富血小板血浆分离凝胶的制备方法及所得产品和应用技术

本发明专利技术公开了一种富血小板血浆分离凝胶的制备方法及所得产品和应用，以聚乙烯醇、丙烯酸及衍生物、增塑剂、多糖类聚合物、乳化剂、引发剂、二氧化硅单体为原料制成，本发明专利技术分离凝胶制作方法简单、安全、便于开发与应用，具有良好的稳定性、分离效果和生物相容性，不与血液发生融合干扰血浆的使用，有效的分离富含血小板血浆，在医美等领域存在重要意义。在医美等领域存在重要意义。

【技术实现步骤摘要】
富血小板血浆分离凝胶的制备方法及所得产品和应用


[0001]本专利技术涉及一种富血小板血浆分离用凝胶的制备方法，还涉及制得的富血小板血浆分离凝胶以及该分离凝胶的应用，属于血液采集分离


技术介绍

[0002]血液是由血浆和血细胞组成，其中血细胞包括红细胞、白细胞和血小板三种细胞。1993年Hood首先提出富血小板血浆的概念，并发现了富血小板血浆中含有的血小板的数量是正常血液的4-5倍。基于血液中组分的不同密度，采取离心手段对抗凝血液进行离心。其中处于底部的是密度较大的红细胞和白细胞，最上边一层为乏血小板血浆，而中间层则为富血小板血浆。富血小板血浆中含有大量的生长因子促进受伤组织的修复与再生，例如促进骨再生的主要机制是基于富血小板血浆中含有的存在于α颗粒中的血小板衍生生长因子（PDGF）和转化生长因子（TGF-β）。富血小板血浆被激活时，能为骨缺损的部位释放两种生长因子，从而促进受伤组织的修复与再生。此外，通过医疗美容技术的发展与进步，人们发现通过将所提取到的富血小板血浆合成凝胶，然后通过表面涂敷等医疗手段将富血小板血浆返回到患者自身，从而达到美容、自身机体的恢复与治疗的优异效果。最主要的一点在于患者利用自体富血小板血浆对受伤组织的修复与再生有效的避免了利用外体血制品发生排斥反应的缺点。
[0003]目前在市场上分离富血小板血浆的方法有以下几种：1）二次分离法；2）凝胶分离法。其中二次分离法是根据血液组分密度的不同，先对全血进行第一次低速离心使血液的血细胞和血浆进行分层。其中血浆包含富血小板血浆和贫血小板血浆，中间夹杂着少许红细胞等杂质，之后将下层的包括红细胞部分的血液组分进行抽取出来，之后悬浮。然后进行第二次离心，悬浮，最终得到富血小板血浆。在此方法中，需要对第一次离心的血液成分进行移除，此过程需要注射长针插入离心管中进行吸取需要移除的组分。此过程对血小板具有两方面的潜在影响：1）增加了血小板的污染几率；2）血小板易被激活，易发生血小板聚集现象；此外，此方法收集富血小板血浆的回收率较低且红细胞的剔除率低。目前市面上提取血液中的富血小板血浆大多用此方法。凝胶分离法同样是基于血液组分密度的不同进行的分离方法，凝胶的密度处于红细胞以及富血小板血浆密度之间。通过离心凝胶将红细胞以及富血小板血浆隔离，不需二次离心，整个操作过程处于闭环操作。此方法具有减少富血小板血浆被激活的几率、操作简单、富血小板血浆回收率高的优点。但此方法对凝胶具有特殊性要求，例如触变性、粘性以及生物相容性等，所以市面上用此方法进行富血小板血浆提取的较少。目前有少许的血液分离凝胶的专利报道，但依旧存在各自的缺陷。
[0004]专利CN 106366426A公开了一种富血小板血浆提纯和纯化的分离胶体系及制备方法，该分离凝胶体系主要是由聚异丁烯、氯化石蜡、纳米二氧化硅和改性白炭黑组成，其中氯化石蜡是石蜡烃的氯化衍生物，处理时所产生的氯化物会对环境造成一定的影响。
[0005]专利CN 101570637B公开了一种有机硅分离凝胶的制备方法。该分离凝胶体系主要是由有机聚硅氧烷、羟基硅油和硅烷偶联剂组成。有机硅的系统稳定性差，在实际的使用
过程中常发生失效问题。此外，有机硅类中的小分子容易在所分离出来的血浆表面形成油珠，影响产品性能。
[0006]专利CN 100341599C公开了一种惰性胶用于将血液中的血清和血球进行分离，主要是由气相二氧化硅、二氧化硅和稳定剂组成，其在20℃时的比重为1.04-1.05g/cm3，仅能用于血清的分离，而富血小板血浆的密度在1.05g/ cm3左右，影响富血小板血浆的纯度和回收率较低，因此不适合高浓的血小板血浆的分离与提取。

技术实现思路

[0007]针对现有技术中分离富血小板血浆存在的诸多不足，本专利技术提供了一种富血小板血浆分离凝胶的制备方法。该制备方法操作简单、易于实施，便于产业化生产。所得分离凝胶具有生物相容性好、触变性好、血小板分离效果好、血小板回收率高、操作难度低等优势。
[0008]进一步的，本专利技术还提供了一种富血小板血浆分离管及基于分离凝胶采用该分离管提取富血小板血浆的方法。该分离管中含有上述富血小板血浆分离凝胶，采集的血液直接进入分离管并在分离管中分离，整个分离过程处于密闭无菌环境，操作便捷、稳定、安全，分离出来的富血小板血浆不易受到感染，回收率高，可直接提取直接作业，无须二次转移，提高了分离效率。
[0009]下面，详细介绍本专利技术的技术方案：一种富血小板血浆分离凝胶的制备方法，该方法包括以下步骤：（1）将30-50份聚乙烯醇、8-15份丙烯酸、1-5份增塑剂、10-15份多糖类聚合物混合均匀，在气体保护下升温，使得所加入的物质充分的溶解；（2）反应后降温，向步骤（1）的反应体系中加入10-20份丙烯酸衍生物、0.1-0.4份引发剂和0.1-1份乳化剂，搅拌混合均匀，升温进行自由基引发聚合反应；（3）反应后降温，向步骤（2）体系中加入0.1-0.4份引发剂和0.1-1份乳化剂，搅拌混合均匀，升温进行自由基引发聚合反应；（4）反应后降温，向步骤（3）的反应体系中加入5-10份二氧化硅单体，在搅拌下控温进行反应，得到富血小板血浆分离凝胶；其中，各原料均以重量份加入。
[0010]进一步的，上述制备方法中，所用聚乙烯醇是医药用EG-40等级，黏度为40-60mPa
•
s。
[0011]进一步，上述制备方法中，所用的多糖类聚合物为壳聚糖、海藻酸钠、淀粉、海藻酸钙、葡甘聚糖和纤维素中的两种或两种以上。在此聚合反应过程中，多糖类聚合物起到一定的乳化粘合的作用。
[0012]进一步，上述制备方法中，所述增塑剂为聚乳酸、柠檬酸三丁酯、丙二醇中的至少一种。增塑剂能够调整分离凝胶的可塑性。增塑剂通过插入到聚合物分子链之间，削弱聚合物分子之间的作用力，增加聚合物分子链的移动性，从而避免了聚合物粘性过大而导致分离凝胶的作用效果减弱。
[0013]进一步，上述制备方法中，所述丙烯酸衍生物为丙烯酸缩水甘油酯、丙烯酸丁酯、甲基丙烯酸羟乙酯、丙烯酸甲酯和聚丙烯酸中的至少一种。其中丙烯酸衍生物进一步加强反应体系中的丙烯酸与聚乙烯醇的聚合效应。
[0014]进一步，上述制备方法中，所述乳化剂为甘油、十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸
钠和山梨糖醇中的至少一种。
[0015]进一步的，本专利技术中使用的各聚合物的分子量没有特殊要求，采用市面上经常使用的分子量即可。
[0016]进一步，上述制备方法中，所述引发剂为过硫酸铵、过氧化月桂烯胺、偶氮二异丁腈或氯化苯甲酰。
[0017]进一步，上述制备方法中，所述二氧化硅单体为疏水型气相二氧化硅或/和纳米二氧化硅。二氧化硅单体均为纳米级，其粒度在45-55nm范围。二氧化硅单体能调整整个分离凝胶的触变性和粘稠度，通过其与体系中的氢氧键之间的联合，可以很大程度的提高分离凝胶的触变性能以及粘合性。
[0018]进一步的，上述步骤（1）中，反应在气体保护下进行，所用的保护气体可以是氮气或本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种富血小板血浆分离凝胶的制备方法，其特征是包括以下步骤：（1）将30-50份聚乙烯醇、8-15份丙烯酸、1-5份增塑剂、10-15份多糖类聚合物混合均匀，在气体保护下升温，使得所加入的物质充分的溶解；（2）反应后降温，向步骤（1）的反应体系中加入10-20份丙烯酸衍生物、0.1-0.4份引发剂和0.1-1份乳化剂，搅拌混合均匀，升温进行自由基引发聚合反应；（3）反应后降温，向步骤（2）体系中加入0.1-0.4份引发剂和0.1-1份乳化剂，搅拌混合均匀，升温进行自由基引发聚合反应；（4）反应后降温，向步骤（3）的反应体系中加入5-10份二氧化硅单体，在搅拌下控温进行反应，得到富血小板血浆分离凝胶；其中，各原料均以重量份加入。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是：所述多糖类聚合物为壳聚糖、海藻酸钠、淀粉、海藻酸钙、葡甘聚糖和纤维素中的两种或两种以上；所述增塑剂为聚乳酸、柠檬酸三丁酯和丙二醇中的至少一种；所述丙烯酸衍生物为丙烯酸缩水甘油酯、丙烯酸丁酯、甲基丙烯酸羟乙酯、丙烯酸甲酯和聚丙烯酸中的至少一种。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是：所述乳化剂为甘油、十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠和山梨糖醇中的至少一种；所述引发剂为过硫酸铵、过氧化月桂烯胺、偶氮二异丁腈或氯化苯甲酰；所述二氧化...

【专利技术属性】
技术研发人员：庄心蕊，张燕，刘建建，郭学平，
申请(专利权)人：山东华熙海御生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：