慢病毒载体的制备方法及得到的慢病毒载体和应用技术

技术编号:30820286 阅读:29 留言:0更新日期:2021-11-18 11:18
本发明专利技术属于生物领域,尤其涉及慢病毒载体的制备方法及得到的慢病毒载体和应用。本发明专利技术公开了一种慢病毒载体的制备方法,包括:以基于LTR1.27

【技术实现步骤摘要】
genome指“RNA基因组”,Minus strand strong stop synthesis指“负链强终止合成”,Minus strand transfer指“负链跳转”,Minus strand extension指“负链延伸”,Plus strand strong stop synthesis指“正链强终止合成”,Plus strand transfer指“正链跳转”,dsDNA synthesis指“DNA合成”。如图2所示,tRNA作为反转录引物与5

端PBS结合,反转录产物,跳到3

端继续反转录最终获得的反转录产物是带有包装信号(ψ)、RRE等HIV基因组序列。最近报道的第四代慢病毒,将5

端的R和U5区删除,包装信号(ψ)和RRE等序列放到了3

端相对三代病毒载体,反转录时候直接从3

端开始反转录,最终得到的反转录产物没有包装信号(ψ),RRE等HIV基因组序列,使整合到基因组中的序列只包含HIV-1基因组的序列的4.8%,进一步增强了安全性,但是随之带来的问题是滴度本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种慢病毒载体的制备方法,其特征在于,包括:以基于LTR1.27-GEW质粒为骨架,在5

端添加R和U5区,得到慢病毒载体Obio-01。2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,将慢病毒载体Obio-01中的5

CMV启动子更换为猕猴免疫缺陷病毒的U3启动子,得到慢病毒载体Obio-02。3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,将慢病毒载体Obio-01中的5

CMV启动子更换为人免疫缺陷病毒-1的U3启动子,得到慢病毒载体Obio-03。4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,将将慢病毒载体Obio-01中的5

CMV启动子更换为人免疫缺陷病毒-2的U3启动子,得到慢病毒载体Obio-04。5.根据权利要求1-...

【专利技术属性】
技术研发人员:杨兴林杨佳丽詹霞贾国栋由庆睿
申请(专利权)人:和元生物技术上海股份有限公司
类型:发明
国别省市:

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