用于DRG特异性降低转基因表达的组合物制造技术

本文提供了一种重组AAV(rAAV)，所述rAAV包括AAV衣壳和包装在其中的载体基因组，其中所述载体基因组包括AAV 5'反向末端重复序列(ITR)、对用于在靶细胞中表达的基因产物进行编码的工程化核酸序列以及选择性地抑制背根神经节(DRG)细胞中的表达的miRNA靶序列。还提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括在调配物缓冲液中的如本文所描述的rAAV，以及一种在选择性地阻止DRG细胞中的表达的同时用靶向CNS的基因疗法治疗人类受试者的方法。CNS的基因疗法治疗人类受试者的方法。CNS的基因疗法治疗人类受试者的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于DRG特异性降低转基因表达的组合物

技术介绍

[0001]用于体内基因疗法的精选载体平台基于灵长类动物源性腺相关病毒(AAV)。在二十世纪六十年代，基因疗法产物源自从腺病毒制剂中分离的AAV(Hoggan,M.D.等人,《美国国家科学院院刊(Proc Natl Acad Sci U S A)》55:1467
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1474,1966)。尽管这些载体是安全的，但由于转导较差，许多程序在临床上失败了。在世纪之交，研究人员发现了内源性AAV家族，其作为载体实现了更高的转导效率，同时保持了良好的安全性特性(Gao,G.等人,《病毒学杂志(J Virol)》78:6381
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6388,2004)。
[0002]宿主对AAV载体的不良应答很小。与引发强烈急性炎性应答的非病毒和腺病毒载体(Raper,S.E.等人,《分子遗传学与代谢(Mol Genet Metab)》80:148
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158,2003；Zhang,Y.等人,《分子疗法(Mol Ther)》3:697
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707,2001)相比，AAV载体不是本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于基因递送的组合物，所述组合物特异性地抑制基因产物在背根神经节(DRG)中的表达，所述组合物包括表达盒，所述表达盒是包括以下的核酸序列：(a)在调控序列的控制下的基因产物的编码序列，所述调控序列引导所述基因产物在含有所述表达盒的细胞中的表达；以及(b)至少一个靶序列，所述至少一个靶序列对miR
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183、miR
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182或miR
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96中的至少一个具有特异性，所述至少一个靶序列可操作地连接在所述编码序列(a)的3'端处。2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物包括靶向序列的至少两个串联重复序列，所述靶向序列包括可相同或不同的至少一个第一miRNA靶序列和至少一个第二miRNA靶序列。3.根据权利要求2所述的组合物，其中所述至少两个miRNA串联重复序列定位在3'UTR中。4.根据权利要求1到3中任一项所述的组合物，其中所述表达盒包括具有三个miRNA串联重复序列的3'UTR。5.根据权利要求2到4中任一项所述的组合物，其中所述串联miRNA靶序列是连续的或由1到10个核酸的间隔子隔开，其中所述间隔子不是miRNA靶序列。6.根据权利要求1到5中任一项所述的组合物，其中存在两组定位在所述3'UTR中的至少两个miRNA靶序列。7.根据权利要求2到6中任一项所述的组合物，其中所述至少两个miRNA串联重复序列中的第一个的起点在距基因编码序列的3'端20个核苷酸内。8.根据权利要求2到6中任一项所述的组合物，其中所述至少两个miRNA串联重复序列中的第一个的起点距基因编码序列的3'端至少100个核苷酸。9.根据权利要求2到6中任一项所述的组合物，其中所述3'UTR和所述miRNA串联重复序列的长度为200到1200个核苷酸。10.根据权利要求1到9中任一项所述的组合物，其中所述表达盒包括定位在所述3'UTR中的四个miRNA靶序列。11.根据权利要求1到8中任一项所述的组合物，其中所述表达盒进一步包括至少一个靶序列，所述至少一个靶序列对5'UTR中的miR
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183、miR
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182或miR
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96具有特异性。12.根据权利要求11所述的组合物，其中所述表达盒包括定位在所述5'UTR和所述3'UTR两者中的至少两个miRNA靶序列。13.根据权利要求1到12中任一项所述的组合物，其中表达盒mRNA或DNA正链的所述至少一个miRNA靶序列是(a)AGTGAATTCTACCAGTGCCATA(SEQ ID NO:1)；(b)AGCAAAAATGTGCTAGTGCCAAA(SEQ ID NO:2)；(c)AGTGTGAGTTCTACCATTGCCAAA(SEQ ID NO:3)；或(d)AGGGATTCCTGGGAAAACTGGAC(SEQ ID NO:4)。14.根据权利要求2到13中任一项所述的组合物，其中两个...

【专利技术属性】
技术研发人员：J，
申请(专利权)人：宾夕法尼亚州大学信托人，
类型：发明
国别省市：