一种屋尘螨变应原特异性IgGFab抗体片段的制备方法及应用技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，具体公开了一种屋尘螨变应原特异性IgG Fab抗体片段的制备方法及应用。方法包括：1)采集、稀释血清，过滤得血清样品；将样品上蛋白质A亲和层析柱，然后洗脱血清IgG抗体，获得血清总IgG抗体；2)将屋尘螨加至亲和层析柱耦合，加入步骤1)的血清总IgG抗体，再洗脱屋尘螨特异性IgG抗体；3)在屋尘螨特异性IgG抗体中加入琼脂糖连接的木瓜蛋白酶，混匀孵育，离心取上清，即得。本发明专利技术屋尘螨变应原特异性IgG Fab抗体片段能与IgE竞争结合屋尘螨并减少屋尘螨

【技术实现步骤摘要】
一种屋尘螨变应原特异性IgG Fab抗体片段的制备方法及应用


[0001]本专利技术涉及生物
，尤其是涉及一种屋尘螨变应原特异性IgG Fab抗体片段的制备方法及应用。

技术介绍

[0002]哮喘是一种由肥大细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和T淋巴细胞等参与的慢性气道炎症。流行病学调查显示，哮喘在全球的患病率高达5％～16％。超过50％的成人哮喘患者和80％的儿童哮喘患者对变应原敏感，而尘螨是我国过敏性哮喘患者最主要的变应原，有87.2％的过敏患者对一种以上的尘螨过敏，并且致敏程度与哮喘的严重程度呈正相关。
[0003]过敏性哮喘的预防和治疗密切相关：一方面尽可能确定变应原，避免与之接触；另一方面遵循全球哮喘倡议(GINA)指南给予糖皮质激素等药物治疗，大部分哮喘患者在现有的治疗指南下病情可以得到控制，但有5％到10％的患者患有严重或者不可控哮喘，这部分患者的病情恶化率和住院率高，医疗支出能占到整个哮喘治疗支出的60％以上。因此，哮喘不可控患者的治疗仍是目前亟需解决的问题。
[0004]对于变应原明确的过敏患者还可以进行变本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种屋尘螨变应原特异性IgG Fab抗体片段的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)采集经过变应原特异性免疫治疗的屋尘螨过敏患者的血清，使用结合缓冲液I稀释血清，过滤，得血清样品；将血清样品上蛋白质A亲和层析柱，然后使用洗脱缓冲液洗脱蛋白质A亲和层析柱上的血清IgG抗体，收集洗脱液，获得血清总IgG抗体；2)使用结合缓冲液II平衡亲和层析柱，将屋尘螨加至亲和层析柱耦合，用结合缓冲液II平衡，加入步骤1)的血清总IgG抗体，再用洗脱缓冲液洗脱结合在亲和层析柱上的屋尘螨特异性IgG抗体，收集洗脱液，获得屋尘螨特异性IgG抗体；3)在步骤2)获得的屋尘螨特异性IgG抗体中加入琼脂糖连接的木瓜蛋白酶，混匀孵育，离心去除琼脂糖连接的木瓜蛋白酶，收集上清，并再次以蛋白质A亲和层析柱去除未酶解的屋尘螨特异性IgG抗体，获得屋尘螨变应原特异性IgG Fab抗体片段。2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述屋尘螨特异性IgG抗体与木瓜蛋白酶的质量比为9:(0.5～2)，更优选地，所述屋尘螨特异性IgG抗体与木瓜蛋白酶的质量比为9:1。3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述结合缓冲液I包括以下质量浓度的组分：0.02M磷酸钠，0.02M柠檬酸钠，PH 7.5...

【专利技术属性】
技术研发人员：冯木林，
申请(专利权)人：阳江市人民医院，
类型：发明
国别省市：