用于生产莫匹罗星的基因工程菌株及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供一种用于生产莫匹罗星的基因工程菌株及其制备方法。本发明专利技术首次发现rsmA为负调控基因，即通过敲除rsmA基因、降低rsmA基因表达或降低rsmA蛋白的活性能够提高荧光假单胞菌的莫匹罗星产量。进一步地，本发明专利技术以荧光假单胞菌为底盘菌株，通过敲除调控基因rsmA、rsmN和xylB基因，并在相应位置上分别整合mupR基因，获得所述生产莫匹罗星的菌株；其中rsmA为负调控位点，rsmN和xylB为中性位点，均属于基因组天然位点，较为稳定，不易在传代过程中丢失；同时敲除rsmA替换为mupR基因不仅能够利用mupR基因表达来提升莫匹罗星产量，还能够消除rsmA的负调控作用，协同提升莫匹罗星产量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程，涉及一种用于生产莫匹罗星的基因工程菌株及其制备方法和应用。

技术介绍

1、聚酮类抗生素莫匹罗星(mupirocin)由假单胞菌酸(pseudomonic acids,pa)a、b、c、d组成，其主要活性成分为假单胞菌酸a(pa-a)。莫匹罗星可以竞争性地抑制细菌异亮氨酰trna合酶ilers的活性，从而阻碍异亮氨酸掺入，抑制敏感菌体内的蛋白质合成，最终导致菌体的死亡。因而它能够高效且广谱地拮抗革兰氏阳性菌，如葡萄球菌(staphylococci)和链球菌(streptococci)等，对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistantstaphylococcus aureus，mrsa)具备非常良好的抗菌效果，是目前全球治疗mrsa的首选局部抗生素。莫匹罗星还能拮抗部分革兰氏阴性菌如流感嗜血杆菌(haemophilusinfluenzae)、脑膜炎双球菌(neisseria meningitidis)和奈瑟淋球菌(neisseriagonorrhoeae)；对部分病原真菌如糠秕马拉色菌(malassezia fu本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.rsmA基因在提高荧光假单胞菌的莫匹罗星产量中的应用，其特征在于，所述rsmA基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述荧光假单胞菌包括P.fluorescensNCIMB 10586菌株。

3.rsmA基因的抑制剂在提高荧光假单胞菌的莫匹罗星产量中的应用，其特征在于，所述抑制剂包括敲除rsmA基因的试剂、降低rsmA基因表达的试剂、降低rsmA蛋白活性的试剂中的一种或多种。

4.一种生产莫匹罗星的菌株的构建方法，其特征在于，以荧光假单胞菌为底盘菌株，通过敲除rsmA基因，替换为mupR基因，获得...

【技术特征摘要】

1.rsma基因在提高荧光假单胞菌的莫匹罗星产量中的应用，其特征在于，所述rsma基因的核苷酸序列如seq id no.1所示；

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述荧光假单胞菌包括p.fluorescensncimb 10586菌株。

3.rsma基因的抑制剂在提高荧光假单胞菌的莫匹罗星产量中的应用，其特征在于，所述抑制剂包括敲除rsma基因的试剂、降低rsma基因表达的试剂、降低rsma蛋白活性的试剂中的一种或多种。

4.一种生产莫匹罗星的菌株的构建方法，其特征在于，以荧光假单胞菌为底盘菌株，通过敲除rsma基因，替换为mupr基因，获得所述生产莫匹罗星的菌株。

5.一种生产莫匹罗星的菌株的构建方法，其特征在于，以荧光假单胞菌为底盘菌株，通过敲除rsma、rsmn和xylb基因，并在相应位置上分别整合mupr基因，获得所述生产莫匹罗星的菌株。

6.根据权利要求4或5...

【专利技术属性】
技术研发人员：张雪洪，蔡玉缘，王威，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：