2021
‑
1接种到步骤（1）得到的备用瓶内的培养基中，得到接种瓶；（3）将步骤（2）得到的接种培养瓶置于转速为160r/min、温度为37℃的摇床中进行培养24h，得到解鸟氨酸拉乌尔菌菌株SK2021
‑
1种子发酵液；（4）将步骤（3）得到的解鸟氨酸拉乌尔菌菌株SK2021
‑
1种子发酵液按发酵罐中培养基体积的1% 的量接种于发酵罐中，并置于转速为120r/min、温度为37℃的条件下发酵34h，得到发酵物料；（5）往步骤（4）得到的发酵物料中添加氮酮、吐温20、黄原胶和十二烷基二苯醚二磺酸钠，并搅拌均匀得到防控菌剂；其中所述防控菌剂中氮酮占总质量的0.2%，吐温20占总质量的2%，黄原胶占总质量的2%、十二烷基二苯醚二磺酸钠占总质量的10%。
[0012]在本专利技术中，进一步的说明，所述防控菌剂的制备方法中，每1L步骤（1）至步骤（4）中所述的培养基主要由以下质量的原料制成：黄豆粉14g、玉米粉15g、蔗糖3g、鱼粉2g、蛋白胨3g、碳酸钙6g、硫酸铵0.5g、硫酸镁0.3g、磷酸二氢钾0.3g、磷酸氢二钾0.3g、硫酸锰0.2g、氢氧化钠0.25g。
[0013]在本专利技术中，进一步的说明，所述防控菌剂的制备方法中，步骤（1）及步骤（4）中所述培养基的制备方法为：先按制备1L所述培养基的量分别称取各原料，并加入1L灭菌水中，混合均匀得到混合物料；接着将得到的混合物料置于121℃、0.15大气压的条件下进行灭菌30min即可。
[0014]在本专利技术中，进一步的说明，所述防控菌剂的制备方法中，步骤（1）所述三角瓶的容积为200mL，其内加入所述培养基的量为100mL。
[0015]在本专利技术中，进一步的说明，所述防控菌剂的制备方法中，步骤（3）得到的解鸟氨酸拉乌尔菌菌株SK2021
‑
1种子发酵液中的菌量为1
×
105‑5×
105CFU/mL。
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种解鸟氨酸拉乌尔菌菌株SK2021
‑
1，其特征在于：所述解鸟氨酸拉乌尔菌菌株SK2021
‑
1保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其分类命名为解鸟氨酸拉乌尔菌菌株SK2021
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1（Raoultella ornithinolytica SK2021
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1），保藏编号为CGMCC No.22783。2.一种如权利要求1所述的解鸟氨酸拉乌尔菌菌株SK2021
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1在防控旱地蜗牛的应用，其特征在于：将所述解鸟氨酸拉乌尔菌菌株SK2021
‑
1制成防控菌剂后用于旱地蜗牛的防控，所述防控菌剂的制备方法包括以下步骤：先制备培养基，接着将制备好的培养基分装于三角瓶中，并置于121℃的条件下进行灭菌30min，再降温至37℃，得到备用瓶；取1μL解鸟氨酸拉乌尔菌菌株SK2021
‑
1接种到步骤（1）得到的备用瓶内的培养基中，得到接种瓶；将步骤（2）得到的接种培养瓶置于转速为160r/min、温度为37℃的摇床中进行培养24h，得到解鸟氨酸拉乌尔菌菌株SK2021
‑
1种子发酵液；将步骤（3）得到的解鸟氨酸拉乌尔菌菌株SK2021
‑
1种子发酵液按发酵罐中培养基体积的1% 的量接种于发酵罐中，并置于转速为120r/min、温度为37℃的条件下发酵34h，得到发酵物料；（5）往步骤（4）得到的发酵物料中添加氮酮、吐温20、黄原胶和十二烷基二苯醚二磺酸钠，并搅拌均匀得到防控菌剂；其中所述防控菌剂中氮酮占总质量的0.2%，吐温20占总质量的2%，黄原胶占总质量的2%、十二烷基二苯醚二磺酸钠占总质量的10%。3.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：何鹏搏，赵正龙，何月秋，何鹏飞，吴毅歆，梁承，罗培繁，余义发，
申请(专利权)人：南宁汉和生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：