本发明专利技术公开了一种利用GC
【技术实现步骤摘要】
一种利用GC
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MS/MS高效检测并鉴别植物挥发物的方法
[0001]本专利技术属于分析化学领域，更具体涉及一种利用GC
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MS/MS高效检测和鉴别植物挥发物的方法，可显著提升植物挥发物的检测效果。
技术介绍
[0002]植物挥发物是一类具有高饱和蒸气压的亲脂性液体。目前已鉴定出超过1700种植物挥发物(Natalia Dudareva et al.,Biosynthesis,function and metabolic engineering ofplant volatile organic compounds。New Phytologist，2013)。植物挥发物对植物本身及人类都具有重要作用：在植物中，挥发物起与环境互作的作用(Aino Kalske et al.,Insect herbivory selects for volatile
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mediated plant
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plant communication。Current Biology,2019)；对人类而言，植物挥发物提供了食品香味，也可作为香料、调味品、药品等(Eran Pichersky et al.,Biosynthesis ofplant volatiles:nature
’
s diversity and ingenuity。Science，2006)。因此，植物挥发物具有重要的研究意义。
[0003]现阶段研究植物挥发物的方法主要是基于固相微萃取
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气相色谱
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质谱联用(SPME
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GC
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MS)的非靶向代谢组学方法(Barbara Bojko et al.,Solid
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phase microextraction in metabolomics。Trends inAnalytical Chemistry，2014)。但非靶方法存在灵敏度低、数据卷积、定量不准等问题(Tomas Cajka et al.,Toward merging untargeted and targeted methods in mass spectrometry
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based metabolomics and lipidomics。Analytical Chemistry，2014)。基于液相色谱
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质谱联用(LC
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MS)的广泛靶向代谢组学方法可有效提升方法灵敏度、避免数据卷积、提升定量能力(Chen wei et al.,Anovel integrated method for large
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scale detection,identification,and quantification of widely targeted metabolites:application in the study of rice metabolomics。Molecular Plant，2013)。因此，可将广靶思路应用于GC
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MS中，提升挥发物检测效率。
[0004]然而，广靶方法中的检测通量及可定性物质数量仍受限于非靶方法，直接迁移广靶方法思路无法有效提升挥发物组的检测和定性通量；此外，基于SPME
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GC
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MS的挥发组方法存在结果重现性较差的问题。针对上述问题，本专利技术根据挥发物合成通路有限，及挥发物合成酶有趋同进化趋势的研究背景(Eran Pichersky et al.,Biosynthesis ofplant volatiles:nature
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s diversity and ingenuity。Science，2006)，通过整合多物种挥发物数据库，提升方法检测通量及可定性物质数量，并利用回归模型，建立适用于SPME
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GC
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MS数据的校正方法，显著提高了方法的稳定性。本专利技术建立了一种可高效检测植物挥发物的广泛靶向代谢组方法，对植物挥发物研究具有重要意义。
技术实现思路
[0005]本专利技术的目的在于提供了一种利用GC
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MS/MS高效检测并鉴别植物挥发物的方法，
其最大的特点是与现阶段应用的非靶方法相比，显著提升了方法的灵敏度、检测通量、可定性物质数量、定量准确性及方法重现性。利用本方法，可促进植物挥发物的研究。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术采用以下技术措施：
[0007]一种利用GC
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MS/MS高效检测并鉴别植物挥发物的方法，其步骤是：
[0008]1、样品制备：
[0009](1)颗粒状样品：取适量样品(大于2g)脱壳后常温保存；粉末状样品：取适量新鲜样品(大于2g)在研钵中加液氮研磨成粉末状后，
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80℃保存；液体样品：取适量新鲜样品(大于4g)，榨汁机榨取果汁，果汁于4℃保存，12小时内检测；
[0010](2)溶液配制：内标液为V
水
：V
TMP
＝6
×
106：1；粉末状样品提取液为V
水
：V
EDTA
：V
TMP
＝1000:1：0.001，V代表体积，TMP为2,4,6
‑
三甲基吡啶，EDTA为乙二胺四乙酸，水为去离子水，TMP与EDTA为分析级试剂(国药集团化学试剂有限公司)；
[0011](3)称取适量样品(大于1g)，置于顶空进样瓶，颗粒状样品按W
样品
：W
内标液
＝3:1的比例加入水；粉末状样品按W
样品
：W
二水氯化钙
：W
提取液
＝2:1:2的比例，依次加入二水氯化钙和提取液；液体样品按W
样品
：W
内标液
：W
氯化钠
＝1:0.1:0.1的比例，依次加入内标液和氯化钠，待测；V代表体积，W代表质量，二水氯化钙及氯化钠为分析级试剂(国药集团化学试剂有限公司)；
[0012]2、仪器条件：
[0013](1)、进样器条件：安捷伦PAL RSI 120自动进样系统；固相微萃取探头：色谱科DVB/CAR/PDMS固相微萃取探头，DVB为二乙烯苯，CAR为碳分子筛，PDMS为聚二甲基硅氧烷；根据样品性质的不同，分别将振摇器温度设置为40～80℃，将振摇时间设置为10～30分钟，将吸附时间设置为20分钟，解吸附时间：2分钟，老化温度：270℃，老化时间：5分钟；
[0014](2)色谱条件：安捷伦7890B色谱仪；色谱柱：安捷伦HP
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5MS色谱柱，30m
×
250μm
×
0.25μm；升温程序：初始温度40℃，保持3分钟；以2℃/分钟的速度本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种利用GC
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MS/MS高效检测并鉴别植物挥发物的方法，其步骤是：A、样品制备：(1)颗粒状样品：谷物脱壳后常温保存；粉末状样品：鲜样在研钵中加液氮研磨成粉末状后，
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80℃保存；液体样品：榨汁机榨取鲜样果汁，果汁于4℃保存，12小时内检测；(2)溶液配制：内标液为V
水
：V
TMP
＝6
×
106：1；粉末状样品提取液为V
水
：V
EDTA
：V
TMP
＝1000:1：0.001，V代表体积，TMP为2,4,6
‑
三甲基吡啶，EDTA为乙二胺四乙酸，水为去离子水，TMP与EDTA为分析级试剂；(3)称取适量样品，置于顶空进样瓶，颗粒状样品按W
样品
：W
内标液
＝3:1的比例加入水；粉末状样品按W
样品
：W
二水氯化钙
：W
提取液
＝2:1:2的比例，依次加入二水氯化钙和提取液；液体样品按W
样品
：W
内标液
：W
氯化钠
＝1:0.1:0.1的比例，依次加入内标液和氯化钠，待测；V代表体积，W代表质量，二水氯化钙及氯化钠为分析级试剂；B、仪器条件：(1)进样器条件：安捷伦PAL RSI 120自动进样系统；固相微萃取探头：色谱科DVB/CAR/...
【专利技术属性】
技术研发人员：罗杰，袁弘伦，曹光平，刘贤青，候晓东，黄梦兰，杜鹏萌，
申请(专利权)人：罗杰，
类型：发明
国别省市：
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