一种布洛芬人工抗原检测探针的制备及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种布洛芬人工抗原检测探针及其制备方法和应用，该制备方法首次用酶为载体蛋白，制备同时具有免疫原性和酶催化活性的布洛芬人工抗原，以用于布洛芬的分析。将辣根过氧化物酶(HRP)作为载体蛋白，通过活化酯法制备了布洛芬的人工抗原，利用MALDI

【技术实现步骤摘要】
一种布洛芬人工抗原检测探针的制备及其应用


[0001]本专利技术涉及免疫分析领域，具体而言，涉及一种布洛芬人工抗原检测探针及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]布洛芬一种重要的非甾体抗炎药，监测生物样品中的布洛芬含量，在对公共健康具有重要的作用。但目前的检测方法需要昂贵的仪器，复杂的样品前处理步骤、费时、高的检测限、特异性低或者需要毒性试剂。用于布洛芬检测的传统间接ELISA法需要其相应的抗体和二抗，因而其需要高昂的费用，同时需要冗长、费时的操作程序。

技术实现思路

[0003]本专利技术的第一目的在于提供一种布洛芬人工抗原检测探针，这种检测探针兼具免疫原和酶催化的双重性质，而且结构稳定、容易保藏。这种布洛芬人工抗原检测探针，检测布洛芬时操作简单、检测迅速且灵敏度高，能够对样品中很微量的布洛芬行有效检测。
[0004]本专利技术的第二目的在于提供一种布洛芬人工抗原检测探针的制备方法，制备方法步骤简单、反应条件不苛刻，容易实现，且该法所用到的溶剂对环境友好，适合工业大生产，能够对样品中布洛芬进行有效检测。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种布洛芬人工抗原检测探针的制备方法，其特征在于，其包括：步骤Ⅰ：将布洛芬与N,N'
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二环己基碳酰亚胺(DCC)和N
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羟基琥珀酰亚胺(NHS)混合，搅拌过夜。步骤Ⅱ：将步骤Ⅰ反应液于离心后，冰浴环境下将其上清液缓慢加入到与布洛芬质量比1：2.1的HRP溶液中，室温搅拌12h。随后将反应液离心，透析，即得到布洛芬人工抗原，放于4℃下保存备用，随后进行布洛芬人工抗原偶联比测定。2.根据权利要求1所述的布洛芬人工抗原检测探针的制备方法，其特征在于，所述将布洛芬与N,N'
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二环己基碳酰亚胺和N
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羟基琥珀酰亚胺混合，为布洛芬用DMF溶解后，在冰浴下加入与布洛芬摩尔比1.1：1的DCC并搅拌约15min，随后向中加入与DCC摩尔比1：1的NHS，于冰浴下搅拌过夜。3.根据权利要求1所述的布洛芬人工抗原检测探针的制备方法，其特征在于，在所述步骤Ⅱ中，所述缓慢加入为逐滴加入。4.根据权利要求1在所述步骤Ⅱ中，HRP溶液浓度为(1mg/mL)最佳。5.根据权利要求1在所述步骤Ⅱ中，所述布洛芬人工抗原偶联比测定，为将布洛芬人工抗原进行脱盐处理，随后和HRP分别与基质SA混合，点到样品靶上，放入质谱仪中进行激光扫描。6.根据权利要求1
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【专利技术属性】
技术研发人员：王甜甜，姚根宏，王乾龙，邱伟伟，梁健，
申请(专利权)人：中国科学院成都生物研究所湖州生物资源利用与开发创新中心，
类型：发明
国别省市：