黑胶虫清除试剂及其制备方法技术

本发明专利技术提供一种黑胶虫清除试剂及其制备方法，包括：庆大霉素、两性霉素B、四环素、派拉西林及鱼精蛋白；其中，所述黑胶虫清除试剂中，所述庆大霉素的浓度为1μg/mL～10μg/mL，所述两性霉素B的浓度为1μg/mL～10μg/mL，所述四环素的浓度为5μg/mL～15μg/mL，所述派拉西林的浓度为10μg/mL～20μg/mL，所述鱼精蛋白的浓度为5μg/mL～15μg/mL。本发明专利技术的黑胶虫清除试剂，具有清除效果显著，对细胞无害；原料物质的配比方法简易，流程简单；成本较低等优点。优点。优点。

【技术实现步骤摘要】
黑胶虫清除试剂及其制备方法


[0001]本专利技术涉及生物
，特别是涉及一种黑胶虫清除试剂及其制备方法。

技术介绍

[0002]黑胶虫污染，是细胞培养过程中的一种常见污染之一。在细胞培养过程中，很多科研人员会受到黑胶虫污染的影响，造成实验无法顺利开展。黑胶虫特指在显微镜下可以看到细胞培养时存在的运动小黑点。有黑胶虫污染的细胞会存在很多游动的小黑点，这些小黑点与细胞共生，随细胞传代而传代，消耗细胞营养，最终使细胞状态变差，严重的会导致细胞死亡。然而，目前所有试剂对于去除黑胶虫污染均没有很好的效果。

技术实现思路

[0003]为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术提供一种黑胶虫清除试剂，包括：庆大霉素、两性霉素B、四环素、派拉西林及鱼精蛋白；其中，所述黑胶虫清除试剂中，所述庆大霉素的浓度为1μg/mL～10μg/mL，所述两性霉素B的浓度为1μg/mL～10μg/mL，所述四环素的浓度为5μg/mL～15μg/mL，所述派拉西林的浓度为10μg/mL～20μg/mL，所述鱼精蛋白的浓度为5μg/mL～15μg/mL。
[0004]可选地，还包括细胞培养基。
[0005]本专利技术还提供一种黑胶虫清除试剂的制备方法，包括：
[0006]制备庆大霉素母液、两性霉素B母液、四环素母液、派拉西林母液及鱼精蛋白母液；其中，所述庆大霉素母液中所述庆大霉素的浓度为1mg/mL～10mg/mL，所述两性霉素B母液中所述两性霉素B的浓度为1mg/mL～10mg/mL，所述四环素母液中所述四环素的浓度为5mg/mL～15mg/mL，所述派拉西林母液中所述派拉西林的浓度为10mg/mL～20mg/mL，所述鱼精蛋白母液中所述鱼精蛋白的浓度为5mg/mL～15mg/mL；
[0007]制备完全细胞培养基；
[0008]将所述庆大霉素母液、所述两性霉素B母液、所述四环素母液、所述派拉西林母液及所述鱼精蛋白母液分别与所述完全细胞培养基以1:1000的体积比混合均匀，以得到黑胶虫清除试剂，所述黑胶虫清除试剂中所述庆大霉素的浓度为1μg/mL～10μg/mL，所述两性霉素B的浓度为1μg/mL～10μg/mL，所述四环素的浓度为5μg/mL～15μg/mL，所述派拉西林的浓度为10μg/mL～20μg/mL，所述鱼精蛋白的浓度为5μg/mL～15μg/mL。
[0009]可选地，制备所述庆大霉素母液包括：
[0010]称取所述庆大霉素，将所述庆大霉素加入双蒸水溶解，并用超声波仪器充分超声混匀；
[0011]将所得到的溶液通过0.22μm的滤器过滤，以得到所述庆大霉素母液。
[0012]可选地，制备所述两性霉素B母液包括：
[0013]称取所述两性霉素B，将所述两性霉素B加入双蒸水溶解，并用超声波仪器充分超声混匀；
[0014]将所得到的溶液通过0.22μm的滤器过滤，以得到所述两性霉素B母液。
[0015]可选地，制备所述四环素母液包括：
[0016]称取所述四环素，将所述四环素加入双蒸水溶解，并用超声波仪器充分超声混匀；
[0017]将所得到的溶液通过0.22μm的滤器过滤，以得到所述四环素母液。
[0018]可选地，制备所述派拉西林母液包括：
[0019]称取所述派拉西林，将所述派拉西林加入双蒸水溶解，并用超声波仪器充分超声混匀；
[0020]将所得到的溶液通过0.22μm的滤器过滤，以得到所述派拉西林母液。
[0021]可选地，制备所述鱼精蛋白母液包括：
[0022]称取所述鱼精蛋白，将所述鱼精蛋白加入双蒸水溶解，并用超声波仪器充分超声混匀；
[0023]将所得到的溶液通过0.22μm的滤器过滤，以得到所述鱼精蛋白母液。
[0024]可选地，所述制备完全细胞培养基包括：提供所述细胞培养基，向所述细胞培养基中加入血清以得到所述完全细胞培养基。
[0025]可选地，所述血清包括胎牛血清。
[0026]如上所述，本专利技术的黑胶虫清除试剂及其制备方法，具有以下有益效果：本专利技术的黑胶虫清除试剂具有清除效果显著，对细胞无害；原料物质的配比方法简易，流程简单；成本较低等优点。
附图说明
[0027]图1为本专利技术的黑胶虫清除试剂的制备方法的流程图。
[0028]图2为细胞培养环境中黑胶虫污染图。
[0029]图3为使用本专利技术的黑胶虫清除试剂对图2中的黑胶虫进行清除后的效果图。
具体实施方式
[0030]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0031]以下描述中的优选实施例只作为举例，本领域技术人员可以想到其他显而易见的变型。在以下描述中界定的本专利技术的基本原理可以应用于其他实施方案、变形方案、改进方案、等同方案以及没有背离本专利技术的精神和范围的其他技术方案。
[0032]细胞培养是指在体外模拟体内环境，在无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等环境下使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。细胞培养已广泛应用于病毒学、免疫学、遗传学、生物医学、临床医学、肿瘤学等各项生命科学研究领域。
[0033]“黑胶虫”污染，是细胞培养过程中的一种常见污染之一。在细胞培养过程中，很多科研人员会受到“黑胶虫”污染的影响，造成实验无法顺利开展。“黑胶虫”特指在显微镜下可以看到细胞培养时存在的运动小黑点。“黑胶虫”有时呈点状，有时呈小片状，运动形式为类似布朗运动的原地振动(如图2所示)。目前可以确定“黑胶虫”不是细菌、不是霉菌，也不
是支原体。但即便如此，学术界对黑胶虫仍然尚无定论，没有给予明确定论，它可能是一种原虫、是微生物感染、或是其他菌类，都尚无可知。
[0034]“黑胶虫”污染难题在当今全世界高校、医院、科研院所的实验室和细胞房中普遍存在。同时，“黑胶虫”具有耐高温、耐高压，低温冻存后复苏还能存活的特性，非常难清除，因此“黑胶虫”污染对细胞培养和科研人员的研究进度造成了极大的影响。应对细胞污染困扰，很多实验室目前常用的解决方案是使用双抗(青霉素
‑
链霉素)或者两性霉素B等杀菌的方式予以解决，但是这种方式仅可去除细菌和真菌，对于去除“黑胶虫”污染却没有很好的效果。
[0035]实施例一
[0036]请参阅图2至图3所示，本专利技术提供一种黑胶虫清除试剂，包括：庆大霉素、两性霉素B、四环素、派拉西林及鱼精蛋白；其中，所述黑胶虫清除试剂中，所述庆大霉素的浓度为1μg/mL～10μg/mL，所述两性霉素B的浓度为1μg/mL～10μg/mL，所述四环素的浓度为5μg/mL～15μg/mL，所述派拉西林的浓度为10μg/mL～20μg/mL，所述鱼精蛋白的浓度为5μg/mL～15μg本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种黑胶虫清除试剂，其特征在于，包括：庆大霉素、两性霉素B、四环素、派拉西林及鱼精蛋白；其中，所述黑胶虫清除试剂中，所述庆大霉素的浓度为1μg/mL～10μg/mL，所述两性霉素B的浓度为1μg/mL～10μg/mL，所述四环素的浓度为5μg/mL～15μg/mL，所述派拉西林的浓度为10μg/mL～20μg/mL，所述鱼精蛋白的浓度为5μg/mL～15μg/mL。2.根据权利要求1所述的黑胶虫清除试剂，其特征在于：还包括细胞培养基。3.一种黑胶虫清除试剂的制备方法，其特征在于，包括：制备庆大霉素母液、两性霉素B母液、四环素母液、派拉西林母液及鱼精蛋白母液；其中，所述庆大霉素母液中所述庆大霉素的浓度为1mg/mL～10mg/mL，所述两性霉素B母液中所述两性霉素B的浓度为1mg/mL～10mg/mL，所述四环素母液中所述四环素的浓度为5mg/mL～15mg/mL，所述派拉西林母液中所述派拉西林的浓度为10mg/mL～20mg/mL，所述鱼精蛋白母液中所述鱼精蛋白的浓度为5mg/mL～15mg/mL；制备完全细胞培养基；将所述庆大霉素母液、所述两性霉素B母液、所述四环素母液、所述派拉西林母液及所述鱼精蛋白母液分别与所述完全细胞培养基以1:1000的体积比混合均匀，以得到黑胶虫清除试剂，所述黑胶虫清除试剂中所述庆大霉素的浓度为1μg/mL～10μg/mL，所述两性霉素B的浓度为1μg/mL～10μg/mL，所述四环素的浓度为5μg/mL～15μg/mL，所述派拉西林的浓度为10μg/mL～20μg/mL，所述鱼精蛋白的浓度为5μg/mL...

【专利技术属性】
技术研发人员：曲红金，吕妍，张伟，姚仲，汪子喻，覃佐菊，
申请(专利权)人：上海佐润生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：