四环素类抗生素及其光解产物对大肠杆菌生态毒性的评估方法技术

本发明专利技术属于环境生态学领域，一种四环素类抗生素及其光解产物对大肠杆菌生态毒性的评估方法。主要阐述了土霉素，金霉素和四环素的光解产物对大肠杆菌的生态毒性的研究方法，能够用于研究环境中四环素类抗生素迁移转化过程中对微生物生态毒性的变化。程中对微生物生态毒性的变化。程中对微生物生态毒性的变化。

【技术实现步骤摘要】
四环素类抗生素及其光解产物对大肠杆菌生态毒性的评估方法


[0001]本专利技术属于环境生态学领域，具体研究的四环素类抗生素(TCs)包括土霉素(OTC)和金霉素(CTC)。主要阐述这TCs及其光解产物对大肠杆菌的生态毒性的研究方法，能够用于研究环境中四环素类抗生素迁移转化过程中对微生物生态毒性的变化。

技术介绍

[0002]四环素类抗生素是临床上一类重要的广谱抗菌药物，由于具有预防疾病和促进动物生长等作用，常被用作饲料添加剂广泛应用于畜牧业及水产养殖业。其化学结构属于氢化并四苯的衍生物，因其结构中含有多个可离解性官能团，四环素类抗生素表现为酸碱两性化合物。部分调查表明，约有30％～90％的兽用抗生素以原药的形式随着畜禽粪便排泄出来，残留药物易对环境生态系统产生破坏，对微生物群落具有一定的毒性效应，甚至可以通过食物链富集，对人体健康产生危害。四环素类抗生素产生的危害已经不容忽视，因此，寻找一种高效方法去除环境中残留的四环素类抗生素非常必要。
[0003]大肠杆菌(E.coli)是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一种细菌，可随动物粪便排本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于四环素类抗生素及其光解产物对大肠杆菌生态毒性的评估方法，主要包括以下步骤：1)菌种生长曲线测定：取20μL菌液接种于100mL Luria
‑
Bertani(LB)液体培养基中，在37℃，120r/min摇床中培养，定时取样，用紫外分光光度计测定600nm处吸光度，吸光度与大肠杆菌密度正相关。绘制“OD
600
‑
培养时间”曲线，得到进入生长对数期所需的培养时间；2)菌种活化扩增培养：首先取20μL菌液接种于100mL LB培养基中，在37℃，120r/min摇床中培养一定时间，获得培养对数期的菌液用于毒性分析实验；3)TCs标准溶液对大肠杆菌的生长抑制：本发明中采用对大肠杆菌的生长抑制率表示对微生物的毒性效应，配制不同浓度的TCs标准溶液，按照2mL标准溶液+4mL LB培养基+6μL步骤2)中的菌液(稀释至OD
600
＝0.20)形成实验体系。上述溶液在试管里混匀后，放置于摇床，37℃，180r/min培养8h后，测定OD
600
。空白对照样品用去离子水替代样品。所有操作在超净工作台中进行，保证无菌环境。每次实验设阴性对照样品，即溶液中不加菌液，以证明实验中没有杂菌污染。2组平行；4)计算TCs标准溶液对大肠杆菌的生长抑制率，生长抑制率表示为：生长抑制率(％)＝(1
‑
OD600
(standard)
/OD600
(control)
)
×
100OD...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙佩哲，白银晓，马原，
申请(专利权)人：天津大学，
类型：发明
国别省市：