用于生产造血谱系细胞的方法和系统技术方案

在一个方面中，本文提供了由人多能干细胞(hPSC)体外产生的造血谱系细胞例如自然杀伤细胞，其可用作治疗的细胞源。还提供了制造和使用其的方法和组合物。使用其的方法和组合物。使用其的方法和组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于生产造血谱系细胞的方法和系统
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2018年10月24日提交的美国临时申请号62/749,947的优先权和权益，通过引用将该申请的内容纳入本文。


[0003]本公开总体上涉及用于由例如人多能干细胞在体外生成造血细胞的方法和组合物。
[0004]背景
[0005]自胚胎发育的很早期开始，造血是伴随所有血液细胞组分形成的多步骤过程。健康的成年人每天必须产生10
11
至10
12
个血细胞以维持正常的身体功能。输注红细胞(RBC)和血小板可以挽救生命。骨髓，脐带或外周血造血干细胞(HSC)移植多年来广泛应用于血液恶性肿瘤和其它病症的临床治疗。最近，其他重要的造血细胞例如树突状细胞(DC)，T淋巴细胞(T
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Cells)和NK细胞在免疫
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肿瘤领域中的成功引起了人们极大的兴趣。
[0006]干细胞，尤其是多能干细胞(PSC)，能够成为我们体内任何类型的细胞。开发稳健的方法来生产高质量的所需谱系细胞是实现该新本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于体外产生造血谱系细胞的方法，其包括：(a)提供多个第一球体，其包含在第一培养基内的多能干细胞(PSC)，其中所述第一球体的直径达到约60
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150微米，约70
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120微米，或约80
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100微米的平均大小；其中优选所述第一球体由3维(3D)球体培养产生，期间监测球体大小；(b)在第二培养基中3D球体培养多个第一球体以诱导所述PSC分化产生多个第二球体，其包括造血内皮细胞(HEC)；(c)在第三培养基中3D球体培养多个第二球体以诱导HEC分化产生多个第三球体，其包括造血祖细胞(HPC)；(d)允许所述HPC从所述多个第三球体中释放以获得HPC的基本单细胞悬浮液；以及(e)任选地，进一步分化所述HPC的基本单细胞悬液成为红系/巨核细胞共同祖细胞，红细胞，巨核细胞，血小板，淋巴样共同祖细胞，淋巴样谱系细胞，淋巴细胞(例如T淋巴细胞)，自然杀伤(NK)细胞，髓样共同祖细胞，粒单核细胞共同祖细胞，单核细胞，巨噬细胞，和/或树突细胞。2.一种用于体外产生淋巴谱系细胞的方法，其包括：(a)提供多个第一球体，其包含在第一培养基内的多能干细胞(PSC)，其中所述第一球体的直径达到约60
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150微米，约70
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120微米，或约80
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100微米的平均大小；其中优选所述第一球体由3维(3D)球体培养产生，期间监测球体大小；(b)在第二培养基中3D球体培养所述多个第一球体以诱导所述PSC分化产生多个第二球体，其包含造血内皮细胞(HEC)；(c)酶解所述多个第二球体以获得HEC的基本单细胞悬浮液；(d)将所述HEC的基本单细胞悬浮液接种到模拟体内造血生态龛的支架中；以及(e)在所述支架内将所述HEC培养并分化成淋巴谱系细胞。3.一种用于体外产生淋巴谱系细胞的方法，其包括：(a)提供多个第一球体，其包含在第一培养基内的多能干细胞(PSC)，其中所述第一球体的直径达到约60
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150微米，约70
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120微米，或约80
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100微米的平均大小；其中优选所述第一球体由3维(3D)球体培养产生，期间监测球体大小；(b)在第二培养基中3D球体培养所述多个第一球体以诱导所述PSC分化产生多个第二球体，其包含造血内皮细胞(HEC)；以及(c)在无支架第三培养基中，将所述第二球体中的所述HEC培养并分化为淋巴谱系细胞，期间允许所述淋巴谱系细胞从所述第二球体中释放出来。4.如权利要求1
‑
3中任一项所述的方法，其中所述PCS是胚胎干细胞或诱导多能干细胞，优选来自人。5.如权利要求1
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3中任一项所述的方法，其中所述PCS的Oct
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4表达至少95％阳性。6.如权利要求1
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3中任一项所述的方法，其中每个3D球体培养步骤包括在旋转瓶或搅拌罐生物反应器中培养，优选在连续搅拌下。7.如权利要求1
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3中任一项所述的方法，其中所述第一培养基是PSC培养基，补充有约1
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10ng/mL的TGF
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13，约10
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500ng/mL的bFGF，以及约1
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5μM的Y27632。8.如权利要求7所述的方法，其中所述PSC培养基是mTeSR
TM
1，mTeSR
TM
2，TeSR
TM
...

【专利技术属性】
技术研发人员：冯强，张妙恽，卢世江，
申请(专利权)人：赫贝细胞股份有限公司，
类型：发明
国别省市：