一种采用高效液相色谱法检测间碘苄胍含量的方法技术

本发明专利技术涉及药物分析技术，具体涉及一种采用高效液相色谱法检测间碘苄胍含量的方法，流动相A为含有0.1％三氟乙酸的水溶液；流动相B为含有0.1％％三氟乙酸的乙腈；梯度洗脱。本发明专利技术以三氟乙酸水溶液和三氟乙酸乙腈的混合溶液为流动相，材料方便易得，实验安全可控，可操作性强；流动相采用二元梯度洗脱方法，能有效将间碘苄胍与杂质分离，分离度大于1.5。分离度大于1.5。分离度大于1.5。

【技术实现步骤摘要】
一种采用高效液相色谱法检测间碘苄胍含量的方法


[0001]本专利技术涉及药物分析技术，具体涉及一种采用高效液相色谱法检测间碘苄胍含量的方法。

技术介绍

[0002]间碘苄胍(metaiodobenzylguanidine，MIBG)是肾上腺素能神经元阻滞剂溴苄胺和胍乙啶的类似物，也是神经递质去甲肾上腺素的功能性类似物。放射性碘(
123
I和
131
I)标记的MIBG被广泛用于嗜铬细胞瘤和神经母细胞瘤的诊断或治疗，偶尔也用于其他肿瘤，如副神经节瘤、类癌和甲状腺髓样癌等。MIBG是放射性药物
131
I
‑
MIBG或
123
I
‑
MIBG标记前体，需对其质量进行控制，建立MIBG含量测定方法。
[0003]欧洲药典(10.0)收录的MIBG含量测定方法，以80g/L硝酸铵(40ml)和稀氨水(80mL)及甲醇(1080mL)的混合溶液为流动相，由于硝酸铵是易制爆危险化学品，属于管制品，并且操作具有较高的危险性。因此，需要一种材料易得、危险系数小、可操作性强，同时能够准确检测其含量的方法。

技术实现思路

[0004]本专利技术提供了一种采用高效液相色谱法检测间碘苄胍含量的方法，能够安全可控、快速准确的检测MIBG含量，可以用于控制MIBG的质量。
[0005]一种采用高效液相色谱法检测间碘苄胍含量的方法，其中，流动相A为含有0.1％三氟乙酸的水溶液；流动相B为含有0.1％三氟乙酸的乙腈；
[0006]梯度洗脱如下所示：
[0007][0008]根据本专利技术较佳实施例，流动相A为含有0.1％三氟乙酸的水溶液；流动相B为含有0.1％三氟乙酸的乙腈。
[0009]根据本专利技术较佳实施例，梯度洗脱如下所示：
[0010][0011]本专利技术人提供大量研究发现，采用以上三氟乙酸水溶液和三氟乙酸乙腈为流动相，材料方便易得，实验安全可控，可操作性强；通过进一步优化流动相的浓度及梯度洗脱，能有效将间碘苄胍与杂质间碘苄胺(合成原料)分离，分离度大于1.5。
[0012]根据本专利技术实施例，所述杂质包括间碘苄胺。
[0013]根据本专利技术实施例，合成间碘苄胍的原料包括间碘苄胺和氨基氰。
[0014]根据本专利技术实施例，所述间碘苄胍的制备方法包括：将间碘苄胺和氨基氰在熔融状态回流(例如6h)后，搅拌，加入2M KHCO3溶液，得到白色沉淀，抽滤，冲洗，再加热溶解至2M H2SO4溶液中，析出白色固体并过滤，重结晶后即得。根据该制备方法，间碘苄胍中可能存在的杂质包括间碘苄胺、氨基氰。
[0015]根据本专利技术实施例，色谱柱采用C18柱，例如C18 4.6
×
250mm，5μm。一些具体实施例中，是采用安捷伦Inertsil ODS
‑
SP，4.6
×
250mm，5μm。
[0016]根据本专利技术实施例，检测波长为210
‑
245nm，优选为230nm。
[0017]根据本专利技术实施例，柱温可为室温，例如20
‑
40℃。
[0018]根据本专利技术实施例，进样量可为10μL。
[0019]根据本专利技术实施例，采用高效液相色谱法检测间碘苄胍含量的方法，包括：
[0020]a)配制空白溶液
[0021]取含有0.1％三氟乙酸的水溶液和含有0.1％三氟乙酸的乙腈按照体积比为9:1(即初始流动相比例)，配制成空白溶液；或以水溶液为空白溶液；
[0022]b)配制对照品溶液
[0023]称取间碘苄胍对照品10mg，溶于所述空白溶液中，定容至100ml，制成0.1mg/mL的对照品溶液；
[0024]c)配制供试品溶液
[0025]称取间碘苄胍供试品10mg，溶于所述的空白溶液中，定容至100ml，制成0.1mg/mL的对照品溶液；
[0026]d)色谱条件
[0027]高效液相色谱仪：Waters ACQUITY Arc
[0028]色谱柱：C18 4.6
×
250mm，5μm
[0029]检测波长：230nm
[0030]柱温：室温
[0031]进样量：10μL
[0032]流动相A为含有0.1％三氟乙酸的水溶液；流动相B为含有0.1％三氟乙酸的乙腈；
[0033]梯度洗脱如下所示：
[0034][0035]流速：1.0mL/min
[0036]e)测定方法
[0037]在上述色谱条件下，将空白溶液，对照品溶液、供试品溶液分别注入色谱仪，记录色谱图，根据对照品和供试品色谱途中的峰面积，通过外标法计算供试品MIBG的含量。
[0038]与欧洲药典中MIBG含量测定方法相比，本专利技术以三氟乙酸水溶液和三氟乙酸乙腈的混合溶液为流动相，材料方便易得，实验安全可控，可操作性强；流动相采用二元梯度洗脱方法，能有效将间碘苄胍与杂质分离，分离度大于1.5。本专利技术建立了一种新的HPLC法用于MIBG含量的测定，并按照中国药典2020版<9101分析方法验证指导原则>进行方法学验证，结果表明，所建立的含量测定方法符合相关要求，方法中流动相简单易得、方法专属性强、灵敏度高、准确可靠，可用于间碘苄胍含量测定及质量控制。
附图说明
[0039]图1为本专利技术实施例1系统适用性溶液色谱图。
[0040]图2为本专利技术实施例1间碘苄胍对照品溶液色谱图。
[0041]图3为本专利技术实施例1间碘苄胍供试品溶液色谱图。
[0042]图4为本专利技术实施例1间碘苄胺对照溶液色谱图
[0043]图5为本专利技术实施例1间碘苄胍标准曲线。
[0044]图6
‑
图10分别为实施例2
‑
6色谱图。
[0045]图11
‑
图16分别为对比例1
‑
6色谱图。
具体实施方式
[0046]下面结合具体实施例，对本专利技术作进一步详细的阐述，实施例有助于更好地理解本专利技术，但本专利技术并不仅仅局限于下述实施例。
[0047]以下所用间碘苄胍的制备方法：将间碘苄胺和氨基氰在熔融状态回流6h后，搅拌，加入2M KHCO3溶液，得到白色沉淀，抽滤，冲洗，再加热溶解至2M H2SO4溶液中，析出白色固体并过滤，重结晶后即得。
[0048]实施例1
[0049]1.仪器与试剂
[0050]Waters ACQUITY Arc高效液相色谱仪，Waters公司。XSE205DU电子天平，梅特勒公司。Milli
‑
Q超纯水机，密理博。HPLC色谱柱，安捷伦Inertsil ODS
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SP，4.6
×
250mm，5μm。
[0051]间碘苄胍(上述方法制备，批号：2021本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种采用高效液相色谱法检测间碘苄胍含量的方法，其中，流动相A为含有0.1％三氟乙酸的水溶液；流动相B为含有0.1％三氟乙酸的乙腈；梯度洗脱如下所示：2.根据权利要求1所述采用高效液相色谱法检测间碘苄胍含量的方法，其中，梯度洗脱如下所示：3.根据权利要求1或2所述采用高效液相色谱法检测间碘苄胍含量的方法，其中，间碘苄胍中含有的杂质包括间碘苄胺。4.根据权利要求1
‑
3任一项所述采用高效液相色谱法检测间碘苄胍含量的方法，其中，合成间碘苄胍的原料包括间碘苄胺和氨基氰。5.根据权利要求1
‑
4任一项所述采用高效液相色谱法检测间碘苄胍含量的方法，其中，色谱柱采用C18柱。6.根据权利要求1
‑
5任一项所述采用高效液相色谱法检测间碘苄胍含量的方法，包括：a)配制空白溶液取含有0.1％三氟乙酸的水溶液和含有0.1％三氟...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈孟毅，董瑞林，孙明月，邢宇，胡骥，
申请(专利权)人：原子高科股份有限公司，
类型：发明
国别省市：