二裂酵母发酵产物及其制备方法和用途技术

本发明专利技术公开了二裂酵母发酵产物及其制备方法和用途，该制备方法包括以下步骤：将长双歧杆菌接种于种子培养基中，厌氧培养活化，得到种子液；将种子液接种至发酵培养基中，调节发酵液初始pH值为6.5～7.0，厌氧发酵培养；所得发酵液离心，取上清液，为二裂酵母发酵产物；所述的种子培养基和发酵培养基，是取豆渣5～10g、甘蔗渣1～5g，补水至1kg。本发明专利技术采用豆渣和甘蔗渣作为双歧杆菌培养基，利用豆渣和甘蔗渣丰富多样的营养成分进一步强化提升双歧杆菌的有益代谢产物。本发明专利技术的二裂酵母发酵产物滤液在化妆品中具有较好的应用效果：具有优异的促进屏障修复相关基因表达、促进胶原蛋白合成的功效性能。成的功效性能。成的功效性能。

【技术实现步骤摘要】
二裂酵母发酵产物及其制备方法和用途


[0001]本专利技术涉及微生物发酵领域，具体涉及二裂酵母发酵产物及其制备方法和用途。

技术介绍

[0002]二裂酵母发酵产物(BIFIDA FERMENT FILTRATE)，是双歧杆菌发酵后得到的代谢产物，主要成分为有机酸(乳酸、柠檬酸和琥珀酸等)、维生素(B1、B2、B6、B12、泛酸、叶酸等)、细菌素(大多属于水溶性多肽)、多糖、蛋白质与氨基酸等。
[0003]二裂酵母发酵产物中的乳酸是天然保湿因子，存在于人体肌肤中，可有效去除细纹、皱纹，加快角质更新等功效；叶酸可以活化皮肤表皮细胞，促进水分的保养和营养成分的吸收，可减轻皮肤的角化速度，从而达到美容养肤和嫩化皮肤的目的；另外，氨基酸，脂质，多糖，腺苷，维生素，微量矿物质、维生素B群等活性成分，能滋润、营养肌肤，帮助肌肤抵御外界环境和压力对皮肤造成的伤害，同时能促迚多种与表皮分化和皮肤屏障功能相关的蛋白基因表达，収挥祛皱、修复、保湿、增强皮肤弹性的功效。因此，二裂酵母发酵产物具有极大的市场应用前景。但目前用于化妆品原料的二裂酵母发酵产物滤液制备工艺复杂，且常需要不断补充外源性营养成分促进双歧杆菌的发酵生长，使得代谢产物中残留一些外源添加物成分，且同时提高了发酵的生产成本。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供二裂酵母发酵产物的制备方法，通过采用豆渣和甘蔗渣作为培养基，从而有效提高所得发酵产物的抗衰老能力，具体体现在促进屏障修复相关基因的表达，提高成纤维细胞活性和COL
‑
>I蛋白表达量。这些效果是现有技术方法未能达到的。
[0005]本专利技术的目的通过下述技术方案实现：
[0006]二裂酵母发酵产物的制备方法，包括以下步骤：
[0007](1)将长双歧杆菌接种于种子培养基中，厌氧培养活化，得到种子液；
[0008](2)将种子液接种至发酵培养基中，调节发酵液初始pH值为6.5～7.0，厌氧发酵培养；
[0009](3)将步骤(2)所得发酵液离心，取上清液，为二裂酵母发酵产物；
[0010]优选地，所得二裂酵母发酵产物经过低温巴氏灭菌、过滤、添加防腐剂后，得到可产业化使用的二裂酵母发酵产物。
[0011]步骤(1)所述的长双歧杆菌，优选长双歧杆菌ATCC 15697；
[0012]所述的种子培养基和发酵培养基，是取豆渣5～10g、甘蔗渣1～5g，补水至1kg；其中的豆渣、甘蔗渣粉碎后过40～80目筛网；豆渣中含有大量的蛋白质、膳食纤维、氨基酸、维生素、矿物质等各类营养元素，为双歧杆菌生长提供天然的N源；另外，利用甘蔗渣中丰富的多糖成分，为双歧杆菌生长提供天然的C源。
[0013]优选地，步骤(1)中，长双歧杆菌的接种量占种子培养基质量的1％～3％；所述厌氧培养的温度为35～40℃(特别优选36～38℃)，培养时间20～30h；所得种子液中长双歧杆
菌的浓度为1
×
106～1
×
108CFU/mL。
[0014]优选地，步骤(2)中，种子液占发酵培养基体积的3％～5％；厌氧发酵培养的培养温度为36～38℃，培养时间为40～60h；调节发酵液pH值是指利用柠檬酸
‑
柠檬酸钠缓冲溶液进行调节；
[0015]步骤(3)中，所述的离心，是3000～6000r/min离心15～30min；
[0016]所述的低温巴氏灭菌，灭活处理的温度为60～80℃，灭活处理的时间为20～50min，完成对微生物的灭活处理；
[0017]所述的过滤，利用陶瓷膜滤机过滤，将滤液依次经过1.5μm、0.6μm的陶瓷膜滤柱除去细小杂质。
[0018]所述的防腐剂为多元醇、苯氧乙醇、乙基己基甘油、对羟基苯乙酮、苯甲酸铵或山梨酸钾中的一种以上；
[0019]所述的多元醇为丁二醇、戊二醇或己二醇中的一种以上。
[0020]上述方法制得的二裂酵母发酵产物可以应用在化妆品中。
[0021]本专利技术相对于现有技术具有如下的优点及效果：
[0022](1)本专利技术采用豆渣和甘蔗渣作为双歧杆菌培养基，利用豆渣和甘蔗渣丰富多样的营养成分进一步强化提升双歧杆菌的有益代谢产物。
[0023](2)本专利技术发酵产物离心处理后，分别收集下层长双歧杆菌和培养基余料，和上层长双歧杆菌代谢产物；将上层长双歧杆菌代谢产物经过处理获得二裂酵母发酵产物滤液，下层长双歧杆菌和培养基余料可回收循环利用，进一步降低产品成本。
[0024](3)本专利技术的二裂酵母发酵产物滤液在化妆品中具有较好的应用效果：具有优异的促进屏障修复相关基因表达、促进胶原蛋白合成的功效性能。
附图说明
[0025]图1是屏障修复相关基因扩增倍数柱状图。
[0026]图2是成纤维细胞活性柱状图。
[0027]图3是COL
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I蛋白表达量柱状图。
具体实施方式
[0028]下面结合实施例及附图对本专利技术作进一步详细的描述，但本专利技术的实施方式不限于此。
[0029]实施例1
[0030]一种二裂酵母发酵产物的制备方法，包括如下步骤：
[0031](1)将长双歧杆菌(ATCC 15697)接种于种子培养基中厌氧发酵培养，得到种子液；其中，双歧杆菌的接种量是种子培养基体积的3％，培养温度为38℃，时间为30h，种子液的浓度为1
×
108CFU/mL；所述种子培养液是取豆渣10g、甘蔗渣3g，补水至1kg；其中的豆渣、甘蔗渣粉碎后过60目筛网。
[0032](2)将培养好的种子液按培养基体积的5％接种于已灭菌处理的发酵培养基中，利用0.01mol/L浓度柠檬酸
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柠檬酸钠缓冲溶液调节发酵罐内料液pH为7.0，厌氧发酵培养,培养温度为38℃，时间为60h；所述发酵培养基是取豆渣10g、甘蔗渣3g，补水至1kg。
[0033](3)利用卧式离心机转速6000r/min，离心时间15min，分别收集下层长双歧杆菌和培养基余料，和上层长双歧杆菌代谢产物；将上层产物巴氏灭菌，灭活温度为68℃，灭活处理的时间为30min；利用陶瓷膜滤机过滤，将上层滤液依次经过1.5μm、0.6μm的陶瓷膜滤柱除去细小杂质；添加的防腐剂为0.96％(以步骤(2)所得发酵液的体积为计算基准；下同)丁二醇、0.5％戊二醇、0.5％己二醇、0.3％对羟基苯乙酮复配，获得二裂酵母发酵产物。
[0034]实施例2
[0035]一种二裂酵母发酵产物的制备方法，包括如下步骤：
[0036](1)将长双歧杆菌(ATCC 15697)接种于种子培养基中厌氧发酵培养，得到种子液；其中，双歧杆菌的接种量是种子培养基体积的2％，培养温度为37℃，时间为24h，菌种的浓度为3.0
×
107CFU/mL；所述种子培养液是取豆渣5g、甘蔗渣1g，补水至1kg；其中的豆渣、甘蔗渣粉碎后过60目筛网。<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.二裂酵母发酵产物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：(1)将长双歧杆菌接种于种子培养基中，厌氧培养活化，得到种子液；(2)将种子液接种至发酵培养基中，调节发酵液初始pH值为6.5～7.0，厌氧发酵培养；(3)将步骤(2)所得发酵液离心，取上清液，为二裂酵母发酵产物；所述的种子培养基和发酵培养基，是取豆渣5～10g、甘蔗渣1～5g，补水至1kg。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所得二裂酵母发酵产物经过低温巴氏灭菌、过滤、添加防腐剂后，得到可产业化使用的二裂酵母发酵产物。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)所述的长双歧杆菌为长双歧杆菌ATCC 15697。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述的豆渣、甘蔗渣粉碎后过40～80目筛网。5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，长双歧杆菌的接种量占种子培养基质量的1％～3％；所述厌氧培养的温度为35～40℃，培养时间20～30h；所得种子液中长双歧杆菌的浓度为1

【专利技术属性】
技术研发人员：李海珍，李海燕，
申请(专利权)人：山东朵拉朵尚生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：