一种快速检测两种利什曼原虫的核酸检测试剂盒及其应用制造技术

一种快速检测两种利什曼原虫的核酸检测试剂盒及其应用，其中上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。本发明专利技术灵敏度与荧光定量PCR相当，均远远高于病原学检测方法和血清学检测，整个反应时间在15

【技术实现步骤摘要】
amplification，RPA)以及本研究中的RAA技术等。LAMP需要设计多对引物，RPA为英国专利技术，RAA是与RPA类似的我国自主研发技术。由于我国VL的病原体主要是杜氏利什曼原虫和婴儿利什曼原虫，因此，本实验将针对上述两种利什曼原虫，建立并优化荧光重组酶介导(recombinase aided amplification，RAA)的等温核酸扩增方法，并对其进行评价。

技术实现思路

[0005]解决的技术问题：本专利技术针对上述技术问题，提供一种快速检测两种利什曼原虫的核酸检测试剂盒，利用重组酶、单链结合蛋白、DNA聚合酶在39℃衡温条件下，重组酶与引物形成聚合体扫描双链DNA，在与引物同源的序列处使双链DNA解旋。在单链结合蛋白和DNA聚合酶的作用下，使引物和模板之间发生链替换，新的DNA片段可以在体外快速地扩增出来。在单链结合蛋白以及缩合剂聚乙二醇(PEG10000)存在的条件下，不断重复这一过程而最终实现核酸的高效扩增，5
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20分钟之内就可以将目的基因扩增放大几百万倍，达到可以用仪器检测到的水平。该检测试剂盒具有扩增时间短(&本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.快速检测利什曼原虫的引物对，其特征在于，上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No. 3所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No. 6所示。2.权利要求1所述引物对在快速检测利什曼原虫中的应用。3.一种快速检测利什曼原虫的核酸检测试剂盒，其特征在于，含有权利要求1所述的引物对。4. 根据权利要求3所述快速检测利什曼原虫的核酸检测试剂盒，其特征在于，试剂盒还包含利什曼原虫反应体系，反应缓冲液，乙酸镁，阳性质控品，阴性质控品；所述利什曼原虫反应体系包含利什曼原虫探针，dNTPs，ATP，重组酶，辅助蛋白，单链结合蛋白，DNA聚合酶，核酸外切酶；所述探针的核苷酸序列如序列表SEQ ID No. 8所示。5.根据权利要求2所述快速检测利什曼原虫的核酸检测试剂盒，其特征在于，所述反应缓冲液的组份为浓度为500 mmol/L pH值7.4的Tris
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HCl 缓冲液和质量分数为10%的PEG 10000。6.根据权利要求2所述快速检测利什曼原虫的核酸检测试剂盒，其特征在于，所述乙酸镁的...

【专利技术属性】
技术研发人员：林红，刘燕红，赵松，杨坤，应清界，邵雷，
申请(专利权)人：江苏省血液中心，
类型：发明
国别省市：