一种构建丙酸生产菌的方法技术

本发明专利技术公开了一种构建丙酸生产菌的方法，包括以下步骤：中断谷氨酸棒杆菌基因组中ldh基因，整合入大肠杆菌来源的scpA、scpB和scpC的表达基因，筛选出厌氧条件下生产丙酸、但不生产乳酸的工程菌。该工程菌发酵产生的丙酸能够用于制备食品级的丙酸钙。够用于制备食品级的丙酸钙。

【技术实现步骤摘要】
一种构建丙酸生产菌的方法


[0001]本专利技术属于代谢工程领域，具体地说，涉及一种产丙酸的谷氨酸棒杆菌工程菌的构建方法、以及食品级丙酸钙的制备方法。

技术介绍

[0002]丙酸钙广泛应用于食品、酿造、饲料、中药等行业，如面包、食醋、酱油、酱油食品蛋糕等。像其他脂肪酸一样，丙酸钙可以通过新陈代谢被人和动物吸收，并为人和动物提供必要的钙。丙酸钙被世卫组织和粮农组织批准用于安全食品和饲料使用酸基防腐剂，在酸性条件下，产生游离酸，具有抗菌作用，其防腐性能优越，是一种理想的食品防腐剂。Global Industry Analysts,Inc.于2021年发布的调研报告指出，丙酸钙2020年估算为2亿8,130万美元的全球市场，在2020年～2027年期间预计将以4％的年复合成长率增长，2027年之前达到3.7亿美元。
[0003]丙酸钙主要制备方法是由丙酸和氢氧化钙直接反应制备丙酸钙，此方法耗能高，污染大，由于化工产品丙酸不是生物基来源，一定程度上影响其在高端产品中的应用。此外还有发酵法制备丙酸，然后发酵液浓缩后加入氢氧化钙进行反应制备丙酸钙，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种构建丙酸生产菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：A.中断谷氨酸棒杆菌基因组中乳酸脱氢酶(ldh，NCBI登录号：NP_602100.1)基因，得到菌株A；B.构建用于在谷氨酸棒杆菌菌株中表达的大肠杆菌来源的甲基丙二酰辅酶A变位酶(scpA，NCBI登录号：NP_417392.1)基因表达元件、大肠杆菌来源的甲基丙二酰辅酶A脱羧酶(scpB，NCBI登录号：NP_311816.2)基因表达元件、大肠杆菌来源的丙酰辅酶A：琥珀酰辅酶A转移酶(scpC，NCBI登录号：NP_417396.4)基因表达元件，并将这三个基因表达元件分别或者共同克隆入用于在谷氨酸棒杆菌菌株中表达的质粒载体中，得到基因表达质粒；C.将步骤B中得到的基因表达质粒转入步骤A中得到的菌株A中，筛选基因组中整合了所述scpA、scpB和scpC编码基因的阳性克隆即菌株C；D.从菌株C中筛选出厌氧条件下生产丙酸的工程菌。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤B中每个基因表达元件包括启动子Psod、编码基因序列、终止子rrnBT1T2。3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，甲基丙二酰...

【专利技术属性】
技术研发人员：范文超，丁鹏，高书良，刘映淼，
申请(专利权)人：浙江华睿生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：