【技术实现步骤摘要】
一种基于需钠弧菌生产左旋多巴的方法
[0001]本专利技术涉及生物工程领域，尤其涉及一种基于需钠弧菌生产左旋多巴的方法。
技术介绍
[0002]左旋多巴(3,4
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Dihydroxylphenylalanine,L
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DOPA)属于苯丙氨酸类化合物，是L
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酪氨酸的一种类似物，作为多巴胺的前体，左旋多巴可以通过血脑屏障，被氨基酸脱羧酶转化为多巴胺，目前治疗帕金森综合症最为常用的有效药物之一。
[0003]左旋多巴的制备方法主要有化学合成、天然植物中提取、生物酶催化及微生物发酵。化学合成法生产左旋多巴也由于环境污染严重、工艺复杂和转换率低等缺点大大限制其应用；从天然植物中提取左旋多巴的方法由于产量低、生产率低和成本高而无法满足市场需求。
[0004]目前已经有几种生物催化剂被应用于全细胞催化法生产左旋多巴，其中酪氨酸酶、对羟基苯乙酸酯3
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羟化酶(PHAH)和酪氨酸苯酚裂解酶的研究相对深入。酪氨酸酶是一种氧化还原酶，同时具有甲酚酶和儿茶酚酶...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种基于需钠弧菌生产左旋多巴的方法，其特征在于包括设计合成重组质粒pET
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28a(+)
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FnTPL，将重组质粒导入具有T7聚合酶表达系统的需钠弧菌中获得重组需钠弧菌进行活化培养，将活化后的重组需钠弧菌接种到培养基中，37℃下诱导培养，离心收菌后使用磷酸缓冲液重悬菌体，加入反应体系进行全细胞催化反应，所述反应体系包括：磷酸盐缓冲液、亚硫酸钠、EDTA
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2Na、磷酸吡哆醛、邻苯二酚、丙酮酸钠、醋酸铵，反应过程中通过补加反应底物邻苯二酚、丙酮酸钠、醋酸铵维持生产效率。2.如权利要求1所述的一种基于需钠弧菌生产左旋多巴的方法，其特征在于所述催化反应温度是10～40℃。3.如权利要求2所述的一种基于需钠弧菌生产左旋多巴的方法，其特征在于所述催化反应温度是20℃。4.如权利要求1所述的一种基于需钠弧菌生产左旋多巴的方法，其特征在于所述诱导时长是2
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5h。5.如权利要求4所述的一种基于需钠弧菌生产左旋多巴的方法，其特征在于所述诱导时长是4h。6.如权利要求1所述的一种基于需钠...
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